Genes de enterotoxinas, multirresistência a antimicrobianos e caracterização molecular de espécies de Staphylococcus spp. isoladas de leite bovino orgânico

The multidrug resistant and the emergence of methicillin-resistant staphylococci isolated from animals, food, and humans are public health concern. These microorganisms produce different toxins related to food poisoning in humans. This study aimed to characterize Staphylococcus spp. isolated from two organic milk farms in Brazil. A total of 259 milk samples were collected, from which 58 (22.4%) Staphylococcus spp. were isolated. The highest sensibility to ceftiofur and sulfamethoxazole/trimethoprim was observed in 96.6% of Staphylococcus spp., and whereas 89% were resistant to penicillin G. The mecA gene was detected in 13.8% of the isolates. SEA and SEC were the most common enterotoxins detected. PFGE revealed genetic heterogeneity from S. intermedius and S. warneri analyzed, while S. aureus presented similar profiles among isolates from the two studied herds. To the best of our knowledge, the current study describes for the first time presence of enterotoxins, mecA gene, and genetic diversity of staphylococci isolated from organic dairy farms in Brazil.A emergência de estafilococos multirresistentes e resistentes à meticilina, isolados de animais, alimentos e humanos é uma preocupação em saúde pública. Esses micro-organismos produzem diferentes toxinas relacionadas à intoxicação alimentar em humanos. Este estudo caracterizou Staphylococcus spp. isolados em duas fazendas orgânicas no Brasil. Foram coletadas 259 amostras de leite em duas propriedades leiteiras orgânicas, nas quais 58 (22,4%) estirpes de Staphylococcus spp. foram isoladas. A maior sensibilidade dos isolados foi observada para ceftiofur e sulfametoxazol/trimetoprim em 96,6%. Em contraste, acima de 89% de resistência dos estafilicocos foi encontrada para penicilina G. O gene mecA foi identificado em 13,8% dos isolados. SEA e SEC foram as enterotoxinas mais comumente detectadas. PFGE revelou heterogeneidade genética entre S. intermedius e S. warneri, enquanto S. aureus demonstraram perfis semelhantes entre isolados dos dois rebanhos estudados. Relata-se pela primeira vez no Brasil a detecção de enterotoxinas, o gene mecA e diversidade genética em estafilococos isolados de vacas em produção orgânica

Nontuberculous mycobacteria in milk from positive cows in the intradermal comparative cervical tuberculin test: implications for human tuberculosis infections

Although the tuberculin test represents the main in vivo diagnostic method used in the control and eradication of bovine tuberculosis, few studies have focused on the identification of mycobacteria in the milk from cows positive to the tuberculin test. The aim of this study was to identify Mycobacterium species in milk samples from cows positive to the comparative intradermal test. Milk samples from 142 cows positive to the comparative intradermal test carried out in 4,766 animals were aseptically collected, cultivated on Lowenstein-Jensen and Stonebrink media and incubated for up to 90 days. Colonies compatible with mycobacteria were stained by Ziehl-Neelsen to detect acid-fast bacilli, while to confirm the Mycobacterium genus, conventional PCR was performed. Fourteen mycobacterial strains were isolated from 12 cows (8.4%). The hsp65 gene sequencing identified M. engbaekii (n=5), M. arupense (n=4), M. nonchromogenicum (n=3), and M. heraklionense (n=2) species belong to the Mycobacterium terrae complex. Despite the absence of M. tuberculosis complex species in the milk samples, identification of these mycobacteria highlights the risk of pathogen transmission from bovines to humans throughout milk or dairy products, since many of mycobacterial species described here have been reported in pulmonary and extrapulmonary diseases both in immunocompetent and immunocompromised people

Safety issues of raw milk: evaluation of bacteriological and physicochemical characteristics of human milk from a bank in a teaching hospital, focusing on Staphylococcus species

