Resistance diagnostic of the vector Culex quinquefasciatus to the bioinsecticide Bacillus sphaericus

Made available in DSpace on 2012-05-07T14:44:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000037.pdf: 3432272 bytes, checksum: 6fd23c7e5c7e46be4206f493ddaa6998 (MD5) Previous issue date: 2008Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil.A eficácia e seletividade do Bacillus sphaericus (Bsp) para larvas do vetor Culex quinquefasciatus é devida à ligação específica da toxina binária (Bin), principal proteína inseticida do Bsp, a um receptor presente no epitélio intestinal das larvas, a glicosidase Cqm1. Um mecanismo de resistência descrito para este culicídeo é devido a uma deleção de 19 nucleotídeos (d19) no gene cqm1 (cqm1-d19) que, em homozigose, impede a expressão do receptor no epitélio. O objetivo deste trabalho foi determinar a freqüência do alelo cqm1-d19 em populações naturais de Cx. quinquefasciatus, não tratadas e tratadas com o Bsp, além de avaliar polimorfismos no gene cqm1. Uma análise in vivo da susceptibilidade ao Bsp em larvas de Cx. quinquefasciatus mostrou que as populações não tratadas de Varadouro, Peixinhos e Fazenda Nova apresentaram valores de razão de resistência (RR) de 1,3 a 4,0 vezes, enquanto que para a população tratada de Água Fria a RR variou de 2,7 a 8,6 vezes, em relação à população susceptível usada como controle. Os valores de RR inferiores a 10 indicaram que não houve alteração significativa na susceptibilidade. Os alelos cqm1 e cqm1- d19 foram identificados através de método diagnóstico de PCR utilizando primers que flanqueiam a d19 e as amostras das populações analisadas variaram entre 162 e 353 larvas. O alelo cqm1-d19 foi detectado pela primeira vez em populações naturais e sua freqüência em áreas não tratadas da Região Metropolitana do Recife (RMR) foi de 1,16 x 10-2 em Varadouro e de 7,8 x 10-3 em Peixinhos. Na população de Fazenda Nova, isolada geograficamente da RMR, o alelo não foi detectado. Em Água Fria, tratada com o Bsp desde 2003, as freqüências foram bem mais elevadas em relação às populações não tratadas: 6,94 e 5,55 x 10-2 após 13 e 24 tratamentos, respectivamente. Em paralelo à detecção do alelo foi feita a avaliação da freqüência de expressão da -glicosidase Cqm1, através de ensaios enzimáticos in gel, e os resultados corroboraram aqueles de freqüência alélica em todas as populações. A partir da análise de polimorfismos no gene cqm1 em 15 indivíduos de Água Fria, foram identificados 13 alelos, baseados em 13 alterações na seqüência de aminoácidos, a maioria na região C terminal. Dentre os alelos identificados, dois ocorreram em maior freqüência e os demais foram variações destes principais. Os resultados deste estudo mostraram que a freqüência do alelo cqm1-d19 é alta em populações naturais, e mais elevada naquelas que estão sob pressão de seleção, além de demonstrarem que o gene cqm1 é altamente polimórfico. As abordagens moleculares utilizadas neste estudo são mais sensíveis que os bioensaios, visto que foi possível detectar indivíduos heterozigotos e homozigotos resistentes, e são adequadas para avaliar a susceptibilidade de populações de Cx. quinquefasciatus ao Bsp. Estes dados reforçam a adoção de medidas visando o uso sustentável do biolarvicida Bsp em programas de controle de vetore

The Endless Challenges of Arboviral Diseases in Brazil

In this Editorial, we list and discuss some of the main challenges faced by the population and public health authorities in Brazil concerning arbovirus infections, including the occurrence of concurrent epidemics like the ongoing SARS-CoV-2/COVID-19 pandemic

A new allele conferring resistance to Lysinibacillus sphaericus is detected in low frequency in Culex quinquefasciatus field populations

