Incidence of Mycotoxins (AFB1 and AFM1) in Feeds and Dairy Farms from Rio de Janeiro State, Brazil

Brazil has regions located at the largest dairy production and milk derivate industry concentration, supplying the major consumer markets, represented by São Paulo, Rio de Janeiro and Belo Horizonte Cities. The milk is the most important product of Brazilian agriculture, because it is always presents in daily diet. The aim of this research was evaluating the occurrence of mycotoxins in the feed of dairy cattle and the occurrence of AFM1 in milk under field conditions in farms from Rio de Janeiro State, Brazil. The results revealed that, total fungal counts was found in 67% of feed samples which exceeded the recommended limit recommended (1×104 UFC.g-1) and the incidence of AFM1 in all milk samples was 26.7% at concentrations ranging from 0.010 to 1.500 μg.L-1. The study revealed toxigenic fungi and their mycotoxins were present in feed intended for bovine feeding in Rio de Janeiro farms. Evaluations of mycotoxin levels are important to provide information so that the assessments of risk for animal feed and livestock environment can be done.Fil: Keller, Luiz Antonio Moura. Universidade Federal Fluminense; BrasilFil: Aronovich, Marcos. No especifíca;Fil: Keller, Kelly Moura. Universidade Federal de Minas Gerais; BrasilFil: Castagna, Antonio Airton. No especifíca;Fil: Cavaglieri, Lilia Reneé. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: da Rocha Rosa, Carlos Alberto. Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro; Brasi

Gliotoxin contamination in and pre- and postfermented corn, sorghum and wet brewer's grains silage in Sao Paulo and Rio de Janeiro State, Brazil

The aim of this study was to determine total fungal counts and the relative density of Aspergillus fumigatus and related species in silage samples intended for bovines before and after fermentation as well as to monitor the natural occurrence of gliotoxin in silage samples (pre- and postfermentation). Methods and methods: The survey was performed in farms located in São Paulo and Rio de Janeiro States in Brazil. In addition, the ability of A. fumigatus strains and related species strains to produce gliotoxin was also evaluated. A total of 300 samples were taken, immediately after opening of the silo (3-5 months) and during the ensiling period. Fungal counts were done by the surface-spread method. Gliotoxin production ability of isolates and natural contamination were determined by HPLC. Results: All postfermented samples had a total number of moulds exceeding 1 × 10 4 CFU g -1, with Aspergillus sp. as the most prevalent genus. Frequency of strains, among A. fumigatus and related species, was able to produce gliotoxin was similar in pre- and postfermented samples, except for sorghum, which showed differences between both kinds of samples. The highest toxin levels were produced by strains isolated from postfermented samples. More than 50% of the samples showed gliotoxin contamination levels that exceeded concentrations known to induce immunosuppressive and apoptotic effects in cells. Conclusions: The present data suggest that care should be taken because gliotoxin contamination in feedstuffs could affect productivity and also present a health risk for herds. Significance and Impact of the Study: Gliotoxin was found at quite important concentrations levels in pre- and postfermented substrates and its presence could therefore probably affect the productivity and health of herds. Current conservation and management practices do not avoid contamination with A. fumigatus on silage. Therefore, farm workers should be adequately protected during its handling. © 2012 The Authors. Journal of Applied Microbiology © 2012 The Society for Applied Microbiology.Fil: Keller, Luiz Antonio Moura. Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro; BrasilFil: Keller, Kelly Moura. Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro; BrasilFil: Monge, Maria del Pilar. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigación en Micología y Micotoxicología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación en Micología y Micotoxicología; ArgentinaFil: Pereyra, Carina Maricel. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Alonso, Veronica Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Cavaglieri, Lilia Reneé. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Chiacchiera, Stella Maris. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Instituto de Investigación en Micología y Micotoxicología. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación en Micología y Micotoxicología; ArgentinaFil: R Rosa, C. A.. Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro; Brasi

Efeitos do óleo de neem (azadirachta indica) sobre o crescimento in vitro e produção de ocratoxina a por cepas de aspergillus carbonarius

Aspergillus carbonarius é um fungo sapróbio, deteriorante de alimentos e potencialmente produtor da micotoxina ocratoxina A (OTA). Neste trabalho foi avaliada a atividade antifúngica do óleo de Neem, sobre o crescimento de seis cepas deste fungo e a produção de OTA. Foram testados quatro diferentes concentrações de óleo de Neem, além de três regimes de incubação. Dentre as quatro concentrações de óleo de Neem avaliadas, apenas a 0,3% inibiu completamente o crescimento do A. carbonarius em 98,4% ± 1,0, enquanto a utilização de 0,5% e 1,0% de óleo de Neem mostrou menor atividade antifúngica uma vez que estas concentrações inibiram apenas 41,1% ± 5,0 e 64,8% ± 4,5, respectivamente. Houve a completa inibição da produção de OTA com a adição de 0,1% e 0,3% de óleo de Neem para quatro cepas isoladas, em laboratório, a partir uvas; enquanto que as duas cepas de referência testadas produziram baixos níveis médios de OTA em 10 dias de incubação. O presente estudo mostra que a utilização de óleos essenciais de Neem como método auxiliar para a redução de crescimento micelial e produção de OTA é viável desde que utilizado em concentrações e por tempo adequados.Fil: Rodrigues, Mariana Paiva; . Universidade Federal de Minas GeraisFil: Salvato, Lauranne Alves. Universidade Federal de Minas GeraisFil: Keller, Kelly Moura. Universidade Federal de Minas Gerai

Effect of yeast cell wall on the performance of broiler chickens intoxicated with aflatoxin B1

Micotoxinas são metabólitos secundários produzidos por diversos fungos filamentosos, tóxicos à animais e ao homem por contato, inalação e principalmente ingestão. Aflatoxinas são micotoxinas hepatotóxicas e carcinogênicas, produzidas principalmente pelos fungos Aspergillus flavus e A. parasiticus, e sua presença constitui grande preocupação para a avicultura mundial por problemas como diminuição da produtividade das aves e lesões de carcaça. Adsorventes à base de parede celular da levedura Saccharomyces cerevisiae, possuem glucomananos esterificadas, e são capazes de ligar-se eficientemente a diversas micotoxinas, como aflatoxinas, fumonisinas e zearalenona.   O objetivo do presente estudo foi o de avaliar o desempenho de um aditivo anti-micotoxinas (AAM) à base de parede de leveduras (PCL), em condição de intoxicação experimental por aflatoxina B1 (AFB1) em frangos de corte até os 21 dias de idade.  A adição de 1,012 mg kg-1 (ppm) de AFB1 na dieta dos frangos de corte no presente estudo foi capaz de alterar negativamente o peso vivo, ganho de peso e conversão alimentar a partir dos 14 dias de idade, e nas mesmas condições experimentais a adição do AAM (0,2%) à base de PCL reverteu tais efeitos. Mais estudos devem ser realizados acerca do assunto para melhor esclarecer o mecanismo de ação destes aditivos na produção animal.Mycotoxins are secondary metabolites produced by several filamentous fungi, which are toxic to animals and humans by contact, inhalation and ingestion mainly. Aflatoxins are hepatotoxic and carcinogenic mycotoxins produced mainly by Aspergillus flavus and A. parasiticus. Its presence is of great concern to the poultry industry due to problems such as decreased productivity and damage to the poultry carcass. Adsorbents based on the yeast cell wall of Saccharomyces cerevisiae have esterified glucomannans, and are able to adsorb several mycotoxins such as aflatoxins, fumonisins and zearalenone. The aim of this study was to evaluate the effect of a yeast cell wall (anti-mycotoxin additive) on the performance of broiler chickens intoxicated with aflatoxin B1 (AFB1 ) until 21 days old. The addition of 1.01 mg kg-1 (ppm) of AFB1 in the diet of broilers in this study could affect negatively body weight, weight gain and feed consumption after 7 days old, and under the same experimental conditions the yeast cell wall (0.2%) used as an anti-mycotoxin additive reversed such effects. More studies should be conducted to better clarify the mechanism of action of these additives in animal production.Fil: Keller, Kelly Moura. Universidad Federal Rural de Rio de Janeiro; BrasilFil: Oliveira, A. A. Universidad Federal Rural de Rio de Janeiro; BrasilFil: Almeida, T. X.. Universidad Federal Rural de Rio de Janeiro; BrasilFil: Keller, Luiz Antonio Moura. Universidad Federal Rural de Rio de Janeiro; BrasilFil: Queiroz, B. D.. Universidad Federal Rural de Rio de Janeiro; BrasilFil: Nunes, L. M. T.. Universidad Federal Rural de Rio de Janeiro; BrasilFil: Cavaglieri, Lilia Reneé. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rosa, Carlos Alberto da Rocha. Universidad Federal Rural de Rio de Janeiro; Brasi

Adsorção in vitro de ocratoxina A por paredes celulares de levedura comercial

The aim of the present study was to evaluate the ochratoxin A (OTA) adsorption capacity by two kinds of commercial yeast cell walls (YCW1 and YCW2) used as dietary supplements. An in vitro test was designed to mimic the temperature (37ºC), pH (2) and passage time (30 min) through the stomach of a monogastric animal. The test was performed using different concentrations of YWC (100 and 200 µg/mL) and OTA (10; 80; 160 and 1000 ng/mL) and extracts were quantified by HPLC. For each OTA concentration, two independent trials varying the concentration of each YCW were performed. The two YCW assayed containing different percentages of polysaccharides, were able to adsorb similar amounts of OTA. Furthermore, the relationship mannans/β-glucans does not influence the rate of adsorption of OTA. In general, it was observed that the adsorption capacity increased with decreasing OTA concentration. Results from this work related to adsorption capacity of OTA with YCW allow predicting that other factor than 3D-structure and β-glucans and mannans could be involved. Future studies could be conducted to test the in vivo binding ability to alleviate the toxic effects of OTA under field conditions. Both YCW are a promising mycotoxin adsorbent to be used in animal feed to prevent mycotoxicoses.O objetivo do presente estudo foi avaliar a capacidade de adsorção de ocratoxina A (OTA) por duas paredes celulares de leveduras comerciais (PCL1 e PCL2) usadas como aditivos alimentares. Os ensaios in vitro foram desenvolvidos de modo a simular as condições de temperatura (37°C), pH (2) e o tempo de passagem (30 min.) do alimento pelo estômago de um animal monogástrico. Os ensaios foram executados usando diferentes concentrações das PCL (100 e 200 µg/mL) e OTA (10; 80; 160; e 1000 ng/mL) e os extratos foram quantificados por CLAE. Para cada concentração de OTA, dois ensaios independentes foram realizados variando-se a concentração de cada PCL. As duas PCL analisadas que continham diferentes percentuais de polissacarídeos foram capazes de adsorver similares quantidades de OTA. Além disso, a relação mananos/b-glucanos não influenciou na taxa de adsorção de OTA. Em geral, foi observado que a capacidade de adsorção aumentava com o decréscimo das concentrações de OTA. Os resultados deste trabalho sobre capacidade de adsorção de OTA por PCL permitem supor que algum outro fator possa estar envolvido além da estrutura 3D e dos b-glucanos e mananos. Estudos futuros podem ser desenvolvidos para testar in vivo esta capacidade adsortiva e então reduzir os efeitos tóxicos da OTA em desafios naturais a campo. Ambas as PCL são promissores adsorventes desta micotoxina podendo ser usadas na alimentação animal para prevenir esta micotoxicose.Fil: Pereyra, Carina Maricel. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cavaglieri, Lilia Reneé. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Keller, Kelly Moura. Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro; BrasilFil: Chiacchera, Stella Maris. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Química; ArgentinaFil: Rosa, Carlos Alberto da Rocha. Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro; BrasilFil: Dalcero, Ana Maria. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

In vitro activity of neem (Azadirachta indica) oil on growth and ochratoxin A production by Aspergillus carbonarius isolates

Aspergillus carbonarius is a saprobic filamentous fungus, food spoiling fungus and a producer of ochratoxin A (OTA) mycotoxin. In this study, the in vitro antifungal activity of neem oil (0.12% p/p of azadirachtin) was evaluated against the growth of six strains of A. carbonarius and the production of OTA. Four different concentrations of neem oil were tested in addition to three incubation times. Only the concentration of 0.3% of neem oil inhibited more than 95% of the strain’s growth (97.6% ± 0.5%), while the use of 0.5% and 1.0% of neem oil showed lower antifungal activity, 40.2% ± 3.1 and 64.7% ± 1.1, respectively. There was a complete inhibition of OTA production with 0.1% and 0.3% neem oil in the four strains isolated in the laboratory from grapes. The present study shows that neem essential oil can be further evaluated as an auxiliary method for the reduction of mycelial growth and OTA production.Fil: Rodrigues, Mariana Paiva. Universidade Federal de Minas Gerais; BrasilFil: Astoreca, Andrea Luciana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales; ArgentinaFil: De Oliveira, Águida Aparecida. Universidad Federal Rural de Rio de Janeiro; BrasilFil: Salvato, Lauranne Alves. Universidade Federal de Minas Gerais; BrasilFil: Biscoto, Gabriela Lago. Universidade Federal de Minas Gerais; BrasilFil: Keller, Luiz Antonio Moura. Universidade Federal Fluminense; BrasilFil: Rosa, Carlos Alberto da Rocha. Universidade Federal Do Rio de Janeiro. Instituto de Biología; BrasilFil: Cavaglieri, Lilia Reneé. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquimicas y Naturales. Departamento de Quimica. Area Fisicoquimica Organica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: De Azevedo, Maria Isabel. Universidade Federal de Minas Gerais; BrasilFil: Keller, Kelly Moura. Universidade Federal de Minas Gerais; Brasi

Fusarium verticillioides e seu potencial de produção de fumonisinas em farinha de milho

This study aimed to identify the presence of fungi of the genus Fusarium and to evaluate the presence of contamination of fumonisin in maize meal destined to human consumption in the city of Teresina, Piauí, Brazil. It was used 30 samples of maize meal of six different brands sold in supermarkets. Mycological evaluation was carried out immediately. Then aliquots were stored at - 4 °C for later analysis of fumonisins. It was obtained 34 isolates from Fusarium verticilloides. These isolates had the ability to produce fumonisins B1, B2 and B3, with values ranging from 48.2 to 1190.1 μg g-1 for B1; from 6.7 to 311.5 μg g-1 for B2; and from 23 to 667 μg g-1 for B3. The fumonisin concentrations for isolates ranged from 84.3 to 2168.6 μg g-1. All the samples presented fumonisins with values ranging from 0.10 to 2.13 μg g-1. Isolates from strains of F. verticillioides were obtained in the maize meal samples, and the lots examined had different levels of fumonisins, which may represent risks to consumers.Objetivou-se identificar a presença de fungos do gênero Fusarium e avaliar a presença quanto à contaminação de fumonisina em farinha de milho, destinados ao consumo humano na cidade de Teresina, Piauí, Brasil. Foram utilizadas 30 amostras de farinha de milho a partir de seis diferentes marcas comercializadas em supermercados. A avaliação micológica foi realizada imediatamente, e em seguida foram armazenadas a - 4 ºC, alíquotas, para posteriormente ser feita a análise de fumonisinas. Foram obtidos 34 isolados de Fusarium verticilloides. Esses isolados apresentaram capacidade de produzirem fumonisinas B1, B2 e B3, com valores que variaram de 48,2 para 1190,1 µg g-1 de B1; 6,7 para 311,5 µg g-1 de B2; e 23 para 667 µg g-1 de B3. As concentrações de fumonisinas por isolados variaram de 84,3 a 2168,6 µg g-1. Todas as amostras analisadas apresentaram fumonisinas, com valores que variaram de 0,10 a 2,13 µg g-1. Nas amostras de farinha de milho, foram obtidos isolados de F. verticillioides e os lotes analisados apresentaram diferentes níveis de fumonisinas e podendo representar riscos ao consumidor.Fil: das Chagas Cardoso Filho, Francisco. Universidade Federal do Piaui; BrasilFil: Keller, Kelly Moura. Universidade Federal de Minas Gerais; BrasilFil: Costa, Amilton Paulo Raposo. Universidade Federal do Piaui; BrasilFil: Gomes Pereira, Maria Marlucia. Universidade Federal do Piaui; BrasilFil: Ramirez, Maria Laura. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Muratori, Maria Christina Sanches. Universidade Federal do Piaui; Brasi

In Vitro Activity of Neem (<i>Azadirachta indica</i>) Oil on Growth and Ochratoxin A Production by <i>Aspergillus carbonarius</i> Isolates

Aspergillus carbonarius is a saprobic filamentous fungus, food spoiling fungus and a producer of ochratoxin A (OTA) mycotoxin. In this study, the in vitro antifungal activity of neem oil (0.12% p/p of azadirachtin) was evaluated against the growth of six strains of A. carbonarius and the production of OTA. Four different concentrations of neem oil were tested in addition to three incubation times. Only the concentration of 0.3% of neem oil inhibited more than 95% of the strain’s growth (97.6% ± 0.5%), while the use of 0.5% and 1.0% of neem oil showed lower antifungal activity, 40.2% ± 3.1 and 64.7% ± 1.1, respectively. There was a complete inhibition of OTA production with 0.1% and 0.3% neem oil in the four strains isolated in the laboratory from grapes. The present study shows that neem essential oil can be further evaluated as an auxiliary method for the reduction of mycelial growth and OTA production.Facultad de Ciencias ExactasCentro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriale

In Vitro Activity of Neem (<i>Azadirachta indica</i>) Oil on Growth and Ochratoxin A Production by <i>Aspergillus carbonarius</i> Isolates

Aspergillus carbonarius is a saprobic filamentous fungus, food spoiling fungus and a producer of ochratoxin A (OTA) mycotoxin. In this study, the in vitro antifungal activity of neem oil (0.12% p/p of azadirachtin) was evaluated against the growth of six strains of A. carbonarius and the production of OTA. Four different concentrations of neem oil were tested in addition to three incubation times. Only the concentration of 0.3% of neem oil inhibited more than 95% of the strain’s growth (97.6% ± 0.5%), while the use of 0.5% and 1.0% of neem oil showed lower antifungal activity, 40.2% ± 3.1 and 64.7% ± 1.1, respectively. There was a complete inhibition of OTA production with 0.1% and 0.3% neem oil in the four strains isolated in the laboratory from grapes. The present study shows that neem essential oil can be further evaluated as an auxiliary method for the reduction of mycelial growth and OTA production.Facultad de Ciencias ExactasCentro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriale

UTILIZAÇÃO DA OCITOCINA EM GADO GIROLANDO: AVALIAÇÃO DA VIA VAGINAL COMO ALTERNATIVA À VIA ENDOVENOSA

O objetivo deste trabalho foi testar a viabilidade da utilização da via vaginal em fêmeas bovinas visando à aplicação de ocitocina a partir de formulações específicas. A ocitocina foi utilizada associada a facilitadores de absorção e na forma injetável (para comparação). Foram produzidas sete formulações, todas com concentração de 5 UI/mL de ocitocina. O delineamento experimental foi em quadrado latino 8x8 (oito dias, oito tratamentos e oito novilhas ciclando). As administrações de ocitocina foram pela via vaginal e a ocitocina injetável pela via endovenosa, contendo 10 UI cada. Amostras de sangue (n=7) foram coletadas de cada animal, no tempo 0, anterior à administração dos tratamentos, e de três em três minutos até 18 minutos. A ocitocina foi extraída do plasma utilizando coluna cromatográfica C-18 e dosada utilizando o kit comercial Oxytocin EIA. Os resultados obtidos foram avaliados por análise estatística não paramétrica utilizando o teste Kruskal Wallis para comparação das médias. A concentração de ocitocina diferiu entre o tempo 0 e o tempo 12 minutos (p<0,05) para a formulação ocitocina em glicerina. Concluiu-se que houve absorção através da via vaginal para essa formulação. Mais estudos serão necessários para seu emprego no manejo com as fêmeas bovinas de forma efetiva.  Palavras-chave: vacas, produção de leite, ordenha, ejeção do leit