Efectos de la fracción hidrosoluble del petróleo sobre algunos aspectos de la biología y el metabolismo de <i>Macrobrachium borellii</i> (Crustacea: decapoda)

El impacto de los hidrocarburos (HC) de origen petrogénico en ecosistemas acuáticos puede afectar seriamente a la flora y fauna local. La fracción hidrosoluble del petróleo (WSF) es la responsable de los efectos tóxicos, sobre todo la fracción correspondiente a los HC aromáticos. Los organismos expuestos a concentraciones subletales de dichos compuestos pueden sufrir cambios fisiológicos, lo que resulta en un cambio neto de la energía disponible para el crecimiento y la reproducción. Es por ello que las medidas bioquímicas de respuestas biológicas subletales “biomarcador”, son particularmente valiosas para monitorear exposiciones a estos contaminantes. En este sentido, la franja costera sur del Río de La Plata es la región más contaminada del país por HC, debido a las actividades industriales y portuarias que operan en la zona, existiendo una marcada falta de información acerca de sus efectos en las especies de la comunidad. Para obtener información relevante, es preferible seleccionar organismos nativos; por tal motivo en este trabajo estudiamos los efectos toxicológicos del petróleo sobre un organismo acuático autóctono, el crustáceo decápodo Macrobrachium borellii. Se seleccionó este organismo debido a que es un representante de un nivel trófico elevado en la comunidad, a su proximidad taxonómica con otras especies de acuicultivo económicamente importantes, fácil de capturar y mantener en el laboratorio y principalmente, a que se disponía de información sobre su biología y bioquímica. El objetivo de este trabajo de tesis se focalizó en dos aspectos: por un lado, estudiar el efecto de la fracción hidrosoluble de HC del petróleo sobre diferentes parámetros biológicos, bioquímicos y biofísicos. Por otra parte, se pudo avanzar en el estudio del metabolismo de lípidos en muchos aspectos poco conocidos en los crustáceos en general, así como incursionar en su sistema de defensa antioxidante. Como generalmente los organismos acuáticos suelen presentar sensibilidad diferencial a los tóxicos de acuerdo al estadio del ciclo vital, los experimentos se realizaron en organismos adultos y embriones.Facultad de Ciencias Naturales y Muse

Los insectos nos cuentan sobre el estado de la calidad ambiental de los arroyos: el caso de la chinche de agua

Muchos de los arroyos que atraviesan la ciudad de La Plata y sus alrededores reciben descargas contaminantes con elevadas concentraciones de materia orgánica por vertidos domiciliarios sin tratamiento, provenientes de barrios que no cuentan con cloacas. Tal exceso de materia orgánica provoca en los organismos que se encargan de degradarla, como por ejemplo las bacterias, un aumento en su consumo de oxígeno. Como consecuencia disminuye la disponibilidad de oxígeno para otros organismos acuáticos provocando condiciones de estrés que producen un mayor gasto de energía para poder vivir. Algunos de ellos son más tolerantes, mientras que otros son más sensibles pudiendo llegar a desaparecer del ecosistema.Instituto de Limnología "Dr. Raúl A. Ringuelet

Sensitivity of embryos and larvae of the freshwater prawn Macrobrachium borellii to the latest generation pesticide spirotetramat

The aim of this study was to evaluate the effects of the last generation insecticide spirotetramat (STM) on embryos and larvae of the freshwater prawn Macrobrachium borellii. Both embryos and larvae were exposed to serial dilutions of STM to determine the LC₅₀ values. After 96-h of exposure, live larvae were fixed for histological analysis. In addition, ovigerous females were exposed to a sublethal concentration of STM (1.7 mg/L) for 96 h to evaluate the activity of the enzymes catalase, glutathione-S-transferase, and superoxide dismutase as well as the lipoperoxidation (LPO) and protein oxidation levels in embryos. The larvae showed a high sensitivity to STM evidenced by the LC₅₀-96 h value (0.011 mg/L). On the contrary, the embryos were highly resistant to STM exposure, and no lethal effect was observed in the treatments with high concentrations of this insecticide (LC₅₀-96 h > 150 mg/L). Among all the biochemical parameters evaluated in the embryos exposed to STM, only LPO showed a significant increase compared to controls. This was probably due to a restricted entry of the insecticide through the embryonic coat. Thus, a preliminary study of the structure and permeability of the embryonic coat was carried out in control embryos. The analysis by electron microscopy revealed that its structure is formed by four embryonic envelopes composed of multiple layers while the assay with a fluorescent probe revealed that the embryonic coat increases its permeability during development. STM caused significant histopathological alterations in the hepatopancreas and gills of larvae. This study showed that although the embryos of M. borellii could be protected by the embryonic coat, the larvae are very vulnerable to the STM toxicity. So, it is necessary to continue evaluating the effects of these new pesticides on non-target organisms, such as aquacultured species, to help predict their ecotoxicological risks derived from the increasing agricultural activity developed worldwide.Instituto de Limnología "Dr. Raúl A. Ringuelet

Efecto subletal del plaguicida spirotetramat sobre los lípidos totales del camarón de agua dulce Macrobrachium borellii

Para evaluar los riesgos ecotoxicológicos de los plaguicidas es necesario realizar ensayos en organismos sensibles. En este trabajo se estudió el efecto del plaguicida de nueva generación spirotetramat, un ácido tetrámico que inhibe la síntesis de lípidos, sobre el camarón Macrobrachium borellii. Los camarones fueron expuestos a concentraciones subletales del plaguicida spirotetramat (0,6 y 1,2 mg/L) durante 4 y 10 días. Para cada ensayo se agregó un grupo control. Los lípidos totales fueron extraídos y analizados. Se compararon las variaciones estacionales de invierno y verano con 4 días de exposición (1,2 mg/L) y no se observaron diferencias significativas entre los tratamientos (p&lt;0,05). Sin embargo, en el ensayo de 4 días realizado en invierno se observó una disminución de los lípidos entre los camarones expuestos a 0,6 mg/L con respecto al control (p&lt;0,05). Mientras que en el ensayo de 10 días se observó una tendencia al aumento en el contenido de lípidos en los camarones expuestos.Instituto de Limnología "Dr. Raúl A. Ringuelet

Evaluación de la sensibilidad del caracol manzana Pomacea canaliculata al plaguicida de última generación spirotetramat

El desarrollo de mecanismos de resistencia de los organismos plaga frente a los agrotóxicos ha incentivado el uso indiscriminado de los mismos provocando deterioro en los ecosistemas donde son aplicados. Esto ha llevado a la búsqueda de técnicas alternativas para el control de plagas como el uso de insecticidas de última generación, entre los cuales se destaca el spirotetramat. Este actúa inhibiendo la lipogénesis, afectando principalmente la reproducción y el crecimiento de los organismos. Debido a la escasa información disponible sobre el efecto de estos compuestos en especies no blanco, se calculó la sensibilidad del spirotetramat en el caracol de agua dulce Pomacea canaliculata. El valor de LC50 -96h fue 12,93 mg /l de STM. De acuerdo a este resultado P. canaliculata tendría una sensibilidad intermedia al plaguicida en relación a la de los organismos estudiados hasta el presente.Instituto de Limnología "Dr. Raúl A. Ringuelet

Characterization of Phenoloxidase Activity From Spider <i>Polybetes pythagoricus</i> Hemocyanin

Hemocyanin of the spider Polybetes pythagoricus, in addition to its typical role as an oxygen transporter, also exhibits a phenoloxidase activity induced by micellar concentrations of SDS. In the present work, we found the kinetic parameters Km and Vmax of Polybetes pythagoricus hemocyanin (PpHc) PO activity to be 0.407mM and 0.081 μmolmin⁻¹mg protein⁻¹, respectively. Dopamine was used as the substrate with SDS at a final concentration of 10mM and a 30-min incubation at 25°C. Conformational changes in Hc associated with the SDS treatment were analyzed using far-UV circular dichroism, intrinsic fluorescence and absorption spectroscopy. The secondary and tertiary structural changes of PpHc induced by SDS led to increases in α-helical content and tryptophan fluorescence intensity. A reduction in the absorption spectrum at 340 nm in the presence of SDS was also observed. These results suggest that the SDS-induced PO activity of PpHc can be ascribed to conformational changes in the local environment of the typer-3 copper active site.Facultad de Ciencias MédicasInstituto de Investigaciones Bioquímicas de La PlataFacultad de Ciencias ExactasLaboratorio de Investigación en Osteopatías y Metabolismo MineralFacultad de Ciencias Naturales y MuseoInstituto de Limnología "Dr. Raúl A. Ringuelet

Evaluación del efecto antioxidante de monoterpenos presentes en aceites esenciales y su potencial antiaterogénico

Las enfermedades cardiovasculares (ECV) constituyen la primera causa de mortalidad en la Argentina. Entre ellas, la aterosclerosis resulta de mayor impacto ya que ocasiona el 70% de las muertes por ECV y puede provocar desde edad temprana eventos mórbiles que generan discapacidad física. La ateroesclerosis es una enfermedad inflamatoria, multifactorial y progresiva producida por el depósito e infiltración de moléculas lipídicas en las paredes de las arterias. El alto contenido de colesterol asociado a lipoproteínas de baja densidad (LDL) favorece que éstas se infiltren en la pared vascular facilitando el inicio de la lesión aterosclerótica. Las LDL retenidas en los endotelios vasculares son per se un estímulo proinflamatorio, pero además pueden sufrir procesos oxidativos que incrementan su aterogenicidad.Facultad de Ciencias Médica

Evaluación del efecto antioxidante de monoterpenos presentes en aceites esenciales y su potencial antiaterogénico

Las enfermedades cardiovasculares (ECV) constituyen la primera causa de mortalidad en la Argentina. Entre ellas, la aterosclerosis resulta de mayor impacto ya que ocasiona el 70% de las muertes por ECV y puede provocar desde edad temprana eventos mórbiles que generan discapacidad física. La ateroesclerosis es una enfermedad inflamatoria, multifactorial y progresiva producida por el depósito e infiltración de moléculas lipídicas en las paredes de las arterias. El alto contenido de colesterol asociado a lipoproteínas de baja densidad (LDL) favorece que éstas se infiltren en la pared vascular facilitando el inicio de la lesión aterosclerótica. Las LDL retenidas en los endotelios vasculares son per se un estímulo proinflamatorio, pero además pueden sufrir procesos oxidativos que incrementan su aterogenicidad.Facultad de Ciencias Médica

SARS-CoV-2 diagnosis and viral load methods based on quantitative RT-PCR

En diciembre de 2019, se produjo un nuevo brote de enfermedad por coronavirus (COVID-19) en Wuhan, China. El síndrome respiratorio agudo severo-coronavirus-2 (SARS-CoV-2), que es el séptimo coronavirus conocido que infecta a los humanos, es altamente infeccioso y se ha expandido rápidamente en todo el mundo desde su descubrimiento. El diagnóstico de la infección por SARS-CoV-2 se basa en la detección del genoma viral (ARN) a través de técnicas de biología molecular. Con este fin, se extrae el ARN total para su posterior detección mediante PCR cuantitativa en tiempo real (RT-qPCR). Las pruebas cuantitativas de ácidos nucleicos se han convertido en el “estándar de oro” para el diagnóstico y guía en la toma de decisiones clínicas. Sin embargo, los ensayos de RT-qPCR dirigidos al SARS-CoV-2 tienen varios desafíos, especialmente en términos de diseño de cebadores / sondas y de desarrollo de metodologías que permitan estimar la carga viral en pacientes con diagnóstico de COVID-19.In December 2019, a new coronavirus disease (COVID-19) outbreak occurred in Wuhan, China. Severe acute respiratory syndrome-coronavirus-2 (SARS-CoV-2), which is the seventh coronavirus known to infect humans, is highly contagious and has rapidly expanded worldwide since its discovery. Quantitative nucleic acid testing has become the gold standard for diagnosis and guiding clinical decisions regarding the use of antiviral therapy. Total RNA is purified for subsequent SARS-CoV-2 detection by a real time quantitative RT-PCR (RT-qPCR). However, the RT-qPCR assays targeting SARS-CoV-2 have a number of challenges, especially in terms of primer / probe design and in the development of methodologies to estimate viral load in patients diagnosed with COVID-19.Este proyecto ha sido financiado por el Programa de Articulación y Fortalecimiento Federal de las Capacidades en Ciencia y Tecnología COVID-19 del Ministerio de Ciencia, Tecnología e Innovación de Argentina. (Proyecto BUE 21).Secretaría de Ciencia y Técnic

De novo assembly and transcriptome characterization of the freshwater prawn Palaemonetes argentinus: Implications for a detoxification response

Palaemonetes argentinus, an abundant freshwater prawn species in the northern and central region of Argentina, has been used as a bioindicator of environmental pollutants as it displays a very high sensitivity to pollutants exposure. Despite their extraordinary ecological relevance, a lack of genomic information has hindered a more thorough understanding of the molecular mechanisms potentially involved in detoxification processes of this species. Thus, transcriptomic profiling studies represent a promising approach to overcome the limitations imposed by the lack of extensive genomic resources for P. argentinus, and may improve the understanding of its physiological and molecular response triggered by pollutants. This work represents the first comprehensive transcriptome-based characterization of the non-model species P. argentinus to generate functional genomic annotations and provides valuable resources for future genetic studies. Trinity de novo assembly consisted of 24,738 transcripts with high representation of detoxification (phase I and II), anti-oxidation, osmoregulation pathways and DNA replication and bioenergetics. This crustacean transcriptome provides valuable molecular information about detoxification and biochemical processes that could be applied as biomarkers in further ecotoxicology studies.Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La PlataInstituto de Limnología "Dr. Raúl A. Ringuelet