Evaluación de cámaras de recuento sobre parámetros espermáticos de verracos analizados con un sistema CASA-Mot

Introducción. La comprensión de la variabilidad en los valores de la cinética de los espermatozoides, por medio de diferentes profundidades de cámaras, demuestra la importancia de crear un estándar para los métodos de control de calidad en la industria de la inseminación artificial (IA). Objetivo. El objetivo del presente trabajo fue evaluar los parámetros de cinética de los espermatozoides con base en diferentes profundidades de cámara de visualización mediante un sistema comercial de análisis de esperma asistidos por computadora, CASA-Mot. Materiales y Métodos. Se utilizaron veinte dosis seminales de diez verracos pietrain. El periodo experimental fue de febrero a julio del año 2017. Se utilizó el sistema integrado de análisis de semen (ISAS®v1) con una frecuencia de captura de 50 Hz. Se utilizaron cámaras de recuento ISAS®D4C16 e ISAS®D4C20 con una altura de 16 y 20 μm, respectivamente y precalentadas a 37 °C. Resultados. Se encontraron valores superiores (p<0,05) para todos los parámetros cinéticos cuando la altura de la cámara de recuento fue de 20 μm. El efecto de zona dentro de la cámara de recuento se mantuvo constante entre las dos alturas, y las variaciones observadas en los parámetros cinéticos se debieron a un efecto aleatorio del verraco. Al analizar el efecto de zona dentro de la cámara de recuento, los primeros tres campos de análisis mostraron mayor velocidad curvilínea y rectilínea (p<0,05) que los siguientes campos, lo que se atribuye a la presencia de movimiento pasivo (drifting). Conclusión. La mayor amplitud y capacidad de volumen dentro de la cámara de recuento (20 μm versus 16 μm), podría favorecer el desplazamiento sin restricciones de las células, lo que explicaría el incremento en los valores cinéticos conforme aumentó la altura de la cámara. Deben continuarse los estudios sobre las condiciones técnicas del análisis seminal para estandarizar los métodos de valoración con los sistemas CASA

Caracterización de sistemas productivos de pupas de mariposas (lepidoptera: nymphalidae) para la exportación en la región Huetar caribe de Costa Rica

Proyecto de Investigación (Código: 215107 VIE) Instituto Tecnológico de Costa Rica. Vicerrectoría de Investigación y Extensión (VIE), 2018La producción de mariposas es una actividad socioeconómica importante, la cual requiere apoyo gubernamental, académico y profesional para mejorar sus procesos. Este estudio es el comienzo de un grupo de investigaciones dirigidas a optimizar los agroecosistemas productivos de mariposas a nivel nacional, para la mejora de la calidad de los productos que los agricultores ofrecen al mercado internacional. Se incluyeron 10 zoocriaderos de mariposas. En este estudio se realizó análisis de suelo en cada zoocriadero de mariposas y un análisis foliar para cuatro especies de plantas de la familia Passifloracea. Se realizó una biometría a cuatro especies de mariposas adultas y a las pupas. Mediante un instrumento de preguntas y respuestas, se analizó la situación socioeconómica de los productores apoyados con visitas de campo. La edad promedio de los productores es de 42 años, 80% han completado la educación primaria, el mismo porcentaje tiene seguridad social. Las áreas de producción en promedio miden 821 m2, producen un promedio 450 pupas por semana. Se encontró diferencias significativas en los tamaños de adultos y pupas entre los productores. Las condiciones del suelo son ácidas, no tienen sistemas de drenaje y riego ni un programa de fertilización, no se determinó deficiencias nutricionales en las plantas hospederas. Las estructuras de los zoocriaderos están hechas de postes de madera, con estructuras de alambre y cubiertas con mallas de nylon (sarán) de segundo uso y existe una deficiencia en la capacitación para mantener registros de sus sistemas de producción

Kinematic and head morphometric characterisation of spermatozoa from the Brown Caiman (Caiman crocodilus fuscus)

The development of analytical methods for the evaluation of crocodilian semen is an important component for the assessment of male breeding soundness and the development of assisted breeding technology in this taxon. Computer-Assisted Semen Analysis (CASA) technology is becoming an increasingly common technique in seminal evaluations for animals but there has been no application of this technique for reptilian spermatozoa. The aim of this study was to analyse sperm kinematic and morphometric variables in Caiman crocodilus fuscus semen samples and to determine whether there were sperm subpopulations. Four ejaculates from four sexually mature captive caimans were used for this study. A CASA-Mot and CASA-Morph system was used with an image acquisition rate of 50 Hz for 2 s of capture. The ISAS®D4C20 counting chambers were used and spermatozoa incubated at 25 °C. Total and progressive motilities did not differ among animals (P > 0.05). There was a significant animal effect in the model with respect to sperm morphometry, and kinematic indices including linearity (LIN) and straightness (STR) (P

Efecto del cruzamiento sobre características de crecimiento en ganado cebuíno de la región Chorotega

Introducción. Las investigaciones sobre el efecto del cruzamiento entre Bos indicus * Bos indicus son escasos, no obstante, el cruzamiento es una herramienta de optimización importante para el productor pecuario. Objetivo. El objetivo de este trabajo consistió en determinar el comportamiento de las características de crecimiento con base en diferentes proporciones de cruzamientos raciales Bos indicus. Materiales y métodos. El análisis se realizó con base en registros productivos de una ganadería con bovinos seleccionados Brahman y Nelore, y ganado comercial, ubicada en la región Pacífico Norte, Costa Rica. Se utilizaron los registros de 4294 animales, recopilados durante el periodo 2002-2012. Los grupos raciales incluidos en el estudio fueron: Brahman, Nelore, Gucerá, ½ Brahman ½ Nelore, ½ Brahman ½ Gucerá, ¼ Brahman ¾ Nelore y ¼ Nelore ¾ Brahman. Se evaluaron las características de peso al nacimiento, peso al destete, ganancia diaria de peso al destete, peso al año de edad, ganancia diaria de peso al año de edad, peso a los 18 meses, ganancia diaria de peso a los 18 meses, según grupo racial de la cría y de los progenitores. Adicionalmente, se analizaron los efectos no aditivos (sexo, época y año de nacimiento) y su influencia sobre las características. Resultados. Los grupos Brahman, Nelore y ¼ Nelore ¾ Brahman tuvieron los mayores pesos en todas las edades, los animales machos presentaron pesos superiores para la mayor parte de las características analizadas (P<0,05); los animales nacidos en época lluviosa presentaron los mayores pesos para todas las características, respecto a la época seca, mientras que el año de nacimiento no presentó tendencias. La raza de la madre influyó en edades tempranas de la cría y el grupo racial del padre en las diferencias posteriores al año de edad. Además, las variables sexo y época de nacimiento presentaron comportamientos definidos, mientras el año de nacimiento mostró resultados fluctuantes. Conclusión. En cruzamientos raciales Bos indicus, el grupo racial de los progenitores influencia las características de crecimiento de la progenie

Condiciones óptimas del análisis CASA-Mot del semen de verraco: efecto de la tasa de fotogramas para diferentes cámaras y campos de recuento espermático

