Effect of Etidronate and Ibandronate on Cytosolic Ca2+ in HT29 and Parasite Cell Line from Echinococcus Granulosus sensu lato

Background: The bisphosphonates are synthetic analogs of pyrophosphate in which two phosphates are connected through carbon instead of oxygen. They are approved compounds for the treatment of hypercalcemia, bone diseases and they have been proposed to treat infectious diseases. Bisphosphonates’ main mechanisms of action are on calcium metabolism, inhibition of protein prenylation and on ATP synthesis. In a previous work, the antiparasitic activity of bisphosphonates on a cell line from Echinococcus granulosus, sensu lato protoscoleces, 30 µM etidronate and ibandronate have antiproliferative activity after 72 h of incubation, decreasing intracellular ATP and only etidronate increased intracellular total calcium concentration. Objective: This work studied the effect of etidronate and ibandronate on cytoplasmic ionic calcium concentration in parasitic cell line and in HT29, cell line from human colon adenocarcinoma. Methods: Ionic calcium was measured by spectrofluorometric, labeling cells with Fluo-4AM. Cells were suspended in Na+ or K+ rich buffer and two calcium salts were used Cl- or Gluc- , anion permeable and impermeable, respectively. Results: Remarkable differences between cell lines were shown with the effect of bisphosphonates on intracellular ionic calcium concentration in hyperpolarized cells and these differences were smoothed on depolarized cells, in spite of the similar cellular response to calcium salts in absence of bisphosphonates. Conclusion: The bisphosphonates, mainly etidronate, decreased intracellular ionic calcium on parasitic cells explaining other aspects of their antiproliferative effect. Results suggested that other mechanism, such as Cl- and Na+ interchange are differentially affected by bisphosphonates, depending on cell line originFil: Ferrulli, Mariana. Universidad Abierta Interamericana. Secretaría de Investigación. Centro de Altos Estudios En Ciencias Humanas y de la Salud - Sede Buenos Aires; ArgentinaFil: Pérez Rojo, Fernando Gabriel. Universidad Abierta Interamericana. Secretaría de Investigación. Centro de Altos Estudios En Ciencias Humanas y de la Salud - Sede Buenos Aires; ArgentinaFil: Granada Herrera, Lilian Andrea. Universidad Abierta Interamericana. Secretaría de Investigación. Centro de Altos Estudios En Ciencias Humanas y de la Salud - Sede Buenos Aires; ArgentinaFil: Maglioco, Andrea Florencia. Universidad Abierta Interamericana. Secretaría de Investigación. Centro de Altos Estudios En Ciencias Humanas y de la Salud - Sede Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Roldán, Emilio A. J.. Universidad Abierta Interamericana. Secretaría de Investigación. Centro de Altos Estudios En Ciencias Humanas y de la Salud - Sede Buenos Aires; ArgentinaFil: Fuchs, Alicia Graciela. Universidad Abierta Interamericana. Secretaría de Investigación. Centro de Altos Estudios En Ciencias Humanas y de la Salud - Sede Buenos Aires; Argentina. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán". Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben"; Argentin

Presencia de células B con propiedades regulatorias en ganglios drenantes de un tumor murino

