Successful Treatment Using Simeprevir, Sofosbuvir and Rituximab of a Severe Form of Hepatitis C Virus-related Mixed Cryoglobulinemia with Cardiac Involvement

Numerous extrahepatic manifestations have been reported in hepatitis C virus (HCV) infection, particularly mixed cryoglobulinemia (MC). MC generally responds to clearance of HCV under pegylated-interferon plus ribavirin treatment. New direct-acting antiviral agents have been licensed for HCV under different combinations but have not been studied in severe forms of MC. Here, we present a case report describing a life-threatening form of MC with multivisceral involvement, which was successfully treated with concomitant rituximab, sofosbuvir and simeprevir. In light of the rapid clinical remission associated with sustained virological response and the excellent side-effect profile, this treatment should be considered as a first-line therapy in severe forms of MC

Histoire naturelle, Diagnostic et suivi de l'infection VHC

Date du colloque&nbsp;: 09/2008</p

Prévalence et diversité génétique des souches HBV et HDV circulant au Niger et en Mauritanie

Le portage chronique du virus de l'hépatite B (HBV) en Afrique est très élevé, avoisinant parfois jusqu'à 30% dans certaines régions. Selon l'OMS, sur les 400 millions de personnes souffrant d'une infection chronique HBV, 70 à 140 millions vivent en Afrique avec un taux de décès annuel d'environ 250 000 cas par an. Les données concernant l'infection concomitante par le virus de l'hépatite D (HDV) virus satellite de l'HBV, sont rares car peu d'études ont été réalisées en Afrique. Malgré ce fort taux de prévalence, les données concernant la caractérisation moléculaire des souches HBV et HDV sont limitées ou inexistantes dans la plupart des pays d'Afrique Subsaharienne et en particulier dans région du Sahara, vaste zone multiethnique, de passage et de brassage de populations. Au cours de cette étude, nous avons voulu déterminer la prévalence et l'épidémiologie moléculaire des souches HBV et HDV circulant la région du Sahara (Niger et Mauritanie). Tout d'abord, nous avons étudié une cohorte de donneurs de sang du Niger porteurs de l'AgHBs. Nous avons trouvé que 80% des souches étudiées appartenaient au génotype E. De plus, nous avons identifié et caractérisé un nouveau recombinant HBV/D-HBV/E représentant près de 20% des souches étudiées. Les points de cassure se situaient dans des " points chauds " de recombinaison, régions impliquées dans les événements d'intégration du génome de l'HBV. Des analyses phylogénétiques extensives nous ont permis de le classer comme un nouveau sous génotype. Nous avons proposé HBV/D8. Nous avons par la suite, en collaboration avec des équipes locales, étudié la diversité génétique HBV en Mauritanie, pays voisin du Niger, au sein de différents groupes représentatifs de la population : femmes enceintes (n=1020), consultants (n=954), donneurs de sang (n=11110) et patients suivis pour une infection HBV chronique (n=300). Le taux de portage de l'AgHBs, était de 11 à 18 % selon les populations étudiées, classant la Mauritanie comme pays à haute endémie pour l'HBV. L'exposition à l'HBV était associée en analyse multivariée, au niveau d'éducation, à l'ethnie, à des antécédents de transfusion et à la profession chez les femmes enceintes et, chez les consultants, au sexe masculin. Sur le plan moléculaire, 3 génotypes différents circulaient en Mauritanie (n=240) : l'HBV/D (56,3%), l'HBV/E (34,6%) et l'HBV/A (8,8%). De façon intéressante, 30% des génotypes D circulant en Mauritanie étaient l'HBV/D8. Cette diversité de l'HBV peut être expliquée par la localisation géographique du Niger et de la Mauritanie comme zones de passage entre l'Afrique du Nord et l'Afrique Sub Saharienne où l'HDV/D et l'HBV/E respectivement sont prédominants. D'autre part, 14 à 33% des patients HBV positifs étaient également infectés par l'HDV. La présence d'anticorps anti-Delta était associée en analyse multivariée chez les consultants, à l'âge et au sexe masculin, et chez les donneurs de sang, à l'âge, au nombre de mariages, à la profession (militaire), à la résidence (région du désert) et à des antécédents d'hospitalisation. Sur le plan moléculaire, le génotype HDV-1 est largement majoritaire (90%) mais l'HDV-5 a aussi été isolé (10% des cas). En conclusion, ce travail souligne encore la forte prévalence des hépatites B et Delta au Niger et en Mauritanie. Nous avons aussi mis en évidence une diversité génétique importante des souches circulant et notamment la caractérisation d'un nouveau sous-génotype HBV/D8 hautement prévalent. Il convient d'évaluer la sévérité de la maladie hépatique liée à cette diversité génétique et à ce nouveau variant, notamment son implication éventuelle dans l'oncogenèse hépatique par des événements de recombinaison génétique.Chronic carriage of hepatitis B virus (HBV) in Africa is very high, reaching as much as 30% in some areas. According to WHO, about 400 million people suffering from chronic HBV infection, 70 to 140,000,000 live in Africa with an annual death rate of about 250 000 cases per year. Data on concomitant infection by the hepatitis D virus (HDV), satellite of HBV, are rare because few studies have been conducted in Africa. Despite this high prevalence, data on the molecular characterization of HBV and HDV strains are limited or nonexistent in most countries of Sub-Saharan Africa and particularly in the Saharan region, a vast multi-ethnic area, crossing and mixing of populations. In this study, we wanted to determine the prevalence and molecular epidemiology of HBV and HDV strains circulating in the Saharan region (Niger and Mauritania). First, we studied a cohort of HBsAg positive blood donors in Niger. We found that 80% of the strains tested belonged to genotype E. In addition, we identified and characterized a novel recombinant HBV/D-HBV/E, which represents nearly 20% of the strains studied. The breakpoints were located in "hot spots" of recombination regions involved in the events of integration of HBV genome. Extensive phylogenetic analyzes have allowed us to classify it as a new subgenotype. We proposed HBV/D8. We then, in collaboration with local teams, studied the genetic HBV diversity in Mauritania, a neighboring country of Niger, in various representative groups of the population: pregnant women (n = 1020), consulting patients (n = 954) blood donors (n = 11,110) and patients treated for chronic HBV infection (n = 300). The carrier rate of HBsAg was 11 to 18% depending on the population studied, classifying Mauritania as high HBV endemic country. Exposure to HBV was associated in multivariate analysis to the level of education, ethnicity, history of transfusion and the profession in pregnant women, and in consulting patients, to male gender. At the molecular level, three different genotypes circulate in Mauritania (n = 240): HBV/D (56.3%), HBV/E (34.6%) and HBV/A (8.8 %). Over 30% of HBV/D genotypes circulating in Mauritania were HBV/D8 (isolated and characterized in Niger). This molecular diversity of HBV can be explained by the geographical location of Niger and Mauritania in the border area as gateway between North Africa and Sub Saharan Africa where the HDV/D and HBV/E predominate respectively. On the other hand, 14-33% of patients infected with HBV were also infected with HDV. The presence of anti-delta antibodies was associated in multivariate analysis in consulting patients, with age and male gender, and among blood donors, with age, number of marriages, occupation (military), residence (desert region) and history of hospitalization. At the molecular level, most strains belonged to genotype HDV-1 (90% of cases) but the HDV-5 was also isolated (10% of cases). In conclusion, this study further emphasizes the high prevalence of hepatitis B and Delta Niger and Mauritania, which is a major public health problem. We also demonstrated a high genetic diversity of circulating strains, including the characterization of a new sub-genotype HBV/D8 highly prevalent. It should then assess the severity of liver disease associated with this genetic diversity and specially with this new variant, for its possible involvement in oncogenesis hepatic events of genetic recombination.ANGERS-BU Médecine-Pharmacie (490072105) / SudocSudocFranceF

Facteurs prédictifs de la réponse au traitement des hépatites chroniques C (étude de la cinétique de deux marqueurs viraux et variabilité du gène NS5A)

Plus de 200 millions de personnes seraient infectées par le virus de l'hépatite C, soit près de 3 % de la population mondiale. Au cours de la dernière décennie, le traitement contre le VHC a vu de nombreuses avancées et des facteurs prédictifs de réponse au traitement ont été définis. Cependant, malgré ces avancées thérapeutiques, les patients infectés par un génotype 1 restent des patients ayant le moins de chance de répondre à un traitement antiviral par l'élimination persistante du virus. Nous avons étudié des facteurs viraux permettant de prédire la réponse au traitement : la cinétique de disparition de l'ARN et de l'antigène de capside du VHC sous traitement et la variabilité génétique du gène NS5A avant et durant le traitement. Nous avons trouvé plus de mutations dans le gène NS5A chez les répondeurs que chez les non-répondeurs, ainsi qu'une nouvelle insertion génétique dans la région V3 de ce gène formant une duplication de cette région.ANGERS-BU Médecine-Pharmacie (490072105) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Développement de modèles animaux pour l'étude des agents infectieux hépatotropes viraux

La repopulation du foie par avantage sélectif des hépatocytes humains réimplantés sur les hépatocytes résidents, ouvre d'incontestables possibilités pour l'étude des agents infectieux à tropisme hépatique capable d'infecter uniquement les hépatocytes humains. L'obtention d'un modèle murin permettrait donc de mieux comprendre les mécanismes d'infection et de réplication par le VHC, le VHB et le Plasmodium falciparum afin de mieux appréhender leur potentiel pathogénique et de tester de nouvelles stratégies thérapeutiques. L'objectif de mon travail a été de reproduire le modèle murin de régénération hépatique (Alb-uPA/SCID) et d'améliorer ce modèle en diminuant le rejet de la greffe. Pour cela les souris ont été traitées afin de diminuer l'activité des macrophages et des cellules NK. Une amélioration du maintien et de la survie des hépatocytes humains transplantés chez les souris traitées a été constatée par une augmentation significative de la sécrétion de l'albumine et de l'alpha 1 anti-trypsine humaine ainsi que du nombre de foyers d'hépatocytes humains. De plus, le niveau de la différenciation hépatocytaire a été confirmé par la susceptibilité des hépatocytes humains à l'infection par le Plasmodium falciparum. Nous avons pu valider un nouveau protocole, ex vivo, de transfert de gènes dans des hépatocytes humains à l'aide d'un vecteur FLAP-ADN lentiviral. Le repeuplement du foie de souris Alb-uPA/SCID par les hépatocytes génétiquement modifiés à l'aide d'une technique de transduction ex vivo des hépatocytes en suspension est un point très important qui soutien l'idée de thérapie génique du foie. Ce protocole peut être appliqué dans les différentes pathologies du foie : hémophilies A et B, maladie de Pompe, maladie de Tay-Sachs Hélène Strick-Marchand et coll. ont isolé et caractérisé in vitro plusieurs lignées hépatiques embryonnaires [cellules nommées BMEL ( bipotential mouse embryonic liver )] à partir de souris sauvages de fond génétique différent. Ces lignées sont composées de cellules bipotentielles, ayant la capacité de se différencier en hépatocytes ou en cholangiocytes après induction. Dans les conditions expérimentales testées, les cellules BMEL-GFP participent à la régénération hépatique chez la souris Alb-UPA/SCID. De plus, nos résultats démontrent que des lignées cellulaires non-transformantes sont capables in vivo de se différencier en hépatocytes et en cellules biliaires. Les hépatocytes en culture permettent des études de pharmacotoxicité mais la disparition précoce du cytochrome P450 et de certains enzymes du métabolisme limite l'utilisation des hépatocytes humains cultivé in vitro. Il n'existe pas actuellement de système pouvant reproduire le métabolisme hépatique in vivo. La détection (par RT-PCR en temps réel) de plusieurs sous-familles de cytochromes P-450 chez la souris avec un foie humanisé démontre que les hépatocytes humains ainsi transplantés ne perdent pas les facultés de synthèse des nouveaux enzymes hépatiques, en particulier des enzymes du cytochrome P450. De ce fait, l'obtention, le maintien et la multiplication d'hépatocytes humains constituent un enjeu stratégique important pour l'étude de l'hépatotoxicité des médicaments in vivo.ANGERS-BU Médecine-Pharmacie (490072105) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Detection and quantification of serum or plasma HCV RNA: mini review of commercially available assays

The treatment schedule (combination of compounds, doses, and duration) and the virological follow-up for management of antiviral treatment in patients chronically infected by HCV is now well standardized, but to ensure good monitoring of the treated patients, physicians need rapid, reproducible, and sensitive molecular virological tools with a wide range of detection and quantification of HCV RNA in blood samples. Several assays for detection and/or quantification of HCV RNA are currently commercially available. Here, all these assays are detailed, and a brief description of each step of the assay is provided. They are divided into two categories by method: those based on signal amplification and those based on target amplification. These two categories are then divided into qualitative, quantitative, and quantitative detection assays. The real-time reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)-based assays are the most promising strategy in the HCV virological area.</p

Herpes zoster: Risk and prevention during immunomodulating therapy

International audienceHerpes zoster can be serious or incapacitating, particularly in patients whose immune system is compromised by a disease or treatment. Immunomodulating drugs can increase the risk of infection. Well-established risk factors include advanced age and glucocorticoid therapy. The data are somewhat conflicting for medications such as methotrexate, tofacitinib, TNFα antagonists (infliximab, adalimumab, etanercept, certolizumab, and golimumab), abatacept, tocilizumab, and rituximab. Nevertheless, the risk of herpes zoster is increased in patients taking biological agents, because of the underlying diseases and/or effects of the drugs. A live attenuated herpes zoster vaccine has been proven effective and safe in immunocompetent individuals. At present, however, it is not recommended for patients with immunodeficiencies, including those taking biological drugs, as no studies have assessed its risk/benefit ratio in this population. This situation may change in the near future, as recent data support the effectiveness and safety of the herpes zoster vaccine in patients who take biotherapies or have other causes of immunodeficiency. Alternative approaches designed to protect these patients from herpes zoster and its complications are also under evaluation. There is a need to define the indications of the herpes zoster vaccine in terms of the target population, timing, modalities, and frequency, according to the underlying chronic systemic disease, age group, varicella-zoster virus status, and exposure to therapeutic agents.</p

Epidémiologie des infections urogénitales à Chlamydia trachomatis chez des étudiants camerounais (Yaoundé) (génotypage des souches, sensibilité aux antibiotiques)

PARIS-BIUSJ-Thèses (751052125) / SudocPARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF

Practical approach to method verification in plasma and validation in cerebrospinal fluid under accreditation using a flexible scope in molecular virology: setting up the HIV, HBV and HCV Aptima™ Quant Dx assays

International audienceAbstract Background Our laboratory obtained the ISO 15189 accreditation for the plasmatic HIV-1, HBV and HCV viral load (VL) using the m2000 RealTi m e™ system, which was recently changed for the platform Panther ® . Here, we discuss a strategy for performing method validation/verification very quickly. Methods We performed the mandatory (repeatability, internal quality assessment [IQA], measurement uncertainty [MU]) and optional technical verifications for CE/IVD assays using the flexible scope range A. We also performed the mandatory assays for the validation of HIV-1 VL in the cerebrospinal fluid (CSF) using the flexible scope range B. The change was checked by following up on the turnaround time (TAT). Results The coefficient of variation (CV%) for repeatability and IQA complied with the limit of 0.25 log. The MU results ranged from 0.04 to 0.25 log copies or IU/mL. The comparisons of methods showed excellent correlations (R 2 = 0.96 for the three parameters) but a delayed centrifugation on HCV VL showed variations of up to 2 log IU/mL. An excellent linearity for HIV-1 in the CSF was obtained from 1.5 to 5 log copies/mL with R 2 = 0.99. The TAT increased (84%–98%) in routine usage. Conclusions The three Aptima assays are well suited for routine laboratory use and can be integrated within less than 2 weeks in accordance with flexible scope range A. Our data allows us to confidently perform HIV-1 VL in CSF following flexible scope range B. Finally, we provide an organizational guide for flexible scope management in molecular virology within a short time frame