Development and Validation of a Novel ELISA for the Detection of Neospora Caninum Antibodies in Bovine Sera

Neospora caninum is a world-wide distributed apicomplexan parasite, causative agent of bovine neosporosis, which is one of themajor causes of reproductive losses in cattle affecting both dairy and beef industries. Several techniques are regularly used for the diagnosis of bovine neosporosis. Amongst them, serological techniques are generally preferred, being IFAT the traditionally accepted reference method for diagnosis (gold standard). However, ELISA has become the most eligible method for large-scale screening ofspecific antibodies against N. caninum in diagnostic laboratories around the world, providing results that can be easily standardized between laboratories, within a few hours at a relative low-cost. There is no local production of commercial ELISA tests nor in Argentina neither in South America, therefore they must be purchased abroad, turning unfeasible the routinely use of ELISA tests. Here we have developed and validated accordingly to OIE specifications a novel ELISA test based on soluble antigens from N. caninum tachyzoites to accurately determine the presence of specific antibodies anti- N. caninum antigens in bovine sera samples, enabling the rapid, objective and low-cost diagnosis of bovine neosporosis in Argentina; replacing IFAT and avoiding delays and high importation taxes.Fil: Mansilla, Florencia Celeste. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; ArgentinaFil: Gual, Ignacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Pereyra, Rodrigo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; ArgentinaFil: Turco, Cecilia Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario; Argentin

Impacto de la ancestría genética en la distribución del polimorfismo de interferón-λ4 rs12979860 en una población global de Buenos Aires, Argentina

Human interferon-λ4 is a cytokine involved in early stages of antiviral responses. Strikingly, some allelic variants with diminished antiviral activity reduce the susceptibility to viral infections, thus they would have suffered a positive selection pressure throughout the evolutionary history of the genus Homo. An intronic variant within the IFNλ4 locus (rs12979860, T˃C) emerged as one of the main gene determinants of the response to HCV and other viruses. The rs12979860-C allele has a differential frequency in African, European and Native American populations, though South American data are scarce. Here we characterize for the first time the distribution of rs12979860 genotypes in a sample of the global population of Buenos Aires, Argentina, assessing its association with European, Native American and African parental components. The rs12979860 genotypes were determined by PCR-RFLP in DNA samples from donors of a blood banks of Buenos Aires (n=96), whose genetic individual ancestry (European, African or Native American) had been previously determined using molecular markers. The distribution of rs12979860-CC, CT and TT was 29.17%, 50.0% and 20.83%, respectively. A significant increase in the frequency of CC among donors with a strong European contribution and a greater impact of the Native American component among donors carrying the T allele were observed. Native American and European components were associated to the rs12979860 distribution in a sample of the global population of Buenos Aires, while no differences were directly attributable to the African ancestry. Considering interferon´s key role in antiviral responses, our results may contribute to both bioanthropological and immunogenetic studies associated with infectious diseases.El interferón-λ4 humano es una citoquina involucrada en la respuesta antiviral. Algunas variantes alélicas con menor actividad antiviral, paradójicamente, reducen la susceptibilidad a infecciones virales, por lo que habrían sufrido una presión de selección positiva en la historia evolutiva del gיnero Homo. Una variante dentro del locus de IFNλ4 (rs12979860, T˃C), con distribución diferencial en poblaciones africanas, europeas y nativas americanas, surgió como uno de los principales determinantes genéticos de la respuesta al HCV y otros virus. Aquí caracterizamos por primera vez la distribución de los genotipos de rs12979860 en una muestra de la población cosmopolita de Buenos Aires, Argentina, evaluando el impacto de su ancesrtría. Se determinaron diferentes genotipos de rs12979860 por PCR-RFLP en muestras de ADN de donantes de bancos de sangre de Buenos Aires (n=96), cuya ancestría individual había sido previamente determinada mediante diferentes marcadores moleculares. La distribución global de rs12979860-CC, CT y TT fue 29,17%; 50,0% y 20,83%, respectivamente. Se observó un aumento significativo de la frecuencia del genotipo CC entre individuos con fuerte aporte europeo y un mayor impacto del componente nativo-americano entre portadores del alelo T. Los componentes nativo-americano y europeo se asociaron a la distribución rs12979860 en una muestra poblacional global de Buenos Aires, mientras que no se vieron diferencias directamente asociadas a la ancestría africana. Considerando el papel clave del interferón en la respuesta antiviral, nuestros resultados pueden contribuir a estudios con un enfoque bioantropológico así como a estudios inmunogenéticos asociados a enfermedades infecciosas.Fil: Mansilla, Florencia Celeste. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Avena, Sergio Alejandro. Universidad Maimonides. Centro de Ciencias Naturales, Ambientales y Antropologicas.; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Filosofía y Letras. Instituto de Ciencias Antropológicas. Sección Antropología Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dejean, Cristina Beatriz. Universidad Maimonides. Centro de Ciencias Naturales, Ambientales y Antropologicas.; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Filosofía y Letras. Instituto de Ciencias Antropológicas. Sección Antropología Biológica; ArgentinaFil: Turco, Cecilia Soledad. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Filosofía y Letras. Instituto de Ciencias Antropológicas. Sección Antropología Biológica; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; Argentin

Development and validation of a novel ELISA for the detection of Neospora caninum antibodies in bovine sera

Neospora caninum is a world-wide distributed apicomplexan parasite, causative agent of bovine neosporosis, which is one of the major causes of reproductive losses in cattle affecting both dairy and beef industries. Several techniques are regularly used for the diagnosis of bovine neosporosis. Amongst them, serological techniques are generally preferred, being IFAT the traditionally accepted reference method for diagnosis (gold standard). However, ELISA has become the most eligible method for large-scale screening of specific antibodies against N. caninum in diagnostic laboratories around the world, providing results that can be easily standardized between laboratories, within a few hours at a relative low-cost. There is no local production of commercial ELISA tests nor in Argentina neither in South America, therefore they must be purchased abroad, turning unfeasible the routinely use of ELISA tests. Here we have developed and validated accordingly to OIE specifications a novel ELISA test based on soluble antigens from N. caninum tachyzoites to accurately determine the presence of specific antibodies anti- N. caninum antigens in bovine sera samples, enabling the rapid, objective and low-cost diagnosis of bovine neosporosis in Argentina; replacing IFAT and avoiding delays and high importation taxes.EEA BalcarceFil: Mansilla Florencia Celeste. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina.Fil: Gual Ignacio. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Pereyra Walter Rodrigo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Salta; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cardoso Nancy. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Turco Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina.Fil: Capozzo Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Serological screening of SARS-CoV-2 infection in companion animals of Buenos Aires suburbs

The Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) is a zoonotic disease caused by the pandemic virus SARS-CoV-2. Domestic and wild animals are susceptible to infection and are potential reservoirs for virus variants. To date, there is no information about the exposure of companion animals in Buenos Aires Suburbs, the area with the largest population in Argentina where the highest number of COVID-19 human cases occurred during the first infection wave. Here we developed a multi-species indirect ELISA to measure antibodies reactive to the SARS-CoV-2 receptor-binding domain (RBD) from several vertebrates constituting the class Mammalia, making it a valuable tool for field serosurveillance. The ELISA cut-off value was estimated by sera from dogs, cats, cattle, and pigs sampled before 2019 (n = 170), considering a 98% percentile and a grey zone to completely exclude any false positive result. Specificity was confirmed by measuring levels of neutralizing antibodies against canine coronavirus, the avidity of specific antibodies, and their capacity to impede the binding of a recombinant RBD protein to VERO cells in an In-Cell ELISA. Sera from 464 cats and dogs sampled in 2020 and 2021 (“pandemic” samples) were assessed using the RBD-ELISA. Information on COVID-19 disease in the household and the animals’ lifestyles was collected. In Buenos Aires Suburbs cats were infected at a higher proportion than dogs, seroprevalence was 7.1 and 1.68%, respectively. Confirmed COVID-19 in the caregivers and outdoor lifestyle were statistically associated with seropositivity in cats. The risk of cats getting infected living indoors in COVID-19-negative households was null. The susceptibility of mammals to SARS-CoV-2, the possibility of transmission between animals themselves and humans, together with the free-roaming lifestyle typical of Buenos Aires suburban companion animals, urge pursuing responsible animal care and avoiding human interaction with animals during the disease course. The multi-species RBD-ELISA we developed can be used as a tool for serosurveillance of SARS-CoV-2 infection in mammalians (domestic and wild), guiding further targeted virological analyses to encounter susceptible species, interspecies transmission, and potential virus reservoirs in our region.Instituto de VirologíaFil: Cardoso, Nancy Patricia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Cardoso, Nancy Patricia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Rivero, Carla. Universidad Nacional de José Clemente Paz. Instituto de Estudios para el Desarrollo Productivo y la Innovación; ArgentinaFil: Castillo, Mariangeles. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Castillo, Mariangeles. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Mansilla, Florencia Celeste. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina.Fil: Pastorino, Florencia. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Departamento Zoonosis Urbanas; ArgentinaFil: Piccirilli, Guadalupe. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Departamento Zoonosis Urbanas; ArgentinaFil: Alonso, Maria Laura. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Departamento Zoonosis Urbanas; ArgentinaFil: Martinez, Gustavo. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Departamento Zoonosis Urbanas; ArgentinaFil: Di Lullo, David. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Salud, Tecnología y Desarrollo; ArgentinaFil: Di Lullo, David. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Instituto Multidisciplinario de Salud, Tecnología y Desarrollo; ArgentinaFil: Bentancor, Leticia Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Bentancor, Leticia Veronica. Universidad Nacional de José Clemente Paz. Instituto de Estudios para el Desarrollo Productivo y la Innovación; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

In-vivo activity of IFN-λ and IFN-α against bovine-viral-diarrhea virus in a mouse model

Bovine-viral-diarrhea virus (BVDV) can cause significant economic losses in livestock. The disease is controlled with vaccination and bovines are susceptible until vaccine immunity develops and may remain vulnerable if a persistently infected animal is left on the farm; therefore, an antiviral agent that reduces virus infectivity can be a useful tool in control programs. Although many compounds with promising in-vitro efficacy have been identified, the lack of laboratory-animal models limited their potential for further clinical development. Recently, we described the activity of type I and III interferons, IFN-α and IFN-λ respectively, against several BVDV strains in-vitro. In this study, we analyzed the in-vivo efficacy of both IFNs using a BALB/c-mouse model. Mice infected with two type-2 BVDV field strains developed a viremia with different kinetics, depending on the infecting strain's virulence, that persisted for 56 days post-infection (dpi). Mice infected with the low-virulence strain elicited high systemic TNF-α levels at 2 dpi. IFNs were first applied subcutaneously 1 day before or after infection. The two IFNs reduced viremia with different kinetics, depending on whether either one was applied before or after infection. In a second experiment, we increased the number of applications of both IFNs. All the treatments reduced viremia compared to untreated mice. The application of IFN-λ pre- and post-infection reduced viremia over time. This study is the first proof of the concept of the antiviral potency of IFN-λ against BVDV in-vivo, thus encouraging further trails for a potential use of this cytokine in cattle.Instituto de VirologíaFil: Quintana, María Eugenia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina.Fil: Barone, Lucas Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina.Fil: Trotta, Myrian Vanesa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Turco, Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Mansilla, Florencia Celeste. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina.Fil: Cardoso, Nancy Patricia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina.Fil: Quintana, María Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET); ArgentinaFil: Barone, Lucas Jose. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria.Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET); ArgentinaFil: Cardoso, Nancy Patricia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET); Argentin

Bovine interferon lambda Is a potent antiviral against SARS-CoV-2 infection in vitro

Interferon lambda (IFN-λ) is an antiviral naturally produced in response to viral infections, with activity on cells of epithelial origin and located in the mucosal surfaces. This localized activity results in reduced toxicity compared to type I IFNs, whose receptors are ubiquitously expressed. IFN-λ has been effective in the therapy of respiratory viral infections, playing a crucial role in potentiating adaptive immune responses that initiate at mucosal surfaces. Human IFN-λ has polymorphisms that may cause differences in the interaction with the specific receptor in the human population. Interestingly, bovine IFN-λ3 has an in silico-predicted higher affinity for the human receptor than its human counterparts, with high identity with different human IFN-λ variants, making it a suitable antiviral therapeutic candidate for human health. Here, we demonstrate that a recombinant bovine IFN-λ (rbIFN-λ) produced in HEK-293 cells is effective in preventing SARS-CoV-2 infection of VERO cells, with an inhibitory concentration 50% (IC50) between 30 and 50 times lower than that of human type I IFN tested here (α2b and β1a). We also demonstrated the absence of toxicity of rbIFN-λ in human PBMCs and the lack of proinflammatory activity on these cells. Altogether, our results show that rbIFN-λ is as an effective antiviral potentially suitable for COVID-19 therapy. Among other potential applications, rbIFN-λ could be useful to preclude virus dispersion to the lungs and/or to reduce transmission from infected people. Moreover, and due to the non-specific activity of this IFN, it can be potentially effective against other respiratory viruses that may be circulating together with SARS-CoV-2.Instituto de VirologíaFil: Cardoso, Nancy Patricia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Mansilla, Florencia Celeste. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Benedetti, Estefanía. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas, INEI–ANLIS “Dr. Carlos G. Malbrán". Servicio Virosis Respiratorias; ArgentinaFil: Turco Cecilia Soledad. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Barone, Lucas Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Iserte, Javier Alonso. Fundación Instituto Leloir. Structural Bioinformatics Group; ArgentinaFil: Soria, Ivana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Baumeister, Elsa. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas, INEI–ANLIS “Dr. Carlos G. Malbrán". Servicio Virosis Respiratorias; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

The role of viral particle integrity in the serological assessment of foot-and-mouth disease virus vaccine-induced immunity in swine

The efficacy of foot-and-mouth disease virus (FMDV) inactivated vaccines is mainly dependent on the integrity of the whole (146S) viral particles. If the intact capsids disassemble to 12S subunits, antibodies against internal-not protective epitopes, may be induced. Serological correlates with protection may be hampered if antibodies against internal epitopes are measured. Here we compared the performance of different ELISAs with the virus-neutralization test (VNT) that measures antibodies against exposed epitopes. Sera from pigs immunized with one dose of an expired commercial FMDV vaccine were used. This vaccine contained about 50% of O1/Campos and over 90% of A24/Cruzeiro strains total antigen as whole 146S particles. Specific-total antibodies were measured with the standard liquid-phase blocking ELISA (LPBE). We also developed an indirect ELISA (IE) using sucrose gradient purified 146S particles as capture antigen to titrate total antibodies, IgM, IgG1 and IgG2. A good correlation was found between VNT titers and IgG-ELISAs for A24/Cruzeiro, with the lowest correlation coefficient estimated for IgG2 titers. For O1/Campos, however, the presence of antibodies against epitopes different from those of the whole capsid, elicited by the presence of 12S particles in the vaccine, hampered the correlation between LPBE and VNT, which was improved by using purified O1/Campos 146S-particles for the liquid-phase of the LPBE. Interestingly, 146S particles but not 12S were efficiently bound to the ELISA plates, confirming the efficiency of the IE to detect antibodies against exposed epitopes. Our results indicate that any serological test assessing total antibodies or IgG1 against epitopes exposed in intact 146S-particles correlate with the levels of serum neutralizing antibodies in vaccinated pigs, and might potentially replace the VNT, upon validation. We recommend that antigen used for serological assays aimed to measure protective antibodies against FMDV should be controlled to ensure the preservation of 146S viral particles.Fil: Mansilla, Florencia Celeste. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Turco, Cecilia Soledad. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Miraglia, Maria Cruz. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Bessone, Fernando Anibal. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Córdoba. Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; ArgentinaFil: Franco, Raúl. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Córdoba. Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; ArgentinaFil: Pérez Filgueira, Daniel Mariano. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Sala, Juan Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; Argentin

Seroprevalence and risk factors associated with Neospora caninum in dairy farms from the Province of Salta, Argentina

