Mínima concentración de polietilenglicol 6000 para seleccionar in vitro plantas de Musa spp. tolerantes a estrés hídrico

Increasingly intense droughts are an abiotic factor which has affected bananas and plantains (Musa spp.) production, therefore it is necessary to obtain tolerant genotypes. Plants in vitro selection offers advantages over field selection as it saves time, resources and permit to work with larger plant volumes. Before to establish an in vitro selection protocol for drought, it is necessary first, to establish some conditions. The aim of this work was to determine the minimum polyethylene glycol 6000 concentration which morpho-physiological variables are affected in in vitro Musa spp. plants, 'Grande naine' (AAA) and 'Pelipita' (ABB) cultivars. In vitro plants were subjected to four polyethylene glycol 6000 concentrations (3, 5, 7 and 9%; w/v) in semisolid multiplication culture medium. Also it was taken into account a control treatment without polyethylene glycol 6000. As stress indicators, plant height, leaf area, fresh weight, dry weight and malondialdehyde content were evaluated. After 30 days of culture, all variables were significantly affected in 'Grande naine' cultivar from 3% polyethylene glycol 6000, whereas in 'Pelipita' cultivar the affections began to be significative from 5%. These results indicated that 'Pelipita' cultivar tolerated the stress better than 'Grande naine'. From this, using these two cultivars as reference standards, the minimum polyethylene glycol 6000 concentration to select in vitro Musa spp. plants, tolerant to water deficit, may be 3%. Keywords: drought, Grand naine, in vitro selection, PEG, PelipitaLas sequías cada vez más intensas son un factor abiótico que ha afectado la producción de plátanos y bananos (Musa spp.), por ello se hace necesaria la obtención de cultivares tolerantes. La selección in vitro de plantas ofrece ventajas sobre la selección en campo pues ahora tiempo, recursos y permite trabajar con mayores volúmenes de individuos. Para este tipo de selección es necesario establecer una serie de condiciones. El objetivo del presente trabajo fue determinar la mínima concentración de polietilenglicol 6000 a la cual se afectan variables morfo-fisiológicas en plantas in vitro de los cultivares de Musa spp. ‘Grande naine’ (AAA) y ‘Pelipita’ (ABB). Las plantas fueron sometidas a cuatro concentraciones de polietilenglicol 6000 (3, 5, 7 y 9%; m/v) en medio de cultivo semisólido de multiplicación, y un tratamiento control sin la presencia de esta sustancia. Como indicadores de estrés se evaluaron las variables altura de la planta, área foliar, masa fresca, masa seca y contenido de malondialdehído. A los 30 días de cultivo se afectaron significativamente para el cultivar ‘Grande naine’ todas las variables a partir de 3% de polietilenglicol 6000, mientras que para el cultivar ‘Pelipita’ las afectaciones comenzaron a ser significativas a partir del 5% de esta sustancia. Los resultados indicaron que el cultivar ‘Pelipita’ toleró mejor el estrés que el ‘Grande naine’, y que usando estos dos cultivares como patrones de referencia, la mínima concentración de polietilenglicol 6000 para seleccionar in vitro plantas de Musa spp. tolerantes al déficit hídrico, puede ser 3%. Palabras clave: Grande naine, PEG, Pelipita, selección in vitro, sequí

Evaluación de riesgos de la Transferencia Génica Horizontal en bacterias contaminantes de los cultivos in vitro de la caña de azúcar

The horizontal gene transfer is a phenomenon that must be taken into account when performing risk evaluation ofgeneticallymodifiedplants, becausetheseonescouldtransmit bythis methodtheartificially incorporated transgenes to other organisms with those they are in strait contact in the environment and affect them somehow. The aim of this study was to evaluate the risks of horizontal gene transfer in contaminant bacterial species of in vitro non-transgenic sugarcane cultivations (Saccharum spp. hybrid), which in some cases coincide with endophytic species and/or residents of the rhizosphere of transgenic plants. It was determined the capacity of natural transformation of fourteen bacterial strains with a plasmid containing genes that confer resistance to antibiotics Ampicillin, Streptomycin and Spectinomycin, used as a vector for plant genetic transformation, and from the calculationof transformation frequenciesofeach species the risks were assessed. Transformed and non transformed bacterias were obtained, the lowerfrequency was obtained for Escherichia coli (0.09 x 109) and the highest for Pseudomonas stutzeri (266.6 x 109). The fact that some of the studied bacterias were naturally transformable is a risk factor for them, and they can be used as a model to study horizontal gene transfer, in case to be found as endophytic or associated with the rhizosphere of plants that have been genetically modified when conducting risks assessments to such plants.Key words: Risks evaluation, Horizontal Gene TransferLa transferencia génica horizontal es un fenómeno que debe tenerse en cuenta al realizar las evaluaciones de riesgo en plantas genéticamente modificadas, ya que estas pudieran transmitir por esta vía los transgenes incorporados artificialmente a otros organismos con los que estén en estrecho contacto en el ambiente y afectarlos de alguna manera El objetivo del presente trabajo fue evaluar los riesgos de la transferencia génica horizontal en especies bacterianas contaminantes del cultivo in vitro de caña de azúcar (Saccharum spp. híbrido) no transgénica que en algunos casos coinciden con especies endofíticas y/o habitantes de la rizosfera (de plantas transgénicas). Se determinó la capacidad de transformación natural de catorce rPnas de bactpriaí con un plá=;mirlo que contenía genes que confieren reíiítencia a loí antibiótirní AmoiciNna EsS Sanas v*apartirdel calculeTd^as frecuencias dV^ansfo^ riesgo^Seobt^ Escherich%^ delasbacteriasestudiadas havan TE emolearse^ eZfíticas o asociadas a la hzL realizarla!levSSones d^tesg^adSs plantas  modincadas genéticamente.Palabras clave: Evaluación de riesgos, Transferencia Génica Horizonta

