A PCSK9 e sua relevância clínica com os novos alvos terapêuticos contra a dislipidemia

This is a remarkable progress; since the finding of statins, there was no new way of reducing, significantly, cholesterol and LDL fraction. It is also clear that this decrease, by statins, is related to future cardiovascular lesions, being useful in its primary and secondary prophylaxis. The authors presented studies on research to promote the falling of blood cholesterol by means of antibodies, which inhibit the pro-protein PCSK9, as well as agents that act performing the RNA interference. We had two advantages immediately: for patients with myopathy associated with statins, and the fact of being injected every 15 days, that may contribute to better treatment adherence.Este é um progresso sensível; desde a descoberta das estatinas, não havia novas maneiras de diminuir, de maneira significativa, o colesterol e a fração LDL. Também está claro que essa redução, pelas estatinas, tem relação com futuras lesões cardiovasculares, sendo útil na profilaxia primária e secundária destas. Os autores apresentaram estudos sobre pesquisas para promover a queda do colesterol sanguíneo por meio de anticorpos que inibem a pró-proteína PCSK9, bem como agentes que atuam realizando a interferência no RNA. Duas vantagens se afiguram imediatamente: para pacientes que têm a miopatia relacionada às estatinas e por ser droga injetável a cada 15 dias, o que pode colaborar para maior adesão ao tratamento.Hospital Israelita Albert EinsteinUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)UNIFESPSciEL

Variabilidade no reconhecimento de padrões de imunofluorescência indireta em diferentes marcas de lâminas HEp-2

INTRODUCTION: Indirect immunofluorescence on HEp-2 cells is considered the gold standard for the detection of autoantibodies against cellular antigens. However, the culture conditions, cell fixation and permeabilization processes interfere directly in the preservation and spatial distribution of antigens. Therefore, one can assume that certain peculiarities in the processing of cellular substrate may affect the recognition of indirect immunofluorescence patterns associated with several autoantibodies. OBJECTIVE: To evaluate a panel of serum samples representing nuclear, nucleolar, cytoplasmic, mitotic apparatus, and chromosome plate patterns on HEp-2 cell substrates from different suppliers. MATERIALS AND METHODS: Seven blinded observers, independent from the three selected reference centers, evaluated 17 samples yielding different nuclear, nucleolar, cytoplasmic and mitotic apparatus patterns on HEp-2 cell slides from eight different brands. The slides were coded to maintain confidentiality of both brands and participating centers. RESULTS: The 17 HEp-2 cell patterns were identified on most substrates. Nonetheless, some slides showed deficit in the expression of several patterns: nuclear coarse speckled/U1-ribonucleoprotein associated with antibodies against RNP (U1RNP), centromeric protein F (CENP-F), proliferating cell nuclear antigen (PCNA), cytoplasmic fine speckled associated with anti-Jo-1 antibodies (histidyl synthetase), nuclear mitotic apparatus protein 1 (NuMA-1) and nuclear mitotic apparatus protein 2 (NuMA-2). CONCLUSION: Despite the overall good quality of the assessed HEp-2 substrates, there was considerable inconsistency in results among different commercial substrates. The variations may be due to the evaluated batches, hence generalizations cannot be made as to the respective brands. It is recommended that each new batch or new brand be tested with a panel of reference sera representing the various patterns.INTRODUÇÃO: A imunofluorescência indireta (IFI) utilizando células HEp-2 como substrato antigênico é o teste padrão-ouro para a pesquisa de autoanticorpos contra antígenos celulares. Contudo, as condições de cultivo, fixação e permeabilização celular interferem diretamente na preservação e na distribuição espacial dos antígenos. Portanto, pode-se presumir que distintas condições no preparo das células possam interferir no reconhecimento dos padrões de imunofluorescência associados aos diversos autoanticorpos. OBJETIVO: Avaliar um painel de amostras de soro representativo de padrões nuclear, nucleolar, citoplasmático, de aparelho mitótico e de placa cromossômica em substratos de células HEp-2 de diferentes fornecedores. MATERIAIS E MÉTODOS: Sete observadores blindados e independentes de três centros de referência avaliaram 17 amostras que apresentavam diferentes padrões nucleares, nucleolares, citoplasmáticos e associados ao aparelho mitótico em lâminas com células HEp-2 de oito procedências. As lâminas foram codificadas para manter a confidencialidade das marcas, bem como dos centros participantes. RESULTADOS: Os 17 padrões de imunofluorescência em células HEp-2 foram reconhecidos na maioria dos substratos. No entanto, alguns substratos mostraram déficit na apresentação de alguns padrões (nuclear pontilhado grosso/U1-ribonucleoprotein associado a anticorpos contra o RNP (U1 ribonucleoproteína), sugestivo da presença de anticorpos anti-CENP-F (proteína centromérica F), sugestivo de anticorpos contra antígenos de célula em proliferação (proliferating cell nuclear antigen [PCNA]), citoplasmático pontilhado fino associado a anticorpos anti-Jo-1 (histidil sintetase), anti-NuMA-1 (nuclear mitotic apparatus protein 1) e anti-NuMA-2 (nuclear mitotic apparatus protein 2). CONCLUSÃO: Em que pese a boa qualidade geral dos substratos avaliados, existe divergência nos resultados obtidos entre os diferentes substratos comerciais. As variações observadas podem ser devidas aos lotes avaliados, portanto não se pode generalizar para as respectivas marcas. Recomenda-se que cada novo lote ou marca de lâmina sejam testados com diferentes soros referência representativos dos diversos padrões.Grupo Fleury Research and Development DepartmentUNIFESPPUC-Goiás Pharmacy DepartmentPUC-Goiás Medicine DepartmentPadrão Laboratório ClínicoFMUSP Hospital das Clínicas Division of LaboratoriesHospital Israelita Albert Einstein Clinical Pathology DepartmentHospital Israelita Albert Einstein Clinical Pathology Department Immunopathology SectorUNIFESP Immuno-Rheumatology LaboratoryGrupo Fleury Immunology DepartmentUNIFESP, Immuno-Rheumatology LaboratorySciEL

Definições para a padronização da pesquisa de auto-anticorpos contra constituintes do núcleo (FAN HEp-2), nucléolo, citoplasma e aparelho mitótico e suas associações clínicas

OBJECTIVE: The Second Brazilian Consensus on Antinuclear Antibodies (ANA) in HEp-2 Cells approved and extended the decision trees developed during the First Brazilian Consensus in order to also offer information about mixed patterns of fluorescence. METHODS: Since this test elicits reactions not only to nuclear autoimmune antigens but also to different cell compartments, new denominations for the test were approved. Results and CONCLUSIONS: These new denominations encompass variations on the autoantibody testing against the nucleus (ANA HEp-2), nucleolus, cytoplasm, and mitotic apparatus issue. Furthermore, major clinical associations were described for each immunofluorescent pattern, facilitating the interpretation of laboratory results in the clinical practice.OBJETIVO: O Segundo Consenso Brasileiro de Fator Antinuclear (FAN) em Células HEp-2 ratificou os algoritmos de decisão para leitura dos padrões do FAN na imunofluorescência indireta vistos na primeira edição do Consenso Brasileiro, adicionando ainda um novo algoritmo relacionado com os padrões mistos. MÉTODOS: Tendo em vista a habilidade do teste em detectar autoantígenos nos distintos compartimentos celulares, e não apenas no núcleo, propõe-se novas denominações para este exame laboratorial. RESULTADOS E CONCLUSÕES: Como novas denominações algumas sugestões foram igualmente aceitas, dentro do tema pesquisa de auto-anticorpos contra constituintes do núcleo (FAN HEp-2), nucléolo, citoplasma e aparelho mitótico. Foram abordadas as principais relevâncias clínicas com os padrões de FAN descritos, facilitando o melhor uso do ensaio pelo médico.FMUSPUNIFESPBio-Rad Laboratório BrasilHospital Geral de GoiâniaBiomédicaUniversidade Federal de UberlândiaUFMG HCPUCRS HCNew Life Produtos HospitalaresUniversidade Católica de GoiásFMUSP HC Laboratório CentralPatologista ClínicaFMUSP HCFrischmann Aisengart Unidad InmunologíaUniversidade Católica de Goiás Laboratório de Auto-ImunidadeExame Medicina LaboratorialFMUFG HC Laboratório de Imuno-Reumatologia e HLALab. Santa LuziaMedivax/BionHSPE/SPUniversidade Católica de Goiás Laboratório da Área de SaúdeFarmacêutica-BioquímicaUniv. Fed. Mato GrossoFMUFG Serviço de ReumatologiaHospital Durand Unidad InmunologíaLaboratório ClínicoUFRGS HCPA Serviço de ReumatologiaUERJ FCMUFMG FMHospital Universitário de Brasília Laboratório de ReumatologiaUNIFESPSciEL