Many infants are nurtured with milk supplied by human banks, whose bacteriological and physical-chemical profiles are a major issue. We investigated the bacteriological and physical-chemical characteristics, as well as genotypic and phenotypic and profiles of Staphylococcus species isolated from 240 samples of breast milk from a bank in a teaching hospital. Dornic acidity of milk revealed that 95.4% (229/240) had acceptable limits (< 8.0 oD). Caloric intake showed a wide variation in cream content (4%), fat (4%) and energy values (559.81 Kcal/L). Staphylococcus (105/186 or 56.5%) and Enterobacter (25/186 or 13.4%) were the most prevalent genera, although other microorganisms were identified, including Klebsiella pneumoniae and Pseudomonas aeruginosa. Amoxicillin/clavulanic acid (125/157 or 79.6%), vancomycin (115/157 or 73.2%), and cephalexin (112/157 or 71.3%) were the most effective antimicrobials. High resistance rates of isolates were found to penicillin G (141/157 or 89.8%), ampicillin (135/157 or 86%), and oxacillin (118/157 or 75.2%). Multidrug resistance to ≥ 3 antimicrobials occurred in 66.2% (123/186) of the isolates. Residues of microbial multiplication inhibitory substances were found in 85% (204/240) of samples. Among the coagulase-positive-CPS and negative-CoNS staphylococci, the mecA gene was detected in 53.3% (8/15) and 75% (30/40), respectively. Genes sea, seb and sec were detected in 20% (3/15) of CPS, while tsst-1 was detected in 13.34% (2/15). In addition, 13.3% (2/15) of S. aureus were toxin-producers. Genes sea, seb and sec were detected in 90% (36/40), 5% (2/40) and 15% (6/40) CoNS, respectively. Enterotoxin production was identified in 5% (2/40) of CoNS. The identification of multidrug-resistant bacteria, staphylococci species toxin-producers harboring methicillin-resistance genes, and residues of microbial multiplication inhibitory substances reinforce the need for a continuous vigilance of milk quality offered to infant consumption by human banks

Dimetilsulfóxido - DMSO no teste de sensibilidade microbiana in vitro em cepas de Rhodococcus equi isoladas de afecções pulmonares em potros

Comparou-se a sensibilidade microbiana in vitro de isolados de Rhodococcus equi pelo teste padrão de difusão com discos, com o modificado, pela adição de 5% de dimetilsulfóxido-DMSO. Observou-se aumento da sensibilidade do R. equi no teste com DMSO, frente a aminoglicosídeos (canamicina, amicacina, estreptomicina) e ao cloranfenicol, enquanto para a eritromicina e derivados ß-lactâmicos (penicilina G, cefalosporinas, amoxicilina, oxacilina), constatou-se redução da sensibilidade do agente

In vitro effect of josamycin in strains of Rhodococcus equi isolated from pulmonar infections in foals /<br> Efeito in vitro da josamicina em cepas de rhodocaccus equi isoladas de afecções pulmonares em potros

Antmicrobial susceptibility test was performed in thirty-one samples of Rhodococcus equi isolated from iung infections in foals. Among the antimicrobial tosted, erythromycin (100,0 %), rifampin (96.3%). neomycin (93,6 %)Josamycin (90,4%) and gentamicin (90,4 %)presented the highest sensitivity against R- equi- The most-common occurrence of resistance was observed from cephalexim (100,0 %}, lincomycin (100,0 %), cephalothin (96,3 %). oxacillin (96,8 %), penicillin G (96,8 %), amoxicillin (90,3 %) and trimethoprim/sulfamethoxazole (83,8 %). The highest susceptibility of the R. equi to josamycin, suggest the drug as alternative for therapy of R. equi infections in foals.<p><p>Procedeu-se o teste de sensibilidade microbiana in vitro pelo teste de difusão com discos em 31 cepas de Rhodococcus equi. isoladas de afecções pulmonares cm potros. frente a 20 antimicrobianos. Os maioires índices de sensibilidade de R. equi foram constatados para entromicina (100,0 %), níampicina (96.8 %}t ncomicina (93. 6 %). josamicina (90.4%) e gentamicina (90A %). Os maiores índices de resistência do agente foram verificados para cefalexina (100,0%), lincomicina (100.0%), cefalotina (96.8 %), oxacilino (96,8 %}, penicilina G (96,3 %), amoxicilina (90.3 %) e sulfametoxazol/trimetoprim (83,8 %). A alta sensibilidade das cepas de R. equi para a josamicina, sugere a possibilidade de utilização da droga como alternativa no tratamento da rodococose em potros

Caracterização microbiológica e perfil de resistência das bactérias isoladas do útero de cadelas com piometra aberta e fechada

In Brazil there is a large population of dogs at risk of developing pyometra since elective castration is not a common practice. Pyometra is adult bitch disease characterized by inflammation of the uterus with accumulation of exudate. This is one of the most common diseases that occur in the genital tract of female dogs. The most frequently isolated bacteria in the uterus of bitches with pyometra is Escherichia coli. The aim of this study is to compare the pyometra group opened and closed cervix characterizing the isolated bacteria into the uterus of these bitches, and perform the resistance profile of bacteria to antibiotics such forward most commonly used in veterinary medicine for small animals.No Brasil existe uma grande população de cadelas com risco de desenvolver um quadro de piometra pois a castra- ção eletiva não é uma prática comum. A piometra é uma enfermidade da cadela adulta caracterizada pela inflamação do útero com acúmulo de exsudato. Trata-se de uma das enfermidades mais comuns que ocorre no trato genital das fêmeas caninas. A bactéria isolada com maior frequência no útero de cadelas com piometra é a Escherichia coli. O objetivo desse trabalho é comparar os grupos piometra de cérvix aberta e fechada caracterizando as bactérias isoladas no útero dessas cadelas, além de realizar o perfil de resistência dessas bactérias frente aos antibióticos mais comumente utilizados na rotina veterinária de pequenos animais

Eficácia 'in vivo' da cefoperazona sódica, gentamcina e ciprofloxacino no tratamento intramamário da mastite clínica bovina

This study evaluated the in vitro and in vivo efficacy of sodium cefoperazone, gentamicin and ciprofloxacin for the intramammary treatment of clinical mastitis in cows. Thirty cows with non-systemic, clinical mastitis were divided into three groups of ten animals. One of the antibiotics was used in each group for conventional (i.e., three doses, given every 12 hours) and extended (i.e., six doses, every 12 hours) treatments of mastitis. The cows were treated every 12 hours using six doses per animal at the next moments (M): M1, day zero - diagnosis and beginning of treatment; M2, 12 hours from diagnosis and treatment; M3, 24 hours; M4, 36 hours; M5, 48 hours; and M6 60 hours. The most common microorganisms isolated from cows were Staphylococcus aureus, Staphylococcus spp., Corynebacterium sp., Streptococcus spp., Streptococcus agalactiae and Escherichia coli. The efficacy of clinical cure using conventional treatment was 50%, 70% and 50% for the groups treated with sodium cefoperazone, gentamicin and ciprofloxacin, respectively. Regarding the extended treatment, efficacy was 90%, 100% and 80%, for sodium cefoperazone, gentamicin and ciprofloxacin, respectively. Efficacy of bacteriological cure was 100% for sodium cefoperazone, and 90% for both gentamicin and ciprofloxacin using the conventional treatment. By using the extended treatment, efficacy of bacteriological cure was 100% for gentamicin and 90% for both cefoperazone and ciprofloxacin. Statistical differences were not found in clinical or in bacteriological cure into the same group or among groups. Similarly, statistical differences between the conventional and extended treatments were not found. The results from this study reinforce the importance of performing microbiological culture of milk and in vitro antimicrobial sensitivity tests for supporting the intramammary treatment of clinical mastitis in cows. The clinical and bacteriological efficacy of sodium cefoperazone, gentamicin and ciprofloxacin in lactating cows suffering from clinical mastitis using either conventional or extended treatments was also inferred, provided the use of sensitivity tests in vitro.El presente estudio comparó la eficacia in vitro e in vivo de la cefoperazona sódica, la gentamicina y el ciprofloxacino en el tratamiento intramamario de la mastitis clínica bovina. Fueron utilizadas 30 vacas con mastitis clínica sin signos sistémicos, divididas en tres grupos de diez animales. En cada grupo fue utilizado uno de los antibióticos citados antes, para realizar tratamiento convencional (tres aplicaciones a cada 12 horas) y extendido (seis aplicaciones a cada 12 horas) contra mastitis. Las vacas recibieron tratamiento intramamario a cada 12 horas, consistente de seis aplicaciones por animal en los siguientes momentos (M): M1, día cero - diagnóstico e inicio del tratamiento; M2, doce horas después del M1; M3, 24 horas después del M1; M4, 36 horas después del M1; M5, 48 horas después del M1; y M6 60 horas después del M1. Los principales microorganismos aislados de vacas con mastitis fueron Staphylococcus aureus, Staphylococcus spp., Corynebacterium sp. Streptococcus agalactiae spp. y Escherichia coli. La eficacia de la cura clínica usando tratamiento convencional fue de 50% para el grupo de cefoperazona sódica, 70% para gentamicina y 50% para ciprofloxacino. Con el tratamiento extendido la eficacia de la cura clínica fue de 90%, 100% y 80%, respectivamente. La eficacia de la cura bacteriológica fue de 100% para el grupo cefoperazona sódica y de 90% para los grupos gentamicina y ciprofloxacino utilizando el tratamiento convencional. Así mismo, se observó 100% de cura bacteriológica para gentamicina y 90% para los grupos cefoperazona sódica y ciprofloxacino utilizando el tratamiento extendido. No fueron observadas diferencias estadísticas para la cura clínica y bacteriológica ni dentro ni entre los grupos de antimicrobianos. Tampoco se encontró diferencia entre los tratamientos convencional y extendido dentro del mismo grupo o entre los grupos. Los resultados del presente estudio refuerzan la importancia del cultivo de la leche y de las pruebas de sensibilidad microbiana in vitro como respaldo para los tratamientos intramamarios en vacas con mastitis clínica. Los resultados permiten inferir también que la cefaperazona sódica, la gentamicina y el ciprofloxacino son eficaces para la cura clínica y bacteriológica de la mastitis clínica en vacas lactantes, tanto en un esquema de tratamiento convencional como en el tratamiento extendido siempre que se utilicen en combinación con exámenes de sensibilidad microbiana in vitro.O presente estudo avaliou a eficácia “in vivo” do tratamento intramamário, convencional e estendido, utilizando a cefoperazona sódica (250 mg), gentamicina (250 mg) e ciprofloxacino (100 mg) em casos de mastite clínica bovina. Foram utilizadas 30 vacas com mastite clínica, não sistêmica, distribuídas em três grupos de dez animais. O tratamento convencional da mastite consistiu em três aplicações do anti-mastítico, a cada 12 horas, e o tratamento estendido foi realizado com seis aplicações do anti-mastítico, a cada 12 horas. As vacas receberam tratamento intramamário, a cada 12 horas, com seis aplicações por animal, constituindo os seguintes momentos (M): M1 (dia zero – diagnóstico da mastite e início do tratamento), M2 (12 horas após M1), M3 (24 horas após M1), M4 (36 horas após M1), M5 (48 horas após M1) e M6 (60 horas após M1). Foi considerado, no mesmo animal, o tratamento convencional encerrado na terceira aplicação do antimicrobiano (M3) e o tratamento estendido ao final da sexta aplicação (M6). Os principais micro-organismos isolados das vacas com mastite foram Staphylococcus aureus, Staphylococus spp., Corynebacterium sp., Streptocccus spp., Streptococcus agalactiae e Escherichia coli. A cura clínica do tratamento convencional foi de 50% para o grupo tratado com cefoperazona sódica, 70% para o grupo tratado com gentamicina e 50% para o grupo tratado com ciprofloxacino. Para os mesmos grupos, a cura clínica do tratamento estendido foi 90%, 100% e 80%, respectivamente. A cura bacteriológica foi de 100% para o grupo tratado com cefoperazona sódica e de 90% para os grupos utilizando a gentamicina e ciprofloxacino no tratamento convencional. Para os mesmos grupos, foram observados 100% de cura bacteriológica para a gentamicina e 90% para os grupos com cefoperazona sódica e ciprofloxacino no tratamento estendido. Não foram encontradas diferenças entre cura clínica e cura bacteriológica dentro de cada grupo e entre os grupos de antimicrobianos, tampouco entre os tratamentos convencional e estendido dentro do mesmo grupo ou entre os grupos. Os resultados do presente estudo indicam a importância da lactocultura e do teste de sensibilidade microbiana “in vitro” como respaldo para os tratamentos intramamários de vacas com mastite clínica. Inferiu-se também a boa eficácia na cura clínica e bacteriológica da cefoperazona sódica, gentamicina e ciprofloxacino no tratamento da mastite clínica em vacas na lactação, de forma convencional ou estendida, contanto que respaldado na sensibilidade microbiana “in vitro”

Microbiologic characterization of equine mastitis

Mastitis occurrence in mares is low if compared to other livestock species. The microorganisms often isolated and detected in milk and mammary gland secretions of mares are Streptococcus beta-haemolytica, Staphylococcus spp., Pseudomonas aeruginosa, Actinobacillus spp., and enterobacter. The present experiment was designed to evaluate the main microorganisms present in the milk of healthy mares and having a mammary infection. One hundred and ten mammary glands from 55 lactating mares were analyzed, ranging from 15 to 150 d post-partum. The mastitis diagnostic was performed through analysis of the milk via the screened test of the mug with dark background (Tamis), mammary gland inflammation and/or systemic signs. The subclinical mammary gland infection was characterized via the California Mastitis Test (CMT). From the 55 lactating mares, 2 (3.64%) had clinical mastitis. Following the CMT, the mares presented: 13 (23.60%), 7 (12.72%), and 12 (21.88%) scores from 1+, 2+, and 3+, respectively. From the 110 mamary glands were analysed, in 47 (85.45%) of these samples strains of microorganisms were isolated. In summary, results from our experiment suggest a low occurrence of clinical mastitis in lactating mares