Submitted by Adagilson Silva ([email protected]) on 2017-09-04T19:54:16Z No. of bitstreams: 1 26576515 2016 pai-ide.oa.pdf: 602511 bytes, checksum: a3bdfb10f98627983fa539648d310799 (MD5)Approved for entry into archive by Adagilson Silva ([email protected]) on 2017-09-05T18:53:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 26576515 2016 pai-ide.oa.pdf: 602511 bytes, checksum: a3bdfb10f98627983fa539648d310799 (MD5)Made available in DSpace on 2017-09-05T18:53:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 26576515 2016 pai-ide.oa.pdf: 602511 bytes, checksum: a3bdfb10f98627983fa539648d310799 (MD5) Previous issue date: 2016-02-04Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Recife, PE, BrasilThe Cqm1 α-glucosidase of Culex quinquefasciatus larvae acts as the midgut receptor for the binary toxin of the biolarvicide Lysinibacillus sphaericus. Mutations within the cqm1 gene can code for aberrant polypeptides that can no longer be properly expressed or bind to the toxin, leading to insect resistance. The cqm1 REC and cqm1 REC-2 alleles were identified in a laboratory selected colony and both displayed mutations that lead to equivalent phenotypes of refractoriness to L. sphaericus. cqm1 REC was first identified as the major resistance allele in this colony but it was subsequently replaced by cqm1 REC-2 , suggesting the better adaptive features of the second allele. The major aim of this study was to evaluate the occurrence of cqm1 REC-2 and track its origin in field populations where cqm1 REC was previously identified

Detection of an Allele Conferring Resistance to Bacillus sphaericus Binary Toxin in Culex quinquefasciatus Populations by Molecular Screening▿

The activity of the Bacillus sphaericus binary (Bin) toxin on Culex quinquefasciatus larvae depends on its specific binding to the Cqm1 receptor, a midgut membrane-bound α-glucosidase. A 19-nucleotide deletion in the cqm1 gene (cqm1REC) mediates high-level resistance to Bin toxin. Here, resistance in nontreated and B. sphaericus-treated field populations of C. quinquefasciatus was assessed through bioassays as well as a specific PCR assay designed to detect the cqm1REC allele in individual larvae. Resistance ratios at 90% lethal concentration, gathered through bioassays, were close to 1 and indicate that the selected populations had similar levels of susceptibility to B. sphaericus, comparable to that of a laboratory colony. A diagnostic PCR assay detected the cqm1REC allele in all populations investigated, and its frequency in two nontreated areas was 0.006 and 0.003, while the frequency in the B. sphaericus-treated population was significantly higher. Values of 0.053 and 0.055 were detected for two distinct sets of samples, and homozygote resistant larvae were found. Evaluation of Cqm1 expression in individual larvae through α-glucosidase assays corroborated the allelic frequency revealed by PCR. The data from this study indicate that the cqm1REC allele was present at a detectable frequency in nontreated populations, while the higher frequency in samples from the treated area is, perhaps, correlated with the exposure to B. sphaericus. This is the first report of the molecular detection of a biolarvicide resistance allele in mosquito populations, and it confirms that the PCR-based approach is suitable to track such alleles in target populations

Novel mutations associated with resistance to Bacillus sphaericus in a polymorphic region of the Culex quinquefasciatus cqm1 gene

Submitted by Kamylla Nascimento ([email protected]) on 2018-04-10T11:52:47Z No. of bitstreams: 1 Novel Mutations Associated with Resistance to Bacillus sphaericus in a.pdf: 338176 bytes, checksum: 9e301f894bd190598a46f77cc5bdebc7 (MD5)Approved for entry into archive by Kamylla Nascimento ([email protected]) on 2018-04-10T12:06:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Novel Mutations Associated with Resistance to Bacillus sphaericus in a.pdf: 338176 bytes, checksum: 9e301f894bd190598a46f77cc5bdebc7 (MD5)Made available in DSpace on 2018-04-10T12:06:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Novel Mutations Associated with Resistance to Bacillus sphaericus in a.pdf: 338176 bytes, checksum: 9e301f894bd190598a46f77cc5bdebc7 (MD5) Previous issue date: 2012Este trabalho foi apoiado pelo Programa Estratégico de Apoio à Pesquisa em Saúde (PAPES) da Fundação Oswaldo Cruz - FIOCRUZ, Conselho Nacional de Pesquisa (CNPq Brasil, bolsa 403488 / 2008-7 ;), Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco (FACEPE Brasil, outorga APQ 0427-2.13 / 08 ).Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de Entomologia. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de Entomologia. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de Entomologia. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de Entomologia. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de Entomologia. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de Entomologia. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de Microbiologia. Recife, PE, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Departamento de Entomologia. Recife, PE, Brasil.Bin toxin from Bacillus sphaericus acts on Culex quinquefasciatus larvae by binding to Cqm1 midgut-bound receptors, and disruption of the cqm1 gene is the major cause of resistance. The goal of this work was to screen for a laboratory-selected resistance cqm1(REC) allele in field populations in the city of Recife, Brazil, and to describe other resistance-associated polymorphisms in the cqm1 gene. The cqm1(REC) allele was detected in the four nontreated populations surveyed at frequencies from 0.001 to 0.017, and sequence analysis from these samples revealed a novel resistant allele (cqm1(REC-D16)) displaying a 16-nucletotide (nt) deletion which is distinct from the 19-nt deletion associated with cqm1(REC). Yet a third resistant allele (cqm1(REC-D25)), displaying a 25-nt deletion, was identified in samples from a treated area exposed to B. sphaericus. A comparison of the three deletion events revealed that all are located within the same 208-nt region amplified during the screening procedure. They also introduce equivalent frameshifts in the sequence and generate the same premature stop codon, leading to putative transcripts encoding truncated proteins which are unable to locate to the midgut epithelium. The populations analyzed in this study contained a variety of alleles with mutations disrupting the function of the corresponding Bin toxin receptor. Their locations reveal a hot spot that can be exploited to assess the resistance risk through DNA screening

Doença cística adventicial da artéria poplítea: relato de caso

Resumo A doença cística adventicial da artéria poplítea é uma doença pouco frequente, que deve ser considerada no diagnóstico diferencial de pacientes jovens com claudicação intermitente e sem fatores de risco para doença arterial periférica aterosclerótica. Apresentamos um caso de claudicação intermitente de membros inferiores em paciente masculino de 51 anos no qual essa doença foi diagnosticada. Foi submetido a ressecção do segmento de artéria comprometido e interposição de safena autóloga ipsilateral. Discutimos alternativas diagnósticas e terapêuticas

O uso do balão com paclitaxel no tratamento da reestenose intra-stent no segmento fêmoro-poplíteo

Resumo Contexto A reestenose intra-stent por hiperplasia miointimal pós-angioplastia é uma intercorrência frequente e que limita a perviedade do procedimento a longo prazo. A terapia com balões revestidos de droga com ação antiproliferativa pode ser uma alternativa no tratamento dessa complicação. Objetivos Demonstrar eficácia e as complicações (óbito, grandes amputações, etc.) do balão farmacológico no tratamento da reestenose intra-stent de segmento femoropoplíteo. Métodos Estudo de coorte retrospectivo de 32 pacientes consecutivos tratados entre os anos de 2012 e 2016, submetidos a terapia de reestenose intra-stent de segmento femoropoplíteo com angioplastia com balão farmacológico revestido com paclitaxel. A taxa de sucesso foi mensurada pela ocorrência de sucesso do procedimento e reestenose inferior a 50% em avaliação por eco-Doppler colorido 30, 90 e 180 dias após o procedimento. Resultados Quatro pacientes (12,5%) apresentaram reestenose superior a 50%, sendo um (3,1%) após 90 dias e três (9,4%) após 180 dias, conferindo uma taxa de sucesso de 87,5% ao procedimento. Após 180 dias, todos os pacientes referiam melhora ou cessação dos sinais e/ou sintomas apresentados antes do procedimento. Não houve óbitos, e complicações ocorreram apenas em dois casos, no pós-operatório imediato. Conclusões Os resultados a curto prazo da terapia com balão farmacológico são promissores, com redução na taxa de reestenose e baixo índice de complicações. Ainda precisam ser apresentados estudos demonstrando os efeitos a longo prazo dessa terapia, assim como seu impacto econômico quando comparada a outros procedimentos

Adventitial cystic disease of the popliteal artery: case report

<p></p><p>Abstract Adventitial cystic disease of the popliteal artery is an uncommon pathology that should be considered in differential diagnostic of younger patients with intermittent claudication and without risk factors for peripheral atherosclerotic arterial disease. We report the case of a 51 year-old male patient presenting with lower-limb intermittent claudication in whom this pathology was diagnosed and who was treated with segmental arterial resection and autologous saphenous vein interposition. We also discuss diagnostic and therapeutic alternatives.</p><p></p

Adventitial cystic disease of the popliteal artery: case report

<p></p><p>Abstract Adventitial cystic disease of the popliteal artery is an uncommon pathology that should be considered in differential diagnostic of younger patients with intermittent claudication and without risk factors for peripheral atherosclerotic arterial disease. We report the case of a 51 year-old male patient presenting with lower-limb intermittent claudication in whom this pathology was diagnosed and who was treated with segmental arterial resection and autologous saphenous vein interposition. We also discuss diagnostic and therapeutic alternatives.</p