LÍQUIDO FOLICULAR FRESCO OU CONGELADO NA PRODUÇÃO IN VITRO DE EMBRIÕES BOVINOS

A manutenção dos complexos cumulus-oócitos (CCO) em líquido folicular (LF) antes da sua maturação, além de visar a capacitação, viabiliza o transporte até o laboratório por ser de baixo custo, de fácil aquisição e o congelamento do LF permite seu armazenamento para futura utilização. Neste experimento avaliou-se o efeito do congelamento do LF obtido de folículos de 2-8mm e de folículos >8mm, sobre a taxa de produção embrionária. Oócitos foram aspirados de folículos de 2 a 8mm de ovários provenientes de abatedouro. No grupo controle (n=295) os CCO foram maturados por 24h. Nos tratamentos GF (n=297) e GC (n=282), os CCO foram mantidos por 6h a 30ºC em LF fresco ou congelado, respectivamente, de folículos >8mm. Já no tratamento PF(n=278) e PC (n=281), os CCO foram mantidos em LF fresco ou congelado, respectivamente, de folículos de 2-8mm. Posteriormente, os CCO dos tratamentos GF, GC, PF e PC foram maturados por 18h. Não houve efeito negativo do congelamento do líquido folicular e nem do tamanho dos folículos sobre as taxas de clivagem e produção embrionária em D7 e D9 (P>0,05). No entanto, o congelamento do LF de folículos de 2 a 8mm resultou em redução da taxa de eclosão e do número de células dos blastocistos. A manutenção de oócitos bovinos por 6h a 30ºC, antes da maturação, pode ser efetuada em líquido folicular de folículos >8mm, fresco ou congelado. Fresh or frozen follicular fluid in vitro bovine embryo production Abstract In addition to the capacitation, the maintenance of cumulus-oocyte complex (COC) in follicular fluid (FF) before maturation, allows the transport to the laboratory, being a practical and less expensive media. The FF can be stored after freezing to future use. Oocytes aspirated from bovine slaughterhouse ovaries, were used to evaluate the effect of maintaining the oocytes in fresh or frozen bovine FF (from 2-8mm and >8mm follicles) on the blastocyst rate. In the control group (n=259) the COC were matured for 24h. On treatments GF (n=297) and GC (n=282) the COC were held for 6h at 30°C in fresh or frozen FF from >8mm follicles, respectively. In treatments PF (n=278) and PC (n=281) the COC were held in fresh or frozen FF from 2-8mm follicles, respectively. Later, the COC from GF, GC, PF and PC were matured for 18h. The freezing process as well as the follicle size had no effect on the cleavage, D7 or D9 blastocyst rates (P>0,05). Nevertheless, the frozen FF from 2-8mm follicles resulted in a reduced hatching rate and lower ICM cells. Fresh or frozen follicular fluid of >8mm follicles could be used for a 6h transport of bovine oocytes before maturation for 18h

Conception rate according to sire, body condition score and estrus occurrence of suckled Bos taurus beef cows submitted to timed artificial insemination

ABSTRACT The objective of this study was to investigate the effect of estrus expression, body condition score (BCS), different sires and semen batches on the conception rate of suckled Bos taurus beef cows submitted to timed artificial insemination (TAI). Data from 7,737 TAI were obtained from five farms in South Brazil. Cows received an estradiol plus progesterone-based estrous synchronization protocol. Only sires (n = 13) with at least two semen batches and 50 AI in two different lots were included in the study. Conception rate was higher for cows in estrus (66.8% vs. 26.3%) or with BCS ≥ 3 (57.2% vs. 51.6%) than in cows without estrus or BCS &lt; 3, respectively (P≤0.001). Conception rate per sire ranged from 42.6% (Sire L) to 74.3% (Sire K). Conception rate in cows with BCS ≥ 3 and estrus occurrence varied from 47.4% (Sire L) to 86.1% (Sire A) among sires. Conception rate differed among semen batches of the same sire (B1 = 58.5%, B2 = 62.5%, and B3 = 83.2%). In conclusion, there was individual variation in conception rate among AI sires and semen batches within sires. The conception rate was increased by estrus occurrence and greater BCS.</jats:p

Qualidade do leite em amostras individuais e de tanque de vacas leiteiras

Amostras de leite foram coletadas de tanques de expansão (n = 69) e das vacas individualmente (n = 3517), em propriedades com sistema de produção especializado (ES, n = 3), semiespecializado (SE, n = 5) e não especializado (NE, n = 7). A composição, contagem de células somáticas (CCS) e teor de nitrogênio ureico (NU) foram avaliados nos diferentes sistemas e estações do ano. Os dados foram comparados aos parâmetros da Instrução Normativa 51/2002 (IN51) para a região Sul do Brasil, de maio/2009 a junho/2010. Analisando os três sistemas de produção, 42% (n = 29/69) das amostras de leite dos tanques de expansão e 11% (n = 375/3517) das individuais atenderam a IN51. Amostras de leite de tanque do sistema ES 70% (n = 14/20), SE 39% (n = 9/23) e NE 23% (n = 6/26) atenderam os critérios da IN51. Amostras de leite individuais apresentaram menor percentual com parâmetros mínimos da IN51 comparada ao tanque. O leite de vacas sadias dilui a CCS de vacas doentes, indicando que a CCS do tanque não é um indicador confiável para qualidade do leite. Os teores médios de gordura, proteína e sólidos totais em amostras de tanque foram semelhantes entre os sistemas de produção. A lactose e NU nas amostras do tanque foram similares entre as estações do ano. Em contraste, a CCS do tanque e individual não alcançaram os parâmetros da IN51. O teor médio de NU foi maior (P < 0,001) nas amostras de leite de tanque e individual do sistema especializado. A análise de amostras de leite de cada vaca permitiu melhoria nutricional do rebanho especializado

Effect of plasma separation techniques and sperm selection on sperm recovery and viability of cooled pony stallion semen for 48h at 5°C

ABSTRACT Separation techniques of seminal plasma [centrifugation (SC) and Sperm Filter® (SF)] and sperm selection [Androcoll-E (SCA) and filtration glass wool (GW)] were used in 24 ejaculates from 6 stallions. In experiment 1, the ejaculates were allocated into control (no spin), centrifugation at 600 g x 10min, SF and GW. In experiment 2, semen was submitted to SC, SGA and filtered through GW. Following the treatments in both experiments, samples were kept chilled at 5°C to 50 x 106 sperm/ml for 48h. The variables measured on fresh and cooling semen were pH, motility, membrane viability function by 6-carboxyfluorescein diacetate and propidium iodide (CFDA / PI), viability or vitality (eosin / nigrosine) and mitochondrial activity. In experiment 1, centrifugation to remove seminal plasma resulted in greater damage to sperm than separation by sperm filter, and selection by glass wool was more efficient in separating viable cells and maintaining viability during cooling. In experiment 2 Androcoll-E and glass wool treatments resulted in higher (P &lt;0.0001) motility, membrane function, mitochondrial activity, and viability than centrifuged semen. Both selection by Androcoll- E and glass wool improved the quality of semen pony stallions for preservation for up to 48h to 5ºC.</jats:p

LÍQUIDO FOLICULAR EQÜINO NA MATURAÇÃO IN VITRO DE OÓCITOS BOVINOS

O desenvolvimento embrionário de oócitos bovinos maturados in vitro (MIV) foi avaliado em meio suplementado com líquido folicular eqüino (Lfe). Foram distribuídos 1045 oócitos em 11 repetições formando três grupos tratamentos (T1, T2, T3) e um controle (C). O meio de maturação utilizado foi o TCM-199 acrescido de piruvato de sódio, hormônio folículo estimulante recombinante (rFSHh) e hormônio luteinizante equino (LHe). Suplementou-se esse meio com 10% de soro de égua em estro para o grupo controle e para T1, T2 e T3, o meio foi suplementado com 5, 10, e 20% de LFe, respectivamente. Os oócitos foram maturados in vitro (MIV) por 24h. A fecundação in vitro (FIV) foi realizada em meio Talp-Fert. A MIV e a FIV foram realizadas em estufa a 39ºC com 5% de CO2 em ar e umidade saturada. Os zigotos foram cultivados em meio SOFaaci, sob óleo mineral no interior de bolsas plásticas gaseificadas. As taxas de clivagem e de blastocistos foram observadas diariamente (D), e em D7, foram superiores (P0,05) às do grupo controle. Em D9, a taxa de blastocistos do T2 foi superior (P0,05). O LFe, na concentração de 10% pode ser utilizado, em substituição ao soro de égua em estro para suplementar o meio de MIV de oócitos bovinos. Equine follicular fluid on in vitro maturation of bovine oocytes Abstract Embryo development of bovine oocytes was evaluated using maturation medium supplemented with equine follicular fluid (eFF). One thousand and forty five (1045) oocytes were distributed in 11 replications forming three treatment groups (T1, T2 e T3) and one Control (C). TCM-199 added with sodium pyruvate, rFSHh and LHe was used as maturation medium. This medium was supplemented with 10% estrous mare serum for Control group, and 5, 10, and 20% eFF, respectively, for T1, T2 e T3 groups. In vitro maturation (IVM) of all groups was performed during 24h. In vitro fertilization (IVF) was performed in TALP-FERT medium. IVM and IVF were carried out in an incubator at 39ºC with 5% CO2 in air and saturated humidity. Zygotes were cultured in SOFaaci medium, under mineral oil in gasified bags. Cleavage and blastocyst rates were daily observed (D), and at D7, were higher (P0.05) for those from control group. At D9, blastocyst rate of T2 was higher (P0.05). The eFF, at a 10% concentration, can replace the use of estrous mare serum to supplement the IVM medium of bovine oocytes