Set of Classical PCRs for Detection of Mutations in Candida glabrata FKS Genes Linked with Echinocandin Resistance

Clinical echinocandin resistance among Candida glabrata strains is increasing, especially in the United States. Antifungal susceptibility testing is considered mandatory to guide therapeutic decisions. However, these methodologies are not routinely performed in the hospital setting due to their complexity and the time needed to obtain reliable results. Echinocandin failure in C. glabrata is linked exclusively to Fks1p and Fks2p amino acid substitutions, and detection of such substitutions would serve as a surrogate marker to identify resistant isolates. In this work, we report an inexpensive, simple, and quick classical PCR set able to objectively detect the most common mechanisms of echinocandin resistance in C. glabrata within 4 h. The usefulness of this assay was assessed using a blind collection of 50 C. glabrata strains, including 16 FKS1 and/or FKS2 mutants.Fil: Dudiuk, Catiana Beatriz. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; ArgentinaFil: Gamarra, Maria Soledad. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; ArgentinaFil: Leonardelli, Florencia. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; ArgentinaFil: Jimenez Ortigoza, Cristina. State University of New Jersey; Estados UnidosFil: Vitale, Roxana Gabriela. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital General de Agudos ; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Afeltra, Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Perlin, David S.. State University of New Jersey; Estados UnidosFil: Garcia, Guillermo Manuel. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentin

In vitro activity of combinations of zinc chelators with amphotericin B and posaconazole against six Mucorales species

Mucormycosis is an emerging disease with high mortality rates. Few antifungal drugs are active against Mucorales. Considering the low efficacy of monotherapy, combination-therapy strategies have been described. It is known that fungi are susceptible to zinc deprivation, so we tested the in vitro effect of the zinc chelators clioquinol, phenanthroline, and N,N,N=,N=-tetrakis(2-pyridylmethyl)ethane-1,2-diamine combined with amphotericin B or posaconazole against 25 strains of Mucorales. Clioquinol-posaconazole was the most active combination, although results were strain dependent.Fil: Leonardelli, Florencia. Universidad Nacional del Litoral; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; ArgentinaFil: Macedo, Daiana. Universidad Nacional del Litoral; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; ArgentinaFil: Dudiuk, Catiana Beatriz. Universidad Nacional del Litoral; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; ArgentinaFil: Theill, Laura. Universidad Nacional del Litoral; ArgentinaFil: Cabeza, Matías Sebastián. Universidad Nacional del Litoral; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; ArgentinaFil: Gamarra, Soledad. Universidad Nacional del Litoral; ArgentinaFil: Garcia, Guillermo Manuel. Universidad Nacional del Litoral; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentin

Indigenous case of mycetoma by Actinomadura madurae in Paraná (Entre Ríos, Argentina): case report and literature review of the argentinian casuistry

El micetoma es una infección granulomatosa crónica que involucra tejidos cutáneos, subcutáneos y eventualmente músculo y hueso. Puede ser causada por bacterias Gram positivas filamentosas (actinomicetomas) o por hongos (eumicetomas). Es una infección endémica de zonas subtropicales con baja humedad relativa. El objetivo de este trabajo es el de presentar un caso de actinomicetoma causado por Actinomadura madurae autóctono de la ciudad de Paraná (Entre Ríos) con el fin de demostrar que pueden darse casos esporádicos por fuera de las zonas endémicas descritas. Además, se realizó una revisión bibliográfica de los casos de micetoma descritos en Argentina y se los comparó con el caso reportado.Mycetoma is a chronic granulomatous infection involving skin, subcutaneous tissue and eventualy muscle and bone. It can be caused by Gram positive filamentous bacteria (actinomycetomas) or fungi (eumicetomas). It is an endemic infection in subtropical areas with low relative humidity. The aim of this work is to present a case of actinomycetoma caused by Actinomadura madurae in a patient from Paraná city (Entre Rios) to demonstrate that sporadic mycetoma cases may occur outside the described endemic areas. In addition, a literature review of Argentinian mycetoma cases was performed.Fil: Dudiuk, Catiana Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Theill, L.. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Moyano, Susana. Laboratorio Privado Avenida. Paraná, Entre Ríos; ArgentinaFil: Barbagelata, María Sol. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Leonardelli, Florencia. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Unidad de Administración Territorial; ArgentinaFil: Macedo, Daiana. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Latorre Rapella, María Gabriela. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Acosta, A.. Laboratorio Privado Avenida. Paraná, Entre Ríos; ArgentinaFil: Gamarra, S.. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Garcia, Guillermo Manuel. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentin

Coinfección de SARS-CoV-2 y Aspergillus sección Fumigati en un paciente inmunocompetente tratado con corticosteroides

Background: Patients with severe viral pneumonia are likely to receive high-dose immunomodulatory drugs to prevent clinical worsening. Aspergillus species have been described as frequent secondary pneumonia agents in severely ill influenza patients receiving steroids. COVID-19 patients admitted to Intensive Care Unit (ICU) are receiving steroids as part of their treatment and they share clinical characteristics with other patients with severe viral pneumonias. COVID-19 patients receiving steroids should be considered a putative risk group of invasive aspergillosis. Case report: We are reporting a SARS-CoV-2/Aspergillus section Fumigati coinfection in an elderly intubated patient with a history of pulmonary embolism treated with corticosteroids. The diagnosis was made following the ad hoc definitions described for patients admitted to ICU with severe influenza, including clinical criteria (fever for 3 days refractory to the appropriate antibiotic therapy, dyspnea, pleural friction rub, worsening of respiratory status despite antibiotic therapy and need of ventilator support), a radiological criterion (pulmonary infiltrate) and a mycological criterion (several positive galactomannan tests on serum with ratio ≥0.5). In addition, Aspergillus section Fumigati DNA was found in serum and blood samples. These tests were positive 4 weeks after the patient was admitted to the ICU. The patient received voriconazole and after two month in ICU his respiratory status improved; he was discharged after 6 weeks of antifungal treatment. Conclusions: Severely ill COVID-19 patients would be considered a new aspergillosis risk group. Galactomannan and Aspergillus DNA detection would be useful methods for Aspergillus infection diagnosis as they allow avoiding the biosafety issues related to these patients.Antecedentes: Los pacientes con neumonía viral grave reciben altas dosis de fármacos inmunomoduladores para prevenir el empeoramiento clínico. Los pacientes con influenza grave que reciben esteroides tienen neumonías secundarias causadas por Aspergillus con una frecuencia relativamente alta. Los pacientes con COVID-19 ingresados en la unidad de cuidados intensivos (UCI) reciben dicha medicación como parte de su tratamiento, y comparten con otro tipo de pacientes muchas de las características clínicas de otras neumonías virales graves. Estos pacientes deberían considerarse como un grupo de riesgo de aspergilosis invasiva. Caso clínico: Se presenta un caso de coinfección por SARS-CoV-2 y Aspergillus de la sección Fumigati en un paciente intubado de edad avanzada con antecedentes de embolia pulmonar y tratado con corticosteroides. El diagnóstico siguió las definiciones ad hoc descritas para pacientes ingresados en la UCI con gripe grave. El paciente cumplía varios criterios clínicos (fiebre durante 3 días refractaria al tratamiento antibiótico apropiado, disnea, fricción pleural, empeoramiento del estado respiratorio a pesar del tratamiento antibiótico y la necesidad de soporte respiratorio), el criterio radiológico (infiltrado pulmonar) y un criterio micológico (test de galactomanano positivo en suero, (ratio ≥ 0,5). Además, se detectó ADN de Aspergillus de la sección Fumigati en muestras de suero y sangre del paciente. Estas pruebas fueron positivas 4 semanas después de que el paciente ingresara en la UCI. El paciente recibió tratamiento con voriconazol, y después de 2 meses en la UCI mejoró su estado pulmonar; fue dado de alta después de 6 semanas de tratamiento antifúngico. Conclusiones: Los pacientes gravemente enfermos con COVID-19 deberían considerarse un nuevo grupo de riesgo para la aspergilosis. La detección de galactomanano y ADN de Aspergillus son métodos útiles para el diagnóstico de infección por este hongo al evitar los problemas de bioseguridad en estos pacientesFil: Sasoni, Natalia. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; ArgentinaFil: Rodriguez Müller, Milton. Sanatorio Adventista del Plata; Argentina. Universidad Adventista del Plata. Facultad de Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Posse, Graciela Raquel. Sanatorio Adventista del Plata; Argentina. Universidad Adventista del Plata. Facultad de Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: González, Jorge. Sanatorio Adventista del Plata; ArgentinaFil: Leonardelli, Florencia. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; ArgentinaFil: Garcia, Guillermo Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentin

Emergence of Triazole Resistance in Aspergillus spp. in Latin America

Purpose of Review: Azole resistance in Aspergillus spp. is becoming a public health problem worldwide. However, data about this subject is lacking in Latin American countries. This review focuses in the epidemiology and molecular mechanisms of azole resistance in Aspergillus spp. emphasizing in Latin America. Data on Aspergillus fumigatus stands out because it is the most prevalent Aspergillus spp. pathogen. Recent Findings: Azole resistance in Aspergillus spp. emergence was linked with intensive use of these antifungals both in the clinical setting and in the environment (as pesticides). Reports on azole-resistant A. fumigatus strains are being constantly published in different countries. Molecular mechanisms of resistance mainly involve substitution in the azole target (CYP51A) and/or overexpression of this gene. However, several other non-CYP51A-related mechanisms were described. Moreover, intrinsically resistant cryptic Aspergillus species are starting to be reported as human pathogens. Summary: After a comprehensive literature review, it is clear that azole resistance in Aspergillus spp. is emerging in Latin America and perhaps it is underestimated. All the main molecular mechanisms of azole resistance were described in patients and/or environmental samples. Moreover, one of the molecular mechanisms was described only in South America. Cryptic intrinsic azole-resistant species are also described.Fil: Macedo, Daiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Leonardelli, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Gamarra, Soledad. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Garcia Effron, Guillermo. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentin

Aspergillus fumigatus intrinsic fluconazole resistance is due to the naturally occurring T301I substitution in Cyp51Ap

Aspergillus fumigatus intrinsic fluconazole resistance has been demonstrated to be linked to the CYP51A gene, although the precisemolecular mechanism has not been elucidated yet. Comparisons between A. fumigatus Cyp51Ap and Candida albicansErg11p sequences showed differences in amino acid residues already associated with fluconazole resistance in C. albicans. Theaim of this study was to analyze the role of natural polymorphism I301 in Aspergillus fumigatus Cyp51Ap in the intrinsic fluconazoleresistance phenotype of this pathogen. The I301 residue in A. fumigatus Cyp51Ap was replaced with a threonine (analogueto T315 at Candida albicans fluconazole-susceptible Erg11p) by changing one single nucleotide in CYP51A gene. Also, aCYP51A knockout strain was obtained using the same parental strain. Both mutants? antifungal susceptibilities were tested. TheI301T mutant exhibited a lower level of resistance to fluconazole (MIC, 20 g/ml) than the parental strain (MIC, 640 g/ml),while no changes in MIC were observed for other azole- and non-azole-based drugs. These data strongly implicate the A. fumigatusCyp51Ap I301 residue in the intrinsic resistance to fluconazole.Fil: Leonardelli, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Macedo, Daiana. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Dudiuk, Catiana Beatriz. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; ArgentinaFil: Cabeza, Matías Sebastián. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; ArgentinaFil: Gamarra, Maria Soledad. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: García-Effron, Guillermo. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentin

Molecular confirmation of the linkage between the rhizopus oryzae CYP51A gene coding region and its intrinsic voriconazole and fluconazole resistance

Rhizopus oryzae is the most prevalent causative agent of mucormycosis, an increasingly reported opportunistic fungal infection. These Mucorales are intrinsically resistant to Candida- and Aspergillus-active antifungal azole drugs, such as fluconazole (FLC) and voriconazole, respectively. Despite its importance, the molecular mechanisms of its intrinsic azole resistance have not been elucidated yet. The aim of this work was to establish if the Rhizopus oryzae CYP51 genes are uniquely responsible for intrinsic voriconazole and fluconazole resistance in these fungal pathogens. Two CYP51 genes were identified in the R. oryzae genome. We classified them as CYP51A and CYP51B based on their sequence similarity with other known fungal CYP51 genes. Later, we obtained a chimeric Aspergillus fumigatus strain harboring a functional R. oryzae CYP51A gene expressed under the regulation of the wild-type A. fumigatus CYP51A promoter and terminator. The mutant was selected after transformation by using a novel procedure taking advantage of the FLC hypersusceptibility of the A. fumigatus CYP51A deletion mutant used as the recipient strain. The azole susceptibility patterns of the A. fumigatus transformants harboring R. oryzae CYP51A mimicked exactly the azole susceptibility patterns of this mucormycete. The data presented in this work demonstrate that the R. oryzae CYP51A coding sequence is uniquely responsible for the R. oryzae azole susceptibility patterns.Fil: Macedo, Daiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Unidad de Administración Territorial; ArgentinaFil: Leonardelli, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Unidad de Administración Territorial; ArgentinaFil: Dudiuk, Catiana Beatriz. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Theill, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Unidad de Administración Territorial; ArgentinaFil: Cabeza, Matías Sebastián. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Gamarra, Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Unidad de Administración Territorial; ArgentinaFil: Garcia, Guillermo Manuel. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentin

Quick Detection of FKS1 Mutations Responsible for Clinical Echinocandin Resistance in Candida albicans