The aim of the study was to determine the effect of the frame rate on different depths of the sperm counting chamber in boar semen and to analyse the distribution of sperm in the longitudinal fields of the counting chamber. A semen sample was collected from ten 2–3-year-old Pietrain boars. Eight sperm kinetic parameters were determined using the CASA (Computer-assisted semen analysis) -Mot (ISAS®v1) system. ISAS®D4C cameras with depths of 10, 16 and 20 μm were used at an image capture rate of 25, 40 and 60 frames per second (fps). Chamber depth affected the sperm kinetic variables, obtaining higher values at 20 µm. The frame rate (FR) presented a positive relationship with the kinetic parameters, obtaining higher values at 60 fps, except for the amplitude of the lateral displacement of the head (ALH), which presented opposite values. The variable most sensitive to the change in FR was the curvilinear velocity (VCL), where the best level was observed with 80 fps. A progressive decrease in kinematic patterns was observed as sperm advanced through the fields of the chambers. It is concluded that the use of different counting chambers and the increase in the total number of fps generates significant changes in the estimation of sperm kinetics parameters in the boar.El objetivo del estudio fue determinar el efecto de la tasa de fotogramas sobre diferentes profundidades de cámara de recuento espermático en semen de verraco y analizar la distribución de los espermatozoides en los campos longitudinales de la cámara de conteo. Se colectó una muestra de semen a 10 verracos Pietrain de 2-3 años. Se determinaron ocho parámetros de cinética espermática mediante el sistema CASA (Computer-assisted semen analysis)-Mot (ISAS®v1). Se utilizaron cámaras ISAS®D4C con profundidades de 10, 16 y 20 μm a una frecuencia de captura de imagen de 25, 40 y 60 fotogramas por segundo (fps). La profundidad de cámara afectó las variables de cinética espermática, obteniéndose valores más altos a 20 µm. La tasa de fotogramas (FR) presentó una relación positiva con los parámetros de cinética obteniéndose valores más altos a 60 fps, excepto para la amplitud del desplazamiento lateral de la cabeza (ALH) que presentó un comportamiento inverso. La variable más sensible al cambio en FR fue la velocidad curvilínea (VCL), donde el mejor nivel se observó con 80 fps. Se observó una disminución progresiva en los patrones cinemáticos conforme los espermatozoides avanzaban por los campos de las cámaras. Se concluye que el uso de diferentes cámaras de recuento y el incremento en el número total de fps genera cambios significativos en la estimación de parámetros de cinética espermática en el verraco

Early mobilisation in critically ill COVID-19 patients: a subanalysis of the ESICM-initiated UNITE-COVID observational study

Background Early mobilisation (EM) is an intervention that may improve the outcome of critically ill patients. There is limited data on EM in COVID-19 patients and its use during the first pandemic wave. Methods This is a pre-planned subanalysis of the ESICM UNITE-COVID, an international multicenter observational study involving critically ill COVID-19 patients in the ICU between February 15th and May 15th, 2020. We analysed variables associated with the initiation of EM (within 72 h of ICU admission) and explored the impact of EM on mortality, ICU and hospital length of stay, as well as discharge location. Statistical analyses were done using (generalised) linear mixed-effect models and ANOVAs. Results Mobilisation data from 4190 patients from 280 ICUs in 45 countries were analysed. 1114 (26.6%) of these patients received mobilisation within 72 h after ICU admission; 3076 (73.4%) did not. In our analysis of factors associated with EM, mechanical ventilation at admission (OR 0.29; 95% CI 0.25, 0.35; p = 0.001), higher age (OR 0.99; 95% CI 0.98, 1.00; p ≤ 0.001), pre-existing asthma (OR 0.84; 95% CI 0.73, 0.98; p = 0.028), and pre-existing kidney disease (OR 0.84; 95% CI 0.71, 0.99; p = 0.036) were negatively associated with the initiation of EM. EM was associated with a higher chance of being discharged home (OR 1.31; 95% CI 1.08, 1.58; p = 0.007) but was not associated with length of stay in ICU (adj. difference 0.91 days; 95% CI − 0.47, 1.37, p = 0.34) and hospital (adj. difference 1.4 days; 95% CI − 0.62, 2.35, p = 0.24) or mortality (OR 0.88; 95% CI 0.7, 1.09, p = 0.24) when adjusted for covariates. Conclusions Our findings demonstrate that a quarter of COVID-19 patients received EM. There was no association found between EM in COVID-19 patients' ICU and hospital length of stay or mortality. However, EM in COVID-19 patients was associated with increased odds of being discharged home rather than to a care facility. Trial registration ClinicalTrials.gov: NCT04836065 (retrospectively registered April 8th 2021)

Sistemas de análisis computadorizado de semen en la reproducción animal

Los sistemas computadorizados de análisis seminal (CASA, en inglés), se utilizan en reproducción animal conel propósito de valorar de forma rápida y fiable la calidad espermática. Actualmente, en los centros de inseminación artificial se debe disponer de sistemas fiables y objetivos que garanticen una confiabilidad de datos reproductivos.El objetivo fue realizar una revisión acerca de los sistemas de análisis seminal asistidos por computadora, enespecies ganaderas. El uso de sistemas CASA sustituye los análisis rutinarios que introducen sesgos y que conllevaa obtener distintos grados de imprecisión. Además, si se consideran las limitaciones intrínsecas de microscopíao espermatozoides con diferentes patrones de movilidad, lo más probable es que se introduzca una variabilidad considerable que repercute en la objetividad de la estimación. En un principio, este tipo de tecnologías eran pocoaccesibles, pero actualmente se utilizan en la mayoría de laboratorios para la evaluación de muestras espermáticas en distintas especies de interés zootécnico. Las técnicas computadorizadas son capaces de emitir informes con un número elevado de características, minimizar el factor subjetivo de los análisis rutinarios de semen y garantizar una mejor correlación con la capacidad fecundante de los espermatozoides, por medio de las relaciones entre la motilidad espermática y su competencia funcional. El uso de sistemas CASA junto con el análisis estadístico multivariante, han demostrado la existencia de subpoblaciones tanto cinéticas como morfométricas en eyaculados de diferentesespecies, desterrando la idea de que los eyaculados son homogéneos, formados por una única población espermáticacon distribución normal

Evaluación de cámaras de recuento sobre parámetros espermáticos de verracos analizados con un sistema CASA-Mot

Introduction. Understanding the variability in sperm kinetic values through different chambers depths, shows the importance to create a standard for quality control methods in the artificial insemination (AI) industry. Objective. The work aimed was to evaluate the spermatozoa kinetic parameters based on different depths of the visualization chamber by means of a commercial system of computer-assisted sperm analysis, CASA-Mot. Materials and Methods. Twenty seminal doses of ten pietrain boars were used. The experimental period was from February to July 2017. The Integrated Semen Analyses System (ISAS®v1) with 50 Hz capture frequency was used. ISAS®D4C16 and ISAS®D4C20 counting chambers with a height of 16 and 20 μm respectively and pre-heated to 37 °C were employed. Results. Higher values (p<0.05) were found for all kinetic parameters when the height of the counting chamber was 20 μm. The zone effects within the counting chamber were constant between the two heights, and the variations observed in the kinetic parameters were due to a random effect of the boar. When analyzing the zone effect within the counting chamber, the first three fields of analysis showed higher curvilinear and rectilinear velocity (p<0.05) than the following fields, which is attributed to the presence of passive movement (drifting). Conclusion. The greater amplitude and volume capacity within the counting chamber (20 μm versus 16 μm), could promote the unrestricted movement of the cells, which would explain the increase in the kinetic values as the chamber height increased. Studies on the technical conditions of seminal analysis should be continued in order to standardize valuation methods with CASA systems.Introducción. La comprensión de la variabilidad en los valores de la cinética de los espermatozoides, por medio de diferentes profundidades de cámaras, demuestra la importancia de crear un estándar para los métodos de control de calidad en la industria de la inseminación artificial (IA). Objetivo. El objetivo del presente trabajo fue evaluar los parámetros de cinética de los espermatozoides con base en diferentes profundidades de cámara de visualización mediante un sistema comercial de análisis de esperma asistidos por computadora, CASA-Mot. Materiales y Métodos. Se utilizaron veinte dosis seminales de diez verracos pietrain. El periodo experimental fue de febrero a julio del año 2017. Se utilizó el sistema integrado de análisis de semen (ISAS®v1) con una frecuencia de captura de 50 Hz. Se utilizaron cámaras de recuento ISAS®D4C16 e ISAS®D4C20 con una altura de 16 y 20 μm, respectivamente y precalentadas a 37 °C. Resultados. Se encontraron valores superiores (p<0,05) para todos los parámetros cinéticos cuando la altura de la cámara de recuento fue de 20 μm. El efecto de zona dentro de la cámara de recuento se mantuvo constante entre las dos alturas, y las variaciones observadas en los parámetros cinéticos se debieron a un efecto aleatorio del verraco. Al analizar el efecto de zona dentro de la cámara de recuento, los primeros tres campos de análisis mostraron mayor velocidad curvilínea y rectilínea (p<0,05) que los siguientes campos, lo que se atribuye a la presencia de movimiento pasivo (drifting). Conclusión. La mayor amplitud y capacidad de volumen dentro de la cámara de recuento (20 μm versus 16 μm), podría favorecer el desplazamiento sin restricciones de las células, lo que explicaría el incremento en los valores cinéticos conforme aumentó la altura de la cámara. Deben continuarse los estudios sobre las condiciones técnicas del análisis seminal para estandarizar los métodos de valoración con los sistemas CASA

Sistemas de análisis computadorizado de semen en la reproducción animal

Computer-assisted semen analysis (CASA) is used in animal reproduction with the objective of evaluating sperm quality, quickly and reliably. Currently, artificial insemination centers must have reliable and objective systems that ensure the reliability of reproductive data. The aim of this paper was to review computer-assisted semen analysis in livestock species. The use of CASA systems replace routine quality analyzes that introduce biases and leads to different inaccuracy degrees. In addition, if intrinsic limitations of microscopy or sperm with different motility patterns are considered, it is most likely that considerable variability will be introduced which will have an impact on the objectivity of the estimation. At first, this type of technology was inaccessible, but they are currently used routinely in most research laboratories for the evaluation of sperm samples of different species of zootechnical interest.. Computerized techniques are able to issue reports with a high number of characteristics, to minimize the subjective factor of routine semen analysis, and to ensure a better correlation with the fertilizing capacity of spermatozoa by the relationship between sperm motility and functional competence. The use of CASA systems together with multivariate statistical analysis have demonstrated the existence of kinetic and morphometric subpopulations in ejaculates of different species, eliminating the idea that ejaculates are homogeneous, formed by a single sperm population with normal distribution.Los sistemas computadorizados de análisis seminal (CASA, en inglés), se utilizan en reproducción animal con el propósito de valorar de forma rápida y fiable la calidad espermática. Actualmente, en los centros de inseminación artificial se debe disponer de sistemas fiables y objetivos que garanticen una confiabilidad de datos reproductivos. El objetivo fue realizar una revisión acerca de los sistemas de análisis seminal asistidos por computadora, en especies ganaderas. El uso de sistemas CASA sustituye los análisis rutinarios que introducen sesgos y que conlleva a obtener distintos grados de imprecisión. Además, si se consideran las limitaciones intrínsecas de microscopía o espermatozoides con diferentes patrones de movilidad, lo más probable es que se introduzca una variabilidad considerable que repercute en la objetividad de la estimación. En un principio, este tipo de tecnologías eran poco accesibles, pero actualmente se utilizan en la mayoría de laboratorios para la evaluación de muestras espermáticas en distintas especies de interés zootécnico. Las técnicas computadorizadas son capaces de emitir informes con un número elevado de características, minimizar el factor subjetivo de los análisis rutinarios de semen y garantizar una mejor correlación con la capacidad fecundante de los espermatozoides, por medio de las relaciones entre la motilidad espermática y su competencia funcional. El uso de sistemas CASA junto con el análisis estadístico multivariante, han demostrado la existencia de subpoblaciones tanto cinéticas como morfométricas en eyaculados de diferentes especies, desterrando la idea de que los eyaculados son homogéneos, formados por una única población espermática con distribución normal

Variabilidad en los métodos de estimación de la concentración espermática en verracos

The sperm concentration analysis in boar ejaculates is a quality measure in farms dedicated to the selling seminal doses and artificial insemination. The aim of this study was to determine differences in accuracy between assessment methods of sperm concentration. A total of 174 ejaculates from Duroc and Pietrain boars were analyzed. The animals belonging at the Agricultural Production Program (PPA) of the School of Agronomy at the Technological Institute of Costa Rica. The sperm concentration was estimated by 3 methods: sperm-densitometer (ED), spectrophotometer (EF) and computer assisted semen analysis (casa). The lower concentration (p<0.05) was estimated with EF (384.90±11.19 x106 spermatozoa.ml-1) and the highest with casa (432.39±20.81 x106 spermatozoa.ml-1). Concentration was analyzed using a generalized mixed model, including as explanatory variables from the model the volume of ejaculate, age of the boars, genetic line, collection interval, season and the interactions between the factors. The coefficient of variation was different (p<0.05) among methods and the highest was casa system (45.38%) while the lowest was ED method (34.78%). There were differences(p<0.05) between EF and casa estimation methods (376.65±12.06 vs 432.20±22.08 x106spermatozoa. ml-1) respectively, when the range between seminal extractions was low (≤9 days). Only casa system estimation was adjusted (p<0.05) and asymptotic level of concentration of 7.5 days was presented over the range between collections. In general, the estimation methods of concentration showed variability in the results. Duroc genetic lines presented higher sperm concentration than the Pietrain lines, independently of the estimation method. The volume of ejaculate presented a negative correlation with sperm concentration. The concentration decreases with increases the volume of ejaculate and the age of the boars.El análisis de la concentración espermática en los eyaculados de verraco constituye una estimación de calidad en granjas dedicadas a la venta de dosis seminales e inseminación artificial. El objetivo del presente estudio fue determinar las diferencias en precisión entre métodos de estimación de la concentración espermática. Se analizaron 174 eyaculados de verracos Duroc y Pietrain, pertenecientes a la granja del Programa de Producción Agropecuaria (PPA) de la Escuela de Agronomía del Instituto Tecnológico de Costa Rica. La concentración fue estimada por 3 métodos: espermadensímetro (ED), espectrofotómetro (EF) y sistema automatizado de análisis de semen (casa). La concentración más baja (p<0,05) se estimó con el EF (384,90±11,19 x106espermatozoides.ml-1) y la mayor con el casa (432,39±20,81 x106espermatozoides.ml-1). Se utilizó la metodología de modelos mixtos generalizados en los que incluyeron como variables explicativas el volumen de eyaculado, la edad de los verracos, la línea genética, el intervalo entre extracciones, la época y las interacciones entre los factores. El coeficiente de variación fue diferente (p<0,05) entre los métodos y el mayor correspondió al sistema casa (45,38%), mientras que el más bajo con el método ED (34,78%). Se presentaron diferencias (p<0,05) entre los métodos de estimación EF y casa (376,65±12,06 vs 432,20±22,08 x106espermatozoides.ml-1), respectivamente, cuando el intervalo entre extracciones seminales fue bajo (≤9 días). Sólo el sistema casa se ajustó (p<0,05) al modelo y presentó un nivel asintótico de la concentración sobre el intervalo entre extracciones de 7,5 días. En general, los métodos de estimación de la concentración presentaron variabilidad en los resultados. Las líneas genéticas Duroc presentaron mayor concentración espermática que las líneas Pietrain, independientemente del método de estimación. El volumen de eyaculado presentó una correlación negativa con la concentración espermática. La concentración disminuyó conforme se incrementó el volumen de eyaculado y la edad de los verracos