IV Brazilian Guidelines for autoantibodies on HEp-2 cells

Objective: the Fourth Brazilian Consensus for Autoantibodies Screening in HEp-2 Cells (ANA) was held in Vitoria, Espirito Santo, and aimed to discuss strategies and recommendations about the technique, standardization, interpretation and quality control of the indirect immunofluorescence reaction on HEp-2 cells.Methods: Twenty three ANA experts from university centers and private laboratories in different areas from Brazil discussed and agreed upon recommendations for the fourth edition of the Brazilian Consensus for Autoantibodies Screening in HEp-2 Cells.Results and conclusion: the 4th ANA Consensus included three novel patterns into the existing algorithm (cytoplasmic Rods and Rings, nuclear Quasi-homogeneous, and CENP-F). Emphasis was given to the need of attention in describing the peculiar mixed pattern elicited by anti-DNA topoisomerase I (Scl-70) autoantibodies, comprising nuclear fine specked, nucleolar homogeneous pattern, NOR staining in metaphase plates, and cytoplasmic fine speckled patterns. the group also emphasized the need for continuous quality control in indirect immunofluorescence assays, the establishment of screening dilutions, as well as conjugate titration. An alert was made regarding the heterogeneity of commercial kits in defining patterns and the use of solid phase methodologies to determine the presence of autoantibodies. (C) 2014 Elsevier Editora Ltda. All rights reserved.Objetivo: O IV Consenso Brasileiro para Pesquisa de Autoanticorpos em Células HEp-2 (FAN) realizado em Vitória (ES), no dia 18 de setembro de 2012, objetivou discutir estratégias e recomendações relacionadas ao procedimento técnico, à padronização e à interpretação dos resultados da pesquisa de autoanticorpos em células HEp-2. Métodos: Participaram do evento 23 pesquisadores e especialistas de Universidades e laboratórios brasileiros. Foram abordados diferentes tópicos, discutidos amplamente a fim de se estabelecer recomendações específicas. Resultados e conclusão: O IV Consenso integrou à árvore de decisão o padrão citoplasmático em Anéis e Bastões, o padrão nuclear pontilhado Quasi-homogêneo (QH) e o padrão misto CENP-F. Discutiu-se ainda a necessidade de atenção para a classificação do padrão misto relacionado à presença de anticorpos anti-DNA topoisomerase I (Scl-70), compreendendo os componentes nuclear pontilhado fino, nucleolar homogêneo, NOR na placa metafásica e citoplasmático pontilhado fino. Foram sugeridas diretrizes para o controle de qualidade do teste, diluição de triagem e diluição de esgotamento, e foi emitido alerta quanto à necessidade de atenção em relação à heterogeneidade de substratos disponíveis no mercado e a utilização de metodologias automatizadas para detecção de autoanticorpos.Albert Einstein Medicina DiagnosticaAlka TecnologiaAmaral Costa LaboratorioConselho Federal de BiomedicinaDASAEuroimmun BrasilGrupo FleuryHemagenMedivaxOlimpusPadrao Laboratorio ClinicPontificia Universidade Catolica de Goias - PUC-GoiasSociedade Brasileira de Patologia Clinica e Medicina LaboratorialSociedade Brasileira de ReumatologiaThermo ScientificWama DiagnosticaWerfen Group - Werfen MedicalHermes PardiniConselho Regional de Biomedicina - 3a RegiaoPUC Goias, Goiania, Go, BrazilFleury Med & Saude, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo UNIFESP, Discipline Rheumatol, São Paulo, BrazilUniv Fed Uberlandia, Hosp Clin, Serv Rheumatol, BR-38400 Uberlandia, MG, BrazilClin Doencas Reumat Porto Alegre, Ctr Diagnost Med & Rheuma, Porto Alegre, RS, BrazilAmaral Costa Med Diagnost, Belem, PA, BrazilUniv São Paulo, Fac Med, Hosp Clin, Lab Invest Med, São Paulo, BrazilUniv São Paulo, Fac Med, Hosp Clin, Lab Cent, São Paulo, BrazilHosp Israelita Albert Einstein, Dept Clin Pathol, São Paulo, BrazilInst Hermes Pardini, Belo Horizonte, MG, BrazilUniv São Paulo, Fac Med, São Paulo, BrazilUniv Fed Minas Gerais, Fac Med, Belo Horizonte, MG, BrazilUniv Catolica Brasilia, Brasilia, DF, BrazilUniv Fed Goias, Fac Med, Goiania, Go, BrazilUniv Sul Santa Catarina UNISUL, Florianopolis, SC, BrazilUniv Vale do Itajai UNIVALE, Florianopolis, SC, BrazilUniv Fed Espirito Santo, Vitoria, ES, BrazilEBMSP, Salvador, BA, BrazilGrp DASA, São Paulo, BrazilEscola Super Ciencias Saude Dist Fed, Brasilia, DF, BrazilLab Sabin, Brasilia, DF, BrazilUniversidade Federal de São Paulo UNIFESP, Discipline Rheumatol, São Paulo, BrazilWeb of Scienc

Comparison of different laboratory tests in the evaluation of hemorrhagic risk of patients using rivaroxaban in the critical care setting: diagnostic accuracy study

Abstract Background Rivaroxaban is a direct oral anticoagulant designed to dispense with the necessity of laboratory monitoring. However, monitoring rivaroxaban levels is necessary in certain clinical conditions, especially in the critical care setting. Methods This is a diagnostic accuracy study evaluating sensitivity and specificity of prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (aPTT), and Dilute Russell viper venom time (dRVVT), to evaluate the hemorrhagic risk in patients taking rivaroxaban. The study used a convenience sample of 40 clinically stable patients using rivaroxaban to treat deep vein thrombosis or atrial fibrillation admitted in a private hospital in Brazil, compared to a group of 60 healthy controls. The samples from patients were collected two hours after the use of the medication (peak) and two hours before the next dose (trough). Results The correlation with the plasmatic concentration measured by anti-FXa assay was higher for PT and dRVVTS. The PT and aPTT tests presented higher specificity, while dRVVT was 100% sensible. Conclusions There was a strong correlation between the tests and the plasma concentration of the drug. Additionally, our results demonstrated the potential use of dRVVT as a screening test in the emergency room and the need of a second test to improve specificity