Formación de callos en Anthurium magnificum Linden

Anthurium magnificum Linden is a very popular ornamental plant due to its beautiful foliage. In this species, traditional propagation methods are not practical for its large-scale production, and there are no studies in the scientific literature on its in vitro culture. The objective of this work was to achieve the formation of callus in Anthurium magnificum Linden. For this, the effect of different concentrations of 2,4-D and two types of explant (leaf sections and petiole sections) was evaluated. The results showed that the highest percentages of callus formation were obtained in the petiole sections with 100% in all treatments. The foliar sections showed lower percentages of callus formation in relation to the petiole. The callus formed from both explants were translucent, with a watery appearance and a yellowish-white color, characteristics that are evidence of non-regenerable callus. However, plants were regenerated from callus formed from petioles sections. It was shown that it is possible to form callus in this species. In this sense, the highest percentage and growth of callus were reached when sections of petioles and 0.3 mg l-1 2,4-D in the culture medium were used. This research constitutes the first scientific report on the in vitro culture of this species.Anthurium magnificum Linden es una planta ornamental con gran popularidad debido a su hermoso follaje. En esta especie los métodos de propagación tradicionales no resultan prácticos para su producción a gran escala, y no se encuentran estudios en la literatura científica sobre su cultivo in vitro. Este trabajo tuvo como objetivo lograr la formación de callos en Anthurium magnificum Linden. Para ello, se evaluó el efecto de diferentes concentraciones de 2,4-D y dos tipos de explante (secciones foliares y secciones de pecíolos). Los resultados mostraron que los mayores porcentajes de formación de callos se obtuvieron en las secciones de pecíolos con un 100% en todos los tratamientos. Las secciones foliares mostraron menores porcentajes de formación de callos en relación con el pecíolo. Los callos formados a partir de ambos explantes fueron traslúcidos, de apariencia acuosa y coloración blanco-amarillenta, característica que son evidencia de callos no regenerables. No obstante, los callos formados a partir de secciones de pecíolos lograron regenerar plantas. Se demostró que es posible formar callos en esta especie. En este sentido, el mayor porcentaje y crecimiento de los callos se alcanzó cuando se emplearon secciones de pecíolos y 0.3 mg l-1 de 2,4-D en el medio de cultivo. Esta investigación constituye el primer informe científico sobre el cultivo in vitro de esta especie

Callus formation inAnthurium magnificum Linden

Anthurium magnificum Linden is a very popular ornamental plant due to its beautiful foliage.In this species, traditional propagation methods are not practical for its large-scale production,and there are no studies in the scientific literature on itsin vitro culture. The objective ofthis work was to achieve the formation of callus inAnthurium magnificum Linden. For this,the effect of different concentrations of 2,4-D and two types of explant (leaf sections andpetiole sections) was evaluated. The results showed that the highest percentages ofcallus formation were obtained in the petiole sections with 100% in all treatments. Thefoliar sections showed lower percentages of callus formation in relation to the petiole. Thecallus formed from both explants were translucent, with a watery appearance and ayellowish-white color, characteristics that are evidence of non-regenerable callus. However,plants were regenerated from callus formed from petioles sections. It was shown that it ispossible to form callus in this species. In this sense, the highest percentage and growth ofcallus were reached when sections of petioles and 0.3 mg l-1 2,4-D in the culture mediumwere used. This research constitutes the first scientific report on thein vitro culture ofthis specie

Respuesta de plantas in vitro de banano cv. `Grande naine' (Musa AAA) al estrés hídrico inducido con polietilenglicol

Bananas and plantains are grown in tropical and subtropical regions of the world. These plants required high humid conditions; therefore water deficit affects their growth and productivity. Through biotechnology, new drought tolerant genotypes could be obtained. These genotypes can be selected from in vitro culture by adding osmo-stressor agents to the media. The aim of this work was to determine the response of in vitro banana plants cv. `Grande naine' (Musa AAA) to water stress induced by polyethylene glycol. Morphological (height and number of shoots per explant), physiological (total chlorophyll and relative water chlorophyll contents) and biochemical (proline, malondialdehyde and hydrogen peroxide contents) traits of water stress were determined on stressed and unstressed plants. On stressed plants, a decrease in height and number of shoots per explant, and the increase in proline and malondialdehyde contents were observed. However, total chlorophyll, hydrogen peroxide and relative water contents were not affected. These findings showed that polyethylene glycol can be used as osmo-stress inducer for in vitro selection of drought tolerant banana plants.Los plátanos y bananos se cultivan en las regiones tropicales y subtropicales del mundo. Son cultivos que requieren altas condiciones de humedad, por lo que el déficit hídrico afecta su crecimiento y productividad. Mediante técnicas biotecnológicas se podrían obtener nuevos genotipos tolerantes a la sequía. Estos pueden ser seleccionados desde las fases de cultivo in vitro, con el uso de agentes osmo-estresantes incorporados en los medios de cultivo. El objetivo del presente trabajo fue determinar la respuesta de plantas in vitro de banano cv. `Grande naine' (Musa AAA) al estrés hídrico inducido con polietilenglicol. Se determinaron variables morfológicas (altura y número de brotes por planta), fisiológicas (contenido relativo de agua y contenido de clorofilas totales) y bioquímicas (contenido de prolina, malondialdehído y de peróxido de hidrógeno) en plantas sometidas al estrés y control. En las plantas sometidas a estrés se observó una disminución en la altura y el número de brotes, así como un aumento en el contenido de prolina y malondialdehído. El contenido relativo de agua, de clorofilas totales y de peróxido de hidrógeno no se vio afectado por el estrés. Teniendo en cuenta estos resultados, el uso del polietilenglicol 6000 como agente inductor de estrés hídrico, podría permitir la selección de plantas in vitro de banano cv. `Grande naine', tolerantes a la sequía. Palabras clave: malondialdehído,prolina, selección, sequí

Protocolo para la micropropagación de Anthurium cubense Engler a partir de semilla botánica

The popularity of Anthurium cubense, like pot plant, every day it is increased. Likewise, it has begun to extend the line of cultivated products for their employment as foliage. However, the traditional propagation of this plant does not satisfy the whole demand that exists in the market. It becomes indispensable the use of tissue culture to increase the number of propagate plants. In this work, it was developed a protocol for the in vitro propagation of this specie from botanical seeds.Keywords: anturio, in vitro propagation, tissue cultureLa popularidad del Anthuriumcubense, como planta de maceta, se incrementa cada día. Así mismo, se ha comenzado a extender la línea de productos cultivados para su empleo como follaje. Sin embargo, la propagación tradicional de esta planta no satisface toda la demanda que existe en el mercado. Se hace imprescindible el empleo del cultivo de tejidos para incrementar el número de plantas propagadas. En el presente trabajo se desarrolló un protocolo para la propagación in vitro de esta especie a partir de semilla botánica. Palabras clave: anturio, cultivo de tejidos, propagación in vitr

Efecto del estrés hídrico inducido con PEG 6000 sobre el contenido de agua de plantas in vitro de Musa spp. ‘Grande naine’ (AAA) y ‘Pelipita’ (ABB)

Bananas and bananas are grown in the tropical and subtropical regions of the world, by hence they are adapted to good humidity conditions. The productivity of these crops is affected by abiotic factors such as drought, which has increased in recent years due to the effects of climate change. In vitro selection of tolerant genotypes offers advantages over field selection as it saves time, resources and permit to work with larger plant volumes. The aim of this work was to determine the effect of in vitro water stress induced with polyethylene glycol 6000 (PEG 6000) on water content (WC) of Musa spp. ‘Grande naine’ (AAA) and ‘Pelipita’ (ABB) cultivars. In ‘Pelipita’ cultivar WC was not affected by PEG 6000 effect, but in ‘Grande naine’ this trait was significantly reduced in those plants under stress. Both, ‘Pelipita’ and ‘Grande naine’ cultivars differentially respond to water stress induced in vitro by PEG 6000 and could be used as reference in plants evaluation obtained by plant breeding for drought tolerance.Key words: banana, climate change, drought, in vitro selectionLos plátanos y bananos se desarrollan en las regiones tropicales y subtropicales del mundo, por lo que están adaptados a buenas condiciones de humedad. La productividad de estos cultivos es afectada por factores abióticos como la sequía, la cual se ha incrementado en los últimos años por los efectos del cambio climático. La selección in vitro de genotipos tolerantes ofrece ventajas sobre la selección en campo pues permite ahorrar tiempo, recursos y trabajar con mayores volúmenes de plantas. El objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto del estrés hídrico inducido in vitro con Polietilenglicol 6000 (PEG 6000), en el contenido de agua (CA) de plantas de los cultivares de Musa spp. ‘Grande naine’ (AAA) y ‘Pelipita’ (ABB). En el cultivar ‘Pelipita’ no se afectó el CA por el efecto del PEG 6000, en cambio, en el cultivar ‘Grande naine’ esta variable se redujo significativamente en aquellas plantas sometidas a estrés. Ambos cultivares respondieron de forma diferencial al estrés hídrico in vitro inducido con  PEG  6000  y  podrían  emplearse  como  referencia  en  la  evaluación  de  plantas  obtenidas  por mejoramiento genético con el propósito de lograr tolerancia a la sequía.Palabras clave: banano, cambio climático, selección in vitro, sequí