En cáncer, las células B han sido clásicamente asociadas a la presentación antigénica, secreción de anticuerpos y activación de células T. Recientemente se comenzó a investigar un posible rol negativo de los linfocitos B sobre la respuesta inmune antitumoral, debido a que se describieron ciertas subpoblaciones B con capacidad de afectar negativamente la respuesta inmune en enfermedades autoinmunes. El tumor murino MCC es altamente inmunogénico en estadios tempranos; a medida que crece pierde su inmunogenicidad e induce inmunosupresión sistémica y tolerancia. En este modelo hemos demostrado previamente que el crecimiento tumoral induce un marcado y progresivo aumento en el número y proporción de células B en los ganglios drenantes del tumor (TDLN) y un aumento menos marcado de células T regulatorias. El objetivo fue estudiar las características y función de las células B en los ganglios que drenan el tumor MCC y analizar si éstas podrían inhibir la respuesta contra el tumor favoreciendo su progresión. Encontramos que las células B en los TDLN presentan expresión aumentada de las moléculas CD86 y MHCII indicando su activación, y expresión intracelular de IL-10, FASL y Granzima B, moléculas con función inmunosupresora. Además, mostraron alta actividad inhibitoria de la proliferación T ex vivo y moderada secreción de anticuerpos. Los resultados indican que aun cuando persisten marcadores de activación de la respuesta inmune, las células B presentes en los ganglios drenantes del tumor muestran fenotipo regulatorio y actividad inhibitoria, sugiriendo que las mismas contribuirían al estado de tolerancia inmunológica característico del estadio de tumor avanzado.In cancer, B cells have been classically associated with antibody secretion, antigen presentation and T cell activation. However, a possible role for B lymphocytes in impairing antitumor response and collaborating with tumor growth has been brought into focus. Recent reports have described the capacity of B cells to negatively affect immune responses in autoimmune diseases. The highly immunogenic mouse tumor MCC loses its immunogenicity and induces systemic immune suppression and tolerance as it grows. We have previously demonstrated that MCC growth induces a distinct and progressive increase in B cell number and proportion in the tumor draining lymph nodes (TDLN), as well as a less prominent increase in T regulatory cells. The aim of this research was to study B cell characteristics and function in the lymph node draining MCC tumor and to analyze whether these cells may be playing a role in suppressing antitumor response and favoring tumor progression. Results indicate that B cells from TDLN expressed increased CD86 and MHCII co-stimulatory molecules indicating activated phenotype, as well as intracellular IL-10, FASL and Granzyme B, molecules with regulatory immunosuppressive properties. Additionally, B cells showed high inhibitory upon T cell proliferation ex vivo, and a mild capacity to secrete antibodies. Our conclusion is that even when evidence of B cell-mediated activity of the immune response is present, B cells from TDLN exhibit regulatory phenotype and inhibitory activity, probably contributing to the state of immunological tolerance characteristic of the advanced tumor condition.Fil: Maglioco, Andrea Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental; Argentina;Fil: Machuca, Damián Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental; Argentina;Fil: Camerano, Gabriela Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental; Argentina;Fil: Costa, Hector Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental; Argentina;Fil: Ruggiero, Raul Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental; Argentina;Fil: Dran, Graciela Isabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental; Argentina

Combined therapies against murine tumors: immunotherapy and chemotherapy. Relationship between the efficacy of the treatments and the immunological status of the host

El ganglio linfático drenante del tumor (NLDT) es central en el primado de células T contra antígenos tumorales y en el inicio de la respuesta antitumoral. Sin embargo, también allí el tumor generaría inmunosupresión y tolerancia. La tolerancia no sólo favorece el crecimiento tumoral sino que constituye un obstáculo para el éxito de las inmunoterapias. Utilizamos un fibrosarcoma murino tempranamente inmunogénico que evoluciona hacia un estado tolerogénico, con el fin de estudiar los mecanismos celulares que llevan a la generación de la tolerancia a nivel del NLDT y de diseñar un tratamiento inmunológico apropiado. Determinamos que tras una activación inicial, se induce el aumento de células plasmacitoides, linfocitos B-IL10+ y T regulatorios, todos ellos asociados con inmunosupresión, los cuales coexisten con signos de inmunidad antitumoral locales y sistémicos. Por lo tanto evaluamos la utilidad de extirpar el NLDT como medio de eliminar un foco de inmunosupresión y favorecer el rechazo del tumor; por el contrario se indujo exacerbación del mismo. La restitución de las células efectoras del ganglio extraído conjuntamente con la depleción in vivo de células regulatorias por una dosis baja de ciclofosfamida resultó en menor crecimiento, mayor sobrevida y una alta tasa de regresión tumoral, sin recidivas. Parte de los mecanismos involucrados en la regresión comprenden la disminución del número y la actividad de las células regulatorias, la disminución de la producción de TGF-β, y el aumento de la citotoxicidad específica.Tumor-draining lymph nodes (TDLN) are central sites where T cell priming to tumor antigens and onset of the antitumor immune response occur. However, tumor-induced immunosuppression has been demonstrated at TDLN, leading to downregulation of antitumor reaction and tolerance induction. Tolerance in turn is a main impairment for immunotherapy trials. We used a murine immunogenic fibrosarcoma that evolves to a tolerogenic state, to study the cellular mechanisms underlying tolerance induction at the level of TDLN and to design an appropriate immunotherapy. We determined that following a transient activation, the established tumor induces signs of immunosuppression at TDLN that coexist with local and systemic evidences of antitumor response. Therefore, we evaluated the feasibility of removing TDLN in order to eliminate a focus of immunosuppression and favor tumor rejection; but instead, a marked exacerbation of tumor growth was induced. Combining the restoring of the TDLN-derived cells into the donor mouse by adoptive transference with the in vivo depletion of regulatory cells by low-dose cyclophosphamide, resulted in lowered tumor growth, enhanced survival and a considerable degree of tumor regression. The mechanisms accounting for tumor remission are at least in part the inhibition of regulatory cells and TGF-β production and the enhancement of the specific cytotoxicity.Fil:Maglioco, Andrea Florencia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

A protocol for umbilical cord tissue cryopreservation as a source of mesenchymal stem cells

Mesenchymal stem cells (MSC) differentiate into different cell types and have immunomodulatory and paracrine effects. Cryopreservation of umbilical cord tissue as a source of MSC is very promising for regenerative medicine. We aim to evaluate a protocol for cryopreserving this tissue sectioned into small fragments with viable MSC. A total of 723 samples were frozen, thawed and cultured to obtain primary cultures of MSC. These were followed until 90?100% confluence and flow cytometric analysis were performed to confirm the mesenchymal phenotype. Samples in which protocol alterations at the collection of the samples were reported, were excluded for microbial contamination analysis leaving a total of 634 samples composed of 181 vaginal and 453 cesarean births. All cultures reach confluence with a media of 22.57 days and 97% in 28 or fewer days. Evaluated cultures showed low percentage of CD45+ and high of CD73 and CD90. Eight samples were subcultured 4 or 5 times and differentiated to chondrocytes and osteocytes to test differentiation potential with positive results. Umbilical cord tissue collections showed similar microbial profile and risk factors to those reported of umbilical cord blood collections, but with higher contamination frequencies. Cryopreserved tissue samples had viable cells that can be expanded without losing differentiation potential. Higher contamination frequencies compared to umbilical cord blood collection are not surprising, however, microbial load and survival of microorganisms to cryopreservation are expected to be lower.Fil: Raffo, Diego Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Centro de Investigaciones Endocrinológicas "Dr. César Bergada". Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones Endocrinológicas "Dr. César Bergada". Fundación de Endocrinología Infantil. Centro de Investigaciones Endocrinológicas "Dr. César Bergada"; ArgentinaFil: Maglioco, Andrea Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Abierta Interamericana; ArgentinaFil: Fernandez Sasso, Diego,. No especifíca

Plant heat shock protein 90 as carrier-adjuvant for immunization against a reporter antigen

Here, we evaluated the modulation of the immune response induced by Hsp90 of Nicotiana benthami-ana (NbHsp90.3) against the Maltose Binding Protein (MBP) as a reporter antigen. Equimolar quantitiesof recombinant proteins were administered in mice as follows: MBP alone (MBP group), a mixture ofMBP and rNbHsp90.3 (MBP + rNbHsp90.3 group) and the fusion of MBP to rNbHsp90.3 (MBP-rNbHsp90.3group). The covalent linkage between NbHsp90.3 and MBP to bring a fusion protein was essential toinduce the strong specific antibody response with predominance of IgG2a. Eighty-four days after the firstimmunization, splenocyte proliferation from MBP-rNbHsp90.3-immunized mice was consistently higherthan that from MBP and MBP + rNbHsp90.3 groups. In addition, splenocytes from MBP-rNbHsp90.3 immu-nized mice produced higher levels of IFN- than controls. Finally, both formulations with rNbHsp90.3significantly enhanced the MHC class I expression levels, but only rNbHsp90.3 covalent bound to MBPinduced a specific cellular immune response against MBP measured as increased percentage of CD8+Tcells. Taken together, these results suggest that plant HSP90s could be incorporated as adjuvants in vac-cines that require the generation of a Th1 response along with a CD8 cytotoxic cell response to conferimmunity.Fil: Corigliano, Mariana Georgina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Fenoy, Ignacio Martín. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sander, Valeria Analía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Maglioco, Andrea Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Goldman, Alejandra. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Clemente, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); Argentin

Plant heat shock protein 90 as carrier-adjuvant for immunization against a reporter antigen

Here, we evaluated the modulation of the immune response induced by Hsp90 of Nicotiana benthami-ana (NbHsp90.3) against the Maltose Binding Protein (MBP) as a reporter antigen. Equimolar quantitiesof recombinant proteins were administered in mice as follows: MBP alone (MBP group), a mixture ofMBP and rNbHsp90.3 (MBP + rNbHsp90.3 group) and the fusion of MBP to rNbHsp90.3 (MBP-rNbHsp90.3group). The covalent linkage between NbHsp90.3 and MBP to bring a fusion protein was essential toinduce the strong specific antibody response with predominance of IgG2a. Eighty-four days after the firstimmunization, splenocyte proliferation from MBP-rNbHsp90.3-immunized mice was consistently higherthan that from MBP and MBP + rNbHsp90.3 groups. In addition, splenocytes from MBP-rNbHsp90.3 immu-nized mice produced higher levels of IFN- than controls. Finally, both formulations with rNbHsp90.3significantly enhanced the MHC class I expression levels, but only rNbHsp90.3 covalent bound to MBPinduced a specific cellular immune response against MBP measured as increased percentage of CD8+Tcells. Taken together, these results suggest that plant HSP90s could be incorporated as adjuvants in vac-cines that require the generation of a Th1 response along with a CD8 cytotoxic cell response to conferimmunity.Fil: Corigliano, Mariana Georgina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Fenoy, Ignacio Martín. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sander, Valeria Analía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Maglioco, Andrea Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Goldman, Alejandra. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Clemente, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); Argentin

Characterization of the B-Cell Epitopes of Echinococcus granulosus Histones H4 and H2A Recognized by Sera From Patients With Liver Cysts

Cystic echinococcosis (CE) is a zoonotic disease worldwide distributed, caused by the cestode Echinococcus granulosus sensu lato (E. granulosus), with an incidence rate of 50/100,000 person/year and a high prevalence in humans of 5-10%. Serology has variable sensitivity and specificity and low predictive values. Antigens used are from the hydatid fluid and recombinant antigens have not demonstrated superiority over hydatid fluid. A cell line called EGPE was obtained from E. granulosus sensu lato G1 strain from bovine liver. Serum from CE patients recognizes protein extracts from EGPE cells with higher sensitivity than protein extracts from hydatid fluid. In the present study, EGPE cell protein extracts and supernatants from cell colonies were eluted from a protein G affinity column performed with sera from 11 CE patients. LC-MS/MS proteomic analysis of the eluted proteins identified four E. granulosus histones: one histone H4 in the cell extract and supernatant, one histone H2A only in the cell extract, and two histones H2A only in the supernatant. This differential distribution of histones could reflect different parasite viability stages regarding their role in gene transcription and silencing and could interact with host cells. Bioinformatics tools characterized the linear and conformational epitopes involved in antibody recognition. The three-dimensional structure of each histone was obtained by molecular modeling and validated by molecular dynamics simulation and PCR confirmed the presence of the epitopes in the parasite genome. The three histones H2A were very different and had a less conserved sequence than the histone H4. Comparison of the histones of E. granulosus with those of other organisms showed exclusive regions for E. granulosus. Since histones play a role in the host-parasite relationship they could be good candidates to improve the predictive value of serology in CE.Fil: Maglioco, Andrea Florencia. Universidad Abierta Interamericana; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Agüero, Facundo Ariel. Universidad Abierta Interamericana; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Valacco, Maria Pia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Juarez Valdez, Alejandra Yaqueline. Universidad Abierta Interamericana; ArgentinaFil: Paulino, Margot. Universidad de la República; UruguayFil: Fuchs, Alicia Graciela. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán". Instituto Nacional de Parasitología "Dr. Mario Fatala Chaben"; Argentin

Increase of regulatory T cells in the lymph node of cathepsin L mutant mice

Las células T regulatorias CD4+CD25+Foxp3+ (Treg) han sido implicadas en el rechazo al trasplante de órganos alogeneicos, en cáncer, infecciones y enfermedades autoinmunes. Así, su modulación posee un enorme potencial para el tratamiento de estas enfermedades. En este trabajo se evaluó la influencia de la catepsina L (CTSL) sobre la homeostasis de las células Treg. Los ratones CTSLnkt/nkt -mutantes para CTSLpresentaron una reducción en el número de células Treg en el timo. Contrariamente, en los ganglios linfáticos el número de células Treg y su frecuencia dentro de la población CD4+ se incrementaron. La ausencia de actividad de CTSL en las células CD4+ de los ganglios linfoides -y no en su entorno- incrementó su tasa de proliferación. Las células Treg y las T CD4+ convencionales (CD4+CD25-Foxp3-) de los ratones mutantes mostraron aumentos similares en su tasa de proliferación, sugiriendo que la proliferación contribuye al incremento en el número de células Treg, pero el aumento en su frecuencia no derivaría exclusivamente del incremento en su proliferación. Por otra parte, no se observó una disminución en los niveles de apoptosis de células Treg. Teniendo en cuenta que la producción diaria de timocitos CD4+ está disminuida en los ratones CTSLnkt/nkt, estos resultados sugieren que el incremento de células Treg en los ganglios linfoides de estos mutantes no derivaría de una mayor exportación tímica, y permiten hipotetizar que la ausencia de actividad de CTSL favorecería la adquisición del fenotipo CD4+CD25+Foxp3+ a partir de células CD4+CD25-Foxp3- en la periferiaRegulatory CD4+CD25+Foxp3+ T cells (Treg) have been implicated in different pathologies including cancer, infections and autoimmune diseases and in the rejection of allogeneic organ transplantation. Thus, modulation of Treg activity has a great potential in the treatment of these pathologies. Herein, we evaluated the influence of cathepsin L (CTSL) on Treg homeostasis. CTSL mutant mice (CTSLnkt/nkt) showed a decrease in the absolute number of thymic Treg cells. In contrast, the absolute number of lymph node Treg cells and their frequency within CD4+ cells were increased. The absence of CTSL activity in CD4+ T cells -and not in their environment- increased the proliferation rate of lymph node CD4+ T cells. Treg and T CD4+ conventional (CD4+CD25-Foxp3-) cells from mutant mice showed similar increases in their proliferative levels as compared with control mice, suggesting that although proliferation contributes to the increases in their number, the augmentation in the frequency of Treg cells is not only associated to increases in proliferation. Furthermore, the Treg apoptosis rate was not decreased in the lymph node of CTSLnkt/nkt mice. Taking into account that the daily CD4+ thymic production is diminished in mutant mice, our results suggest that peripheral Treg increases are probably not the result of increased thymic output and raise the possibility that a conversion to Treg phenotype would be favored in the CD4+ T cells peripheral pool of CTSL mutant mice.Fil: Camicia, Gabriela Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Badano, Maria Noel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Maglioco, Andrea Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Cabrera, Gabriel Gustavo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Costa, Hector Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Piazzon, Margarita Isabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Nepomnaschy, Irene. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentin

Detection of Echinococcus granulosus sensu lato infection by using extracts derived from a protoscoleces G1 cell line

Cystic echinococcosis (CE) can be diagnosed by means of several serological approaches, but their results vary among laboratories due to the molecular characteristics of the reference antigens used. Thus, this study aimed to address both the relevance of an EGPE cell line previously obtained from Echinococcus granulosus protoscoleces G1 and the complexity of the immune response by using two different in vitro growth stages as separate sources of parasite antigens. The serum reactivity was investigated by western blotting (WB) in 21 CE patients from an endemic area in a matched case-control design and also in seven experimentally infected sheep and five healthy control sheep. EGPE-antigen-human serum sensitivity by WB was higher than that of hydatid fluid (HF) WB, ELISA and DD5 (P <.05, Chi-square test). EGPE protein extract was immunogenic in mice and hyperimmune plasma reacted with HF proteins, and AgB2 expression was detected by molecular analysis. Proteins of 37 to 60 kDa were recognized by 95.24% of the CE patients’ sera but, with poor specificity. Statistically significant differences were found between serum protein extract recognition at 7 and 20 days of cell growth. The EGPE cell line is a laboratory source of antigens for improvement of CE serological diagnosis.Fil: Maglioco, Andrea Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Abierta Interamericana; ArgentinaFil: Gentile, Jorge. Provincia de Buenos Aires. Municipalidad de Tandil. Hospital Municipal Ramón Santamarina; ArgentinaFil: Barbery Venturi, Melisa Silvana. Universidad Abierta Interamericana; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Jensen, Oscar. Centro de Investigación En Zoonosis de la Provincia de Chubut; ArgentinaFil: Hernández, Claudia. Provincia de Buenos Aires. Municipalidad de Tandil. Hospital Municipal Ramón Santamarina; ArgentinaFil: Gertiser, María Laura. Centro de Investigación En Zoonosis de la Provincia de Chubut; ArgentinaFil: Poggio, Thelma Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; ArgentinaFil: Canziani, Gabriela Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; ArgentinaFil: Fuchs, Alicia Graciela. Universidad Abierta Interamericana; Argentina. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; Argentin

Regulatory cells induced by acute toxoplasmosis prevent the development of allergic lung inflammation

The increased prevalence of allergies in developed countries has been attributed to a reduction of some infections. Supporting epidemiological studies, we previously showed that both acute and chronic Toxoplasma gondii infection can diminish allergic airway inflammation in BALB/c mice. The mechanisms involved when sensitization occurs during acute phase would be related to the strong Th1 response induced by the parasite. Here, we further investigated the mechanisms involved in T. gondii allergy protection in mice sensitized during acute T. gondii infection. Adoptive transference assays and ex vivo co-cultures experiments showed that not only thoracic lymph node cells from infected and sensitized mice but also from non-sensitized infected animals diminished both allergic lung inflammation and the proliferation of effector T cells from allergic mice. This ability was found to be contact-independent and correlated with high levels of CD4+FoxP3+ cells. IL-10 would not be involved in allergy suppression since IL-10-deficient mice behaved similar to wild type mice. Our results extend earlier work and show that, in addition to immune deviation, acute T. gondii infection can suppress allergic airway inflammation through immune suppression.Fil: Fenoy, Ignacio Martín. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sánchez, Vanesa Roxana. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Soto, Ariadna Soledad. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Picchio, Mariano Sergio. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Maglioco, Andrea Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Corigliano, Mariana Georgina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Dran, Graciela Isabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Martín, Valentina. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Goldman, Alejandra. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin