Lemon oils attenuate the pathogenicity of pseudomonas aeruginosa by quorum sensing inhibition

The chemical composition of three Citrus limon oils: lemon essential oil (LEO), lemon terpenes (LT) and lemon essence (LE), and their influence in the virulence factors production and motility (swarming and swimming) of two Pseudomonas aeruginosa strains (ATCC 27853 and a multidrug-resistant HT5) were investigated. The main compound, limonene, was also tested in biological assays. Eighty-four compounds, accounting for a relative peak area of 99.23%, 98.58% and 99.64%, were identified by GC/MS. Limonene (59–60%), γ-terpinene (10–11%) and β-pinene (7–15%) were the main compounds. All lemon oils inhibited specific biofilm production and bacterial metabolic activities into biofilm in a dose-dependent manner (20–65%, in the range of 0.1–4 mg mL−1) of both strains. Besides, all samples inhibited about 50% of the elastase activity at 0.1 mg mL−1. Pyocyanin biosynthesis decreases until 64% (0.1–4 mg mL−1) for both strains. Swarming motility of P. aeruginosa ATCC 27853 was completely inhibited by 2 mg mL−1 of lemon oils. Furthermore, a decrease (29–55%, 0.1–4 mg mL−1) in the synthesis of Quorum sensing (QS) signals was observed. The oils showed higher biological activities than limonene. Hence, their ability to control the biofilm of P. aeruginosa and reduce the production of virulence factors regulated by QS makes lemon oils good candidates to be applied as preservatives in the food processing industry.Fil: Luciardi, María Constanza. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; ArgentinaFil: Blázquez, María Amparo. Universidad de Valencia; EspañaFil: Alberto, Maria Rosa. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; ArgentinaFil: Cartagena, Elena. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; ArgentinaFil: Arena, Mario Eduardo. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; Argentin

Evaluation of salivary protein patterns among a rural population exposed and non-exposed to arsenic-contaminated drinking water in areas of Tucumán (Argentina): a pilot study

Arsenic contamination in the environment and groundwater is a major global public health problem. Several researchers suggest that the toxicity of arsenic could be related to oral cancer development, usually resulting from potentially malignant lesions. During pathological processes, salivary proteins suffer modifications, which could lead to the discovery of new biomarkers. Objective: To analyze the protein profile in human saliva samples from a rural population exposed to high levels of arsenic in drinking water and its association with potentially malignant lesions. Methodology: This observational, analytic and cross-sectional design included 121 patients from the state of Graneros (Tucumán, Argentina). Arsenic concentration in drinking water was determined and, according to the values obtained, individuals were divided into 2 groups: exposed group and non-exposed group. Saliva samples were obtained, and total protein concentration was measured by Bradford method. Finally, Laemmli SDS-polyacrylamide gel electrophoresis was conducted to obtain the protein profile. Results: Total protein concentration in saliva was lower in the exposed group than in the non-exposed group. Average areas of 20 and 42 KDa bands were significantly lower in exposed group than non-exposed group. Conclusion: Chronic intake of high arsenic concentrations in drinking water produces changes in the salivary protein profile, which is associated with the presence of potentially malignant lesions

Biomarcadores de riesgo protrombótico en niños con diabetes tipo 1

Los factores de riesgo cardiovascular, incluida la diabetes, producen perturbación endotelial induciendo un microambiente proinflamatorio, protrombótico y antifibrinolítico. En niños y adolescentes diabéticos, el desarrollo de enfermedades cardiovasculares se produce precozmente. OBJETIVO: investigar el riesgo protrombótico en niños con diabetes tipo 1 (DT1) mediante pruebas globales de coagulación, niveles del Inhibidor del activador del plasminógeno 1 (PAI-1) y del ligando CD40 soluble (sCD40L) y analizar la correlación entre variables. METODOLOGÍA: Se estudiaron 35 niños con DT1 de 11 ± 2,5 años de edad, sin complicaciones vasculares y 20 controles, provenientes del Servicio de Endocrinología del Hospital del Niño Jesús. Se determinó recuento de plaquetas, Tiempo de Protrombina, Tiempo de Tromboplastina Parcial Activado y Fibrinógeno(Fg) (coagulómetro ACL 300, Research Instrumentation Laboratory, Italia). Se empleó métodos ELISA para PAI-1 (Asserachrom, Diagnostica Stago) y sCD40L (PeproTech, EEUU). El control glucémico se evaluó mediante glucemia en ayunas (método enzimático, Wiener Lab) y HbA1c (DCA 2000, Siemens). Los resultados se expresaron como la media ± DE y con el coeficiente de Pearson se investigó las correlaciones. El protocolo fue aprobado por Comité de Docencia e Investigación del Hospital y los padres firmaron un consentimiento informado. RESULTADOS: Los niños diabéticos tuvieron niveles más elevados de Fg (308±66 vs. 246±18 mg/dl), PAI-1 (41,6±12,0 vs. 11,0±1,0 ng/ml), sCD40L (1608±149 vs. 106±17 pg/ml) que los controles. PAI-1 y sCD40L se correlacionaron positivamente con glucemia, HbA1c, y Fg. CONCLUSIÓN: Los niveles elevados de Fg, PAI-1 y sCD40L reflejan un riesgo protrómbótico en la población de niños diabéticos estudiada.Fil: Abregu, Adela Victoria. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Luciardi, María Constanza. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; ArgentinaFil: Diaz, Eduardo Luis. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Aleman, Mariano Nicolás. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; ArgentinaFil: Mariani, Agustina Cecilia Edith. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Albornoz, Estela Roxana. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Herrera, Héctor Matías. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Aguero, T. H.. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Bazán Muñoz, Carla Maria. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; Argentina19° Reunión de Investigación en Ciencias de la SaludSan Miguel de TucumánArgentinaUniversidad Nacional de Tucumán. Facultad de Medicin

Grapefruit essential oils inhibit quorum sensing of pseudomonas aeruginosa

Citrus essential oils are used in food to confer flavor and aromas. The citrus essential oils have been granted as GRAS and could be used as antimicrobial additives to control bacterial quorum sensing from potential food bacterial pathogens. The chemical composition and inhibitory activity of Citrus paradisi (grapefruit) essential oils obtained by cold-pressed method (EOP) and cold-pressed method followed by steam distillation, against Pseudomonas aeruginosa were determined. The GC-MS analyses of the oil indicated the amount of the essential oil components was highest with D-limonene in both cases. However, the extraction method modified the chemical composition. EOP had higher amount of coumarins and flavonoid as well as less oxygenated terpenoids. At 0.1 mg/mL essential oils were not able to modify the bacterial development but inhibited the P. aeruginosa biofilm production between 52% and 55%, sessile viability between 45% and 48%, autoinducer production and elastase activity between 30% and 56%. Limonene was less effective at inhibiting P. aeruginosa than the essential oils, suggesting a synergistic effect of the minor components. According to our results, grapefruit essential oils could be used as a food preservative to control P. aeruginosa virulence.Fil: Luciardi, María Constanza. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; ArgentinaFil: Blázquez, M. Amparo. Universidad de Valencia; EspañaFil: Alberto, Maria Rosa. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; ArgentinaFil: Cartagena, Elena. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; ArgentinaFil: Arena, Mario Eduardo. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; Argentin

Comparison of seven structurally related coumarins on the inhibition of Quorum sensing of Pseudomonas aeruginosa and Chromobacterium violaceum

Quorum sensing (QS) is a cell-to-cell signaling communication system that controls the virulence behavior of a broad spectrum of bacterial pathogens, participating also in the development of biofilms, responsible of the antibiotic ineffectiveness in many infections. Therefore, QS system is an attractive target for antimicrobial therapy. In this study, we compare the effect of seven structurally related coumarins against bacterial growth, biofilm formation and elastase activity of Pseudomonas aeruginosa. In addition, the anti-pathogenic capacity of the seven coumarins was evaluated on the wild type and the biosensor strain of Chromobacterium violaceum. The comparative study of coumarins showed that molecules with hydroxyl groups on the aromatic ring displayed higher activity on the inhibition of biofilm formation of P. aeruginosa over coumarins with substituents in positions 3 and 4 or without the double 3,4-bond. These 3 or 4-hydroxylated positions caused a decrease in the anti-biofilm activity obtained for coumarin. However, the hydroxyl group in position 3 of the pyrone ring was important for the inhibition of C. violaceum QS and elastolytic activity of P. aeruginosa. The effects observed were active independently of any effect on growth. According to our results, coumarin and its hydroxylated derivatives represent an interesting group of compounds to use as anti-virulence agents against the human pathogen P. aeruginosa.Fil: D'almeida, Romina Elisa. Universidad Nacional de Tucuman. Instituto de Biotecnología Farmaceutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Instituto de Biotecnología Farmaceutica y Alimentaria.; ArgentinaFil: Molina, Rocío Daniela Inés. Universidad Nacional de Tucuman. Instituto de Biotecnología Farmaceutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Instituto de Biotecnología Farmaceutica y Alimentaria.; ArgentinaFil: Viola, Carolina Maria. Universidad Nacional de Tucuman. Instituto de Biotecnología Farmaceutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Instituto de Biotecnología Farmaceutica y Alimentaria.; ArgentinaFil: Luciardi, María Constanza. Universidad Nacional de Tucuman. Instituto de Biotecnología Farmaceutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Instituto de Biotecnología Farmaceutica y Alimentaria.; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; ArgentinaFil: Nieto Peñalver, Carlos Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; ArgentinaFil: Bardon, Alicia del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Química del Noroeste. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Química del Noroeste; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; ArgentinaFil: Arena, Mario Eduardo. Universidad Nacional de Tucuman. Instituto de Biotecnología Farmaceutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Instituto de Biotecnología Farmaceutica y Alimentaria.; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; Argentin