Protocol for in vitro propagation of Kalanchoe blossfeldiana Poelln. from nodal segments

Kalanchoe blossfeldiana Poelln. is a plant with great ornamental value due to its growth habit and flowering. It can be used as a pot plant and garden, both outdoors and indoors. It is considered the best-selling species after orchids in Europe and America, reaching high numbers of commercialized plants and monetary incomes. Due to their importance, methods for obtaining large numbers of individuals, in order to satisfy the existing demands on the market are necessary. This could be possible through the use of plant biotechnology. Although there are studies focused on the propagation of this species at the laboratory level, a methodology for its micropropagation has not been described yet. In the present work, a protocol for in vitro propagation of K. blossfeldiana from nodal segments was developed

Protocolo para la macropropagación de Kalanchoe blossfeldiana Poelln

Within the genus Kalanchoe Adans, the K. blossfeldiana Poelln species is the most popular for the beauty of its flowering. This constitutes one of the best known ornamental pot plants in the world, occupying one of the highest sales rates in Dutch auctions. Propagation in this species is carried out through traditional routes (seeds and cuttings) and tissue culture. In cut macropropagation it is recommended to use apical cuttings. However, to satisfy the high demand for this plant on the market, a macropropagation system is necessary that allows the use of various types of cuttings in unison in order to increase the number of explants to be used in each propagation cycle. In the present work, a protocol for the macropropagation of this species was developed from cuttings.Dentro del género Kalanchoe Adans, la especie K. blossfeldiana Poelln es la más popular por la belleza de su floración. Esta constituye una de las plantas ornamentales de macetas más conocidas en el mundo ocupando una de las tasas de venta más alta en subastas holandesas. La propagación en esta especie se realiza a través de vías tradicionales (semillas y esquejes) y cultivo de tejidos. En la macropropagación por esquejes se recomienda utilizar esquejes apicales. No obstante, para satisfacer la alta demanda de esta planta en el mercado se hace necesario un sistema de macropropagación que permita utilizar varios tipos de esquejes al unísono para así incrementar el número de explantes a utilizar en cada ciclo de propagación. En el presente trabajo se desarrolló un protocolo para la macropropagación de esta especie a partir de esquejes

Protocolo para la micropropagación de Kalanchoe blossfeldiana Poelln. a partir de segmentos nodales

Kalanchoe blossfeldiana Poelln. is a plant with great ornamental value due to its growth habit and flowering. It can be used as a pot plant and garden, both outdoors and indoors. It is considered the best-selling species after orchids in Europe and America, reaching high numbers of commercialized plants and monetary incomes. Due to their importance, methods for obtaining large numbers of individuals, in order to satisfy the existing demands on the market are necessary. This could be possible through the use of plant biotechnology. Although there are studies focused on the propagation of this species at the laboratory level, a methodology for its micropropagation has not been described yet. In the present work, a protocol for in vitro propagation of K. blossfeldiana from nodal segments was developed.Kalanchoe blossfeldiana Poelln. es una planta con gran valor ornamental por su hábito de crecimiento y floración. Puede ser usada como planta para macetas y jardín, tanto en exteriores como interiores. Se considera la especie más vendida después de las orquídeas en Europa y América donde alcanza altas cifras de plantas comercializadas y de recaudaciones monetarias. Por su importancia son necesarios métodos que permitan obtener grandes cantidades de individuos a fin de satisfacer las demandas existentes en el mercado. Lo anterior pudiera ser posible a través del empleo de la biotecnología vegetal. A pesar de que se encuentran trabajos enfocados en la propagación de esta especie a nivel de laboratorio, no ha sido descrito aun una metodología para su micropropagación. En el presente trabajo se desarrolló un protocolo para la propagación in vitro de K. blossfeldiana a partir de segmentos nodales