A rapid molecular-based assay for the detection of the Candida albicans FKS1 gene mutations responsible for resistance to echinocandin drugs was designed and evaluated. The assay consisted of a multiplexed PCR set of 5 tubes able to detect the most commonly described resistance mechanism, including FKS1 hot spot 1 and hot spot 2 mutations. The performance and specificity of the assay was evaluated using a double-blinded panel of 50 C. albicans strains. The assay showed a sensitivity of 96% and was able to detect all homozygous mutants included in the collection of strains, demonstrating that it is a robust, quick, and labor-saving method that is suitable for a routine clinical diagnostic laboratory.Fil: Dudiuk, Catiana Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnol.conicet - Santa Fe. Unidad de Adm.territorial; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Gamarra, Soledad. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Jimenez Ortigoza, Cristina. Public Health Research Institute. Rutgers Biomedical and Health Science; Estados UnidosFil: Leonardelli, Florencia. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; ArgentinaFil: Macedo, Daiana. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Perlin, David S.. Public Health Research Institute. Rutgers Biomedical and Health Science; Estados UnidosFil: Garcia, Guillermo Manuel. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentin

Molecular Confirmation of the Relationship between Candida guilliermondii Fks1p Naturally Occurring Amino Acid Substitutions and Its Intrinsic Reduced Echinocandin Susceptibility

C. guilliermondii shows intrinsic reduced echinocandin susceptibility. It harbors two polymorphisms (L633M and T634A) at the Fks1p hot-spot 1 region. Our objective was to confirm that C. guilliermondii´s reduced echinocandin susceptibility is due to those naturally occurring substitutions. We constructed a Saccharomyces cerevisiae mutant where a region of its FKS1 gene (including hot-spot 1) was replaced with that from C. guilliermondii The chimeric mutants showed 32-fold echinocandin MIC values increase confirming the hypothesis.Fil: Dudiuk, Catiana Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Macedo, Daiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Leonardelli, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Theill, Laura. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Cabeza, Matías Sebastián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Gamarra, Maria Soledad. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Garcia, Guillermo Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentin

Primer aislamiento clínico en Sudamérica de una cepa de Aspergillus fumigatus resistente a itraconazol con la sustitución G54E en Cyp51Ap

Background A 27-year-old male rural worker was admitted with a fungal keratitis due to an injury involving plant detritus. Materials and methods Specimens were collected for microscopy examination and culture. The isolate was identified by morphological and molecular criteria. Susceptibility testing was performed using CLSI methods. CYP51A gene was PCR amplified and sequenced. Results An Aspergillus fumigatus strain resistant to itraconazole (MIC > 8 μg/ml) was isolated. The isolate was susceptible to amphotericin B, posaconazole, voriconazole and caspofungin. CYP51A sequencing showed two mutations leading on the G54E substitution. The patient received natamycin as treatment. Conclusions This is the first report in South America of a clinical A. fumigatus strain carrying the substitution G54E at Cyp51Ap associated with itraconazole resistance. Considering the patient was azole-naive, this resistant isolate may have been acquired from the environment.Resumen Antecedentes Un trabajador rural de 27 años de edad fue hospitalizado con una queratitis fúngica debido a un traumatismo con un resto vegetal. Materiales y métodos Se tomaron las muestras para los exámenes de microscopía y cultivo. El aislamiento se identificó mediante criterios morfológicos y moleculares. Se realizaron pruebas de sensibilidad a los antifúngicos siguiendo el documento del CLSI. Se amplificó y secuenció el gen CYP51A de la cepa. Resultados Se aisló una cepa de Aspergillus fumigatus resistente a itraconazol (CIM > 8 μg/ml). El aislamiento resultó sensible a la anfotericina B, el posaconazol, el voriconazol y la caspofungina. La secuenciación del gen CYP51 reveló 2 mutaciones que generan la sustitución G54E. El paciente fue tratado con natamicina oftálmica. Conclusiones Este es el primer caso informado en Sudamérica de una cepa clínica de A. fumigatus con la sustitución G54E en el Cyp51Ap, asociada con resistencia al itraconazol. Teniendo en cuenta que el paciente no había recibido nunca antes tratamiento alguno con azoles, podría haber adquirido esta cepa resistente del ambiente.Fil: Leonardelli, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Theill, Laura. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Nardin, María Elena. Hospital “JM Cullen”; ArgentinaFil: Macedo, Daiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Dudiuk, Catiana Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Mendez, Emilce. Hospital “JM Cullen”; ArgentinaFil: Gamarra, Soledad. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Garcia, Guillermo Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentin