Estudio de la interacción de <i>Bordetella pertussis</i> con células del hospedador : Mecanismos de inmunoevasión y persistencia intracelular

A modo de resumen, los estudios realizados para definir la relevancia de los rafts lipídicos en el proceso de adhesión de B. pertussis a células epiteliales están descritos en el Capítulo 2, estos estudios indican que B. pertussis se adhiere a dominios lipídicos en un proceso dependiente de FHA. En el Capítulo 3 se describen los estudios realizados para evaluar la capacidad de B. pertussis para invadir y sobrevivir en células epiteliales respiratorias y el rol de los rafts en este proceso. Los estudios indican que B. pertussis ingresa a las células epiteliales por un mecanismo dependiente de rafts lipídicos, microtúbulos y la activación de tirosin quinasas. Un porcentaje de bacterias es capaz de sobrevivir en localización intracelular lo que sugiere que la invasión de células epiteliales podría constituir un mecanismo de evasión de la respuesta inmune. En el Capítulo 4 se describen los estudios realizados para caracterizar la interacción de B. pertussis con neutrófilos humanos en presencia y en ausencia de anticuerpos opsonizantes y el rol de los rafts lipídicos en la evasión de la respuesta inmune. Los estudios indican que bajo condiciones no opsonizantes B. pertussis es capturada y fagocitada a través de dominios rafts lo que determina que la bacteria sea transportada a compartimientos no lisosomales donde evade la acción bactericida de estas células inmunes. Por el contrario, la fagocitosis mediada por anticuerpos conlleva a la inactivación de la bacteria en compartimientos lisosomales poniendo énfasis en la importancia de la presencia de anticuerpos opsonizantes en el sitio de infección. En el Capítulo 5 se describen estudios que evalúan el tráfico intracelular de B. pertussis luego de ser fagocitada por los macrófagos humanos así como los mecanismos de sobrevida a largo plazo. Los estudios indican que bajo condiciones no opsonizantes B. pertussis no sólo es capaz de sobrevivir por varios días dentro de los macrófagos sino que es capaz de replicar en compartimientos con características de endosomas tempranos. A su vez, estos estudios indican que la presencia de anticuerpos opsonizantes es fundamental para prevenir la replicación intracelular. En el Capítulo 6 se presenta la Discusión General de este trabajo. En un Anexo de esta Tesis se presentan los estudios realizados para evaluar el rol de la variación antigénica en Prn, único antígeno presente en las actuales formulaciones vacunales que induce la producción de anticuerpos opsonizantes, en la evasión de las cepas circulantes a la respuesta inmune inducida por vacunación.Facultad de Ciencias Exacta

Diseño de una propuesta pedagógica innovadora en el espacio de la formación práctica de las materias del Área Biotecnología de la carrera de Licenciatura en Biotecnología y Biología Molecular

El Área Biotecnología se encarga del dictado de varias materias de cuarto y quinto año de la carrera de Licenciatura en Biotecnología y Biología Molecular de la Facultad de Ciencias Exactas. Las asignaturas del Área abordan el estudio de los bioprocesos desde el punto de vista tecnológico, siendo de gran relevancia para la formación de un biotecnólogo. Pese a ser un área central en la Carrera, no sólo por sus contenidos, sino también porque recibe alumnos próximos a recibirse con un bagaje importante de conocimientos que pronto deberán aplicar en situaciones concretas durante el desarrollo de su profesión, la propuesta didáctica actual no contempla una participación activa de los estudiantes en la resolución de situaciones prácticas concretas que permitan integrar los contenidos aprendidos, siendo ésta una falencia importante del área que debe ser revisada. En este contexto, el presente Trabajo Final Integrador, propone hacer una reflexión crítica de nuestras prácticas docentes y presentar una propuesta pedagógica innovadora en el espacio de la formación práctica de las materias del área que promueva la articulación de los conocimientos y el protagonismo de los estudiantes. Se busca generar una propuesta superadora que promueva el pensamiento crítico y reflexivo de los estudiantes, la adquisición de autonomía para la resolución de situaciones concretas y que facilite el desarrollo de procesos de apropiación de los contenidos dictados.Facultad de Ciencias Exacta

Martín Isturiz

Semblanza de Martín Isturiz (fallecido en 2019), Doctor en Farmacia y Bioquímica de la UBA, Investigador Superior del CONICET, ex presidente de la Sociedad Argentina de Inmunología y de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.Cátedra Libre Ciencia, Política y Socieda

Martín Isturiz

Semblanza de Martín Isturiz (fallecido en 2019), Doctor en Farmacia y Bioquímica de la UBA, Investigador Superior del CONICET, ex presidente de la Sociedad Argentina de Inmunología y de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.Cátedra Libre Ciencia, Política y Socieda

Trabajos prácticos en la mira de los docentes: un proyecto de intervención académica

• Objetivo general: Promover mayor interés y compromiso de los alumnos en el aprendizaje de la materia Biotecnología I, a partir de la generación de situaciones didácticas significativas, que propicien la adquisición e integración de conocimientos, así como el desarrollo de habilidades de transferencia y uso de los mismos en situaciones concretas. • Objetivo específico: Implementar mejoras en el diseño de los trabajos experimentales que permitan a los alumnos tener un mayor nivel de participación y compromiso con la ejecución de los mismos.Eje 1: La enseñanza universitaria en el contexto actual: transformaciones y propuestas. Reflexiones y experiencias en la enseñanza de las Ciencias Exactas.Secretaría de Asuntos Académico

Trabajos prácticos en la mira de los docentes: un proyecto de intervención académica

• Objetivo general: Promover mayor interés y compromiso de los alumnos en el aprendizaje de la materia Biotecnología I, a partir de la generación de situaciones didácticas significativas, que propicien la adquisición e integración de conocimientos, así como el desarrollo de habilidades de transferencia y uso de los mismos en situaciones concretas. • Objetivo específico: Implementar mejoras en el diseño de los trabajos experimentales que permitan a los alumnos tener un mayor nivel de participación y compromiso con la ejecución de los mismos.Eje 1: La enseñanza universitaria en el contexto actual: transformaciones y propuestas. Reflexiones y experiencias en la enseñanza de las Ciencias Exactas.Secretaría de Asuntos Académico

Trabajos prácticos en la mira de los docentes: un proyecto de intervención académica

• Objetivo general: Promover mayor interés y compromiso de los alumnos en el aprendizaje de la materia Biotecnología I, a partir de la generación de situaciones didácticas significativas, que propicien la adquisición e integración de conocimientos, así como el desarrollo de habilidades de transferencia y uso de los mismos en situaciones concretas. • Objetivo específico: Implementar mejoras en el diseño de los trabajos experimentales que permitan a los alumnos tener un mayor nivel de participación y compromiso con la ejecución de los mismos.Eje 1: La enseñanza universitaria en el contexto actual: transformaciones y propuestas. Reflexiones y experiencias en la enseñanza de las Ciencias Exactas.Secretaría de Asuntos Académico

Bordetella pertussis entry into respiratory epithelial cells and intracellular survival

Bordetella pertussis is the causative agent of pertussis, aka whooping cough. Although generally considered an extracellular pathogen, this bacterium has been found inside respiratory epithelial cells, which might represent a survival strategy inside the host. Relatively little is known, however, about the mechanism of internalization and the fate of B. pertussis inside the epithelia. We show here that B. pertussis is able to enter those cells by a mechanism dependent on microtubule assembly, lipid raft integrity, and the activation of a tyrosine-kinase-mediated signaling. Once inside the cell, a significant proportion of the intracellular bacteria evade phagolysosomal fusion and remain viable in nonacidic lysosome-associated membrane-protein-1-negative compartments. In addition, intracellular B. pertussis was found able to repopulate the extracellular environment after complete elimination of the extracellular bacteria with polymyxin B. Taken together, these data suggest that B. pertussis is able to survive within respiratory epithelial cells and by this means potentially contribute to host immune system evasion.Centro de Investigacion y Desarrollo en Fermentaciones Industrial

Bordetella pertussis entry into respiratory epithelial cells and intracellular survival

Bordetella pertussis is the causative agent of pertussis, aka whooping cough. Although generally considered an extracellular pathogen, this bacterium has been found inside respiratory epithelial cells, which might represent a survival strategy inside the host. Relatively little is known, however, about the mechanism of internalization and the fate of B. pertussis inside the epithelia. We show here that B. pertussis is able to enter those cells by a mechanism dependent on microtubule assembly, lipid raft integrity, and the activation of a tyrosine-kinase-mediated signaling. Once inside the cell, a significant proportion of the intracellular bacteria evade phagolysosomal fusion and remain viable in nonacidic lysosome-associated membrane-protein-1-negative compartments. In addition, intracellular B. pertussis was found able to repopulate the extracellular environment after complete elimination of the extracellular bacteria with polymyxin B. Taken together, these data suggest that B. pertussis is able to survive within respiratory epithelial cells and by this means potentially contribute to host immune system evasion.Fil: Lamberti, Yanina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales; ArgentinaFil: Gorgojo, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales; ArgentinaFil: Massillo, Cintia Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales; ArgentinaFil: Rodriguez, Maria Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales; Argentin

Cholesterol-dependent attachment of human respiratory cells by Bordetella pertussis

Bordetella pertussis is a re-emerging human respiratory pathogen whose infectious process is not fully understood, hampering the design of effective vaccines. The nature of bacterial attachment to host cells is a key event in the outcome of the infection. However, host cell receptors involved in B. pertussis colonization of the respiratory tract are still under investigation. Here, we report that cholesterol-rich domains are involved in B. pertussis adhesion to epithelial cells. Treatment of A549 cells with cholesterol-sequestering drugs such as methyl-β-cyclodextrin, nystatin, or filipin resulted in a significant decrease of B. pertussis attachment. Confocal laser microscopy studies showed B. pertussis associated with cholesterol-rich domains. Accordingly, B. pertussis was found in detergent-resistant membrane domain fractions isolated from bacterial-infected A549 cells. Our results indicate a main role of filamentous hemagglutinin, an environmentally regulated virulence factor, in this interaction, and a specific affinity for cholesterol, one of the major components of traqueal secretions, which might additionally contribute to the effective colonization of the respiratory tract.Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriale