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Estabilidad genética entre clones de berenjena in vitro inducidos por diferentes reguladores de crecimiento de plantas
Many factors may influence the genetic stability of plant in vitro clones, among which the genotype and the regenerative process induced by plant growth regulators. The resulting somaclonal variations may be useful for breeding projects, but may be detrimental to germplasm conservation. The objective of this work was to evaluate the genetic stability of Solanum melongena cv. Florida Market clones, obtained in response to different plant growth regulators. For the production of clones, leaf explants were used from commercial seed germinated plants. The explants were inoculated in Murashige and Skoog medium supplemented with different plant growth regulators at predefined concentrations. The DNA was extracted by the CTAB method from leaves of complete plants obtained by somatic embryogenesis induced by naphthaleneacetic acid (NAA) or indirect organogenesis induced by benzylaminopurine (BAP) or thidiazuron (TDZ). For the RAPD, 117 DNA samples were amplified by ten decamer primers and 49 specific bands were selected among the products for the comparative study. A total of 5733 fragments were obtained, with a rate of 5.37% polymorphism. NAA did not generate polymorphism and the BAP was responsible for the highest rate obtained (14.28%). Two RAPD primers were identified as markers for monitoring the genetic stability of eggplant. The polymorphic pattern was observed only in clones originating from indirect organogenesis. These results indicate the usefulness of a monitoring protocol for studies using in vitro cloned eggplant.Muchos factores pueden influir en la estabilidad genética de los clones de plantas in vitro, entre los que se encuentran el genotipo y el proceso regenerativo inducido por los reguladores del crecimiento. Por lo tanto, las variaciones somaclonales resultantes del cultivo pueden ser útiles para proyectos de mejoramiento genético, pero pueden ser perjudiciales para la conservación de germoplasma. El objetivo de este estudio fue evaluar la estabilidad genética de Solanum melongena cv. Florida Market, obtenida en respuesta a diferentes reguladores del crecimiento. Para la producción de clones se utilizaron explantes de hojas provenientes de plantas obtenidas de semillas germinadas. Los explantes se inocularon en medio de cultivo Murashige y Skoog con los diferentes reguladores del crecimiento en concentraciones predefinidas. El ADN se extrajo mediante el método CTAB a partir de plantas completas obtenidas por medio de embriogénesis somática inducida por ácido naftalenoacético (ANA) u organogénesis indirecta inducida por bencilaminopurina (BAP) o tidiazurón (TDZ). Para el RAPD, 117 muestras de ADN se amplificaron mediante diez cebadores y se seleccionaron 49 bandas puntuales entre los productos, para el estudio comparativo. Se obtuvieron un total de 5733 fragmentos, con una tasa de 5.37% de polimorfismo. ANA no generó polimorfismo y BAP fue responsable de la tasa más alta obtenida (14.28%). Se identificaron dos cebadores RAPD como marcadores para monitorear la estabilidad genética de la berenjena. El patrón polimórfico se observó solo en los clones originados en la organogénesis indirecta. Estos resultados indican la utilidad de un protocolo de monitoreo para estudios que usan berenjena clonada in vitro. Palabras clave: Solanum melongena, cultivo in vitro, variación somaclonal, RAPD, polimorfismo de ADN, fitomejoramient