El objetivo de este trabajo fue conocer la seroprevalencia de Neospora caninum en los bovinos de los tambos del Valle del Lerma (Salta, Argentina) y los factores de riesgo asociados a la transmisión de este parásito en esta región. Se tomaron muestras de suero de aproximadamente 40 vacas en cada tambo, que fueron analizadas por ELISA indirecto para detectar anticuerpos contra N. caninum. También se discriminó entre infecciones crónicas y agudas midiendo la avidez de dichos anticuerpos. Todos los tambos presentaron al menos un bovino seropositivo y la media fue de 35,3 ± 14,9% de animales positivos. También se detectaron anticuerpos específicos en caninos presentes en 9 de los 16 tambos, con un valor de seropositividad del 71,7 ± 19,9%. El 56,3% de los bovinos seropositivos cursaban infecciones agudas. Se halló una asociación negativa entre la seroprevalencia y el índice de avidez de los anticuerpos específicos, lo que indica que la presencia de animales con infecciones agudas se asocia a mayor seroprevalencia. Los campos con pastoreo presentaron mayor cantidad de infecciones recientes. Estos resultados revelan por primera vez la importancia de este parásito en los tambos de la región y la necesidad de propiciar el desarrollo de programas de control considerando los distintos factores de riesgo que afectan la situación epidemiológica de la enfermedad.The objective of this work was to determine the seroprevalence of Neospora caninum in cattle in Valle de Lerma, province of Salta, Argentina, and the risk factors associated with the disease. Serum samples were taken from 40 cows in each dairy herd, which were analyzed by indirect ELISA to detect antibodies against N. caninum. Chronic and acute infections were discriminated by measuring the avidity of these antibodies. All the herds exhibited at least one seropositive animal, the mean being 35.3 ± 14.9% of positive animals. Specific antibodies were also detected in dogs present in 9 of the herds, which showed a seropositivity value of 71.7% ± 19.9%. Among the seropositive animals, 56.3% showed acute infections. A negative association was found between seroprevalence and the avidity index of specific antibodies, indicating that the presence of animals with acute infections is associated with higher seroprevalence. Fields with grazing showed more recent infections. These results show for the first time the importance of this parasite in this particular region and the need to promote the development of control programs considering the different risk factors that affect the epidemiological situation of the disease.Fil: Pereyra, Walter Rodrigo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Instituto de Investigación Animal del Chaco Semiárido; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Salta; ArgentinaFil: Suarez, Víctor Humberto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigaciones Agropecuarias. Instituto de Investigación Animal del Chaco Semiárido; ArgentinaFil: Cardoso, Nancy Patricia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Gual, Ignacio. Universidad Nacional de Mar del Plata; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Martínez, Gabriela Marcela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Salta. Estación Experimental Agropecuaria Salta; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Salta; ArgentinaFil: Mansilla, Florencia Celeste. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; Argentin

La ciencia pone bajo la lupa el uso de animales de laboratorio

Cada vez con mayor énfasis, la comunidad científica promueve la conducción responsable ybasada en principios éticos de los procedimientos experimentales que utilizan recursos biológicos.En el mismo sentido, se acentúa la adopción de métodos alternativos.Fil: Romera, Sonia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Diaz, Silvia. No especifíca;Fil: Alfaro, Maria de la Paz. Ministerio de Ciencia. Tecnología e Innovación Productiva. Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Vega, Celina Guadalupe. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Mansilla, Florencia Celeste. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Davies, Patricio. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Maidana, Silvina Soledad. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; Argentin

Serological screening of SARS-CoV-2 infection in companion animals of Buenos Aires suburbs

The Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) is a zoonotic disease caused by the pandemic virus SARS-CoV-2. Domestic and wild animals are susceptible to infection and are potential reservoirs for virus variants. To date, there is no information about the exposure of companion animals in Buenos Aires Suburbs, the area with the largest population in Argentina where the highest number of COVID-19 human cases occurred during the first infection wave. Here we developed a multi-species indirect ELISA to measure antibodies reactive to the SARS-CoV-2 receptor-binding domain (RBD) from several vertebrates constituting the class Mammalia, making it a valuable tool for field serosurveillance. The ELISA cut-off value was estimated by sera from dogs, cats, cattle, and pigs sampled before 2019 (n = 170), considering a 98% percentile and a grey zone to completely exclude any false positive result. Specificity was confirmed by measuring levels of neutralizing antibodies against canine coronavirus, the avidity of specific antibodies, and their capacity to impede the binding of a recombinant RBD protein to VERO cells in an In-Cell ELISA. Sera from 464 cats and dogs sampled in 2020 and 2021 (“pandemic” samples) were assessed using the RBD-ELISA. Information on COVID-19 disease in the household and the animals’ lifestyles was collected. In Buenos Aires Suburbs cats were infected at a higher proportion than dogs, seroprevalence was 7.1 and 1.68%, respectively. Confirmed COVID-19 in the caregivers and outdoor lifestyle were statistically associated with seropositivity in cats. The risk of cats getting infected living indoors in COVID-19-negative households was null. The susceptibility of mammals to SARS-CoV-2, the possibility of transmission between animals themselves and humans, together with the free-roaming lifestyle typical of Buenos Aires suburban companion animals, urge pursuing responsible animal care and avoiding human interaction with animals during the disease course. The multi-species RBD-ELISA we developed can be used as a tool for serosurveillance of SARS-CoV-2 infection in mammalians (domestic and wild), guiding further targeted virological analyses to encounter susceptible species, interspecies transmission, and potential virus reservoirs in our region