Potential of using cultivated dermal fibroblasts on the biodegradable polymeric matrices for treating skin damages in the experiment

ФИБРОБЛАСТЫЭКСПЕРИМЕНТЫ НА ЖИВОТНЫХБИОМЕДИЦИНСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯБИОДЕГРАДАЦИЯСОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ КЛЕТКИКРЫСЫ ЛИНИИ WISTARКОЖА /ПОВРЕЖДДЕКСТРАНА ФОСФАТПОЛИЛАКТИДРАНЫ ЗАЖИВЛЕНИЕКЛЕТОК ТРАНСПЛАНТАЦИЯКЛЕТОЧНАЯ ТЕРАПИЯЦель. Оценить возможность применения культивированных дермальных фибробластов на полимер- ных биодеградируемых матрицах для лечения повреждений кожного покрова в эксперименте. Материал и методы. Исследование выполнено на 90 крысах линии Wistar массой тела 180-200 г, с чистыми ранами диаметром 2,5 см. Было сформировано 6 групп – по животных в каждой. Культуру дер- мальных фибробластов выделяли из кожи новорожденных крыс; для накопления необходимой биомассы клеток проводили субпассирование. В 1 группе (контроль) клеточные биопрепараты не применялись. В группах 2-6 для лечения экспериментальных ран были использованы биодеградируемые матрицы (фосфат декстрана либо полилактид) как без клеточного биопрепарата, так и с содержанием культивированных фибробластов в количестве от 250?103 до 700?103 клеток на один раневой дефект. Выводы о влиянии дермаль- ных фибробластов на полимерных биодеградируемых матрицах на раневой процесс делали на основании сравнительного анализа результатов компьютерной планиметрии и морфологического исследования. Результаты. На всех этапах (7, 14, 21, 28 сутки) эксперимента минимальная скорость заживления была зарегистрированы в группе 1. Шестая группа, в которой в рану вносили полилактид, содержащий 700?103 клеток, характеризовалась максимальными – относительно остальных групп – значениями скоро- сти заживления. В микропрепаратах 6 группы на 21 сутки эксперимента отмечена полная эпителизация ра- невого дефекта. Выявлено наличие сильной прямой корреляционной связи между количеством трансплан- тированных клеток и скоростью заживления раневых дефектов на 7 сутки (?=0,923), 14 сутки (?=0,924), а также 21 сутки эксперимента (?=0,914). Заключение. В условиях эксперимента установлено, что локальное применение культивированных дермальных фибробластов на полимерных биодеградируемых матрицах (фосфат декстрана и полилактид) ведет к достоверному сокращению сроков эпителизации раневых дефектов.Objectives. To evaluate the possibility of using of cultivated dermal fibroblasts on the biodegradable polymeric matrices for treating skin damages in the experiment. Methods. The study was performed on 90 rats of Wistar line (180-200 g weight) with pure wounds (D-2,5cm). Six groups were formed, 15 animals per each group. The culture of dermal fibroblasts was isolated from the skin of newborn rats; to accumulate the required biomass of cells subpassage was carried out. The cellular biological products were not applied in group 1 (control). Biodegradable matrices (dextran phosphate or polylactide) were used for treating wounds in the groups 2-6 as matrices without cellular biological product and matrices with cultured fibroblasts (250?103 to 700?103 cells per wound). Conclusion about the impact of biodegradable polymeric matrices with dermal fibroblasts on the wound healing was made on the basis of a comparative analysis of the results of digital planimetry and morphological studies. Results. At all stages (7, 14, 21, 28 days) minimal rate of healing was registered in the first group. The sixth group, where polylactide containing 700?103 cells was added in the wound, is characterized by the biggest values of the healing rate – with respect to other groups. Complete epithelization of the wound defects in the micropreparations of the sixth group was marked by the 21st day of the experiment. The strong direct correlation between the number of transplanted cells and wound rate healing was detected on the 7th day (?=0,923), the 14th day (?=0,924), and the 21st day of the experiment (?=0,914). Conclusion. In the experiment it has been found out, that local application of the cultivated dermal fibroblasts on biodegradable polymer matrices (dextran phosphate and polylactide) results in a significant reduction of terms of the wound epithelization

РЕГУЛЯТОРНЫЕ СВОЙСТВА КВЕРЦЕТИНА В КУЛЬТУРАХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

The resistance to the oxidative stress, the proliferative activity, the immunophenotype stability, and the ability to differentiate in the adipogenic direction of MSCs from adipose tissue of rats after the incubation of cells in the presence of quercetin has been investigated. The cultivation of MSCs in the presence of 100 nM – 100 mM quercetin enhances the antioxidant defense system activity and the resistance of cells to the oxidative stress, decreases the intracellular ROS content (hydrogen peroxide), and inhibits the adipogenic differentiation of cells. At concentrations of 10–100 nM, polyphenol has a stimulating effect on the proliferative activity of MSCs and does not affect the immunophenotype of cells. At concentrations of 10–100 mM, quercetin decreases the proliferative activity of the cells and changes the expression of markers of multipotent MSCs CD29, CD44, and CD90.Приведено изучение устойчивости к окислительному стрессу, пролиферативной активности, стабильности иммунофенотипа и способности к дифференцировке в адипогенном направлении МСК ЖТ крыс в разные сроки после инкубации клеток в присутствии кверцетина в широком диапазоне его концентраций. Установлено, что культивирование МСК ЖТ в присутствии 100 нМ – 100 мкМ кверцетина увеличивает активность системы антиоксидантной защиты и устойчивость клеток к окислительному стрессу, снижает внутриклеточное содержание АФК (перекись водорода) и ингибирует дифференцировку клеток в адипогенном направлении. В концентрациях 10–100 нМ полифенол оказывает стимулирующее влияние на пролиферативную активность МСК ЖТ и не влияет на иммунофенотип клеток, при концентрациях 10–100 мкМ наблюдается снижение пролиферативной активности и изменение экспрессии маркеров мультипотентных МСК CD29, CD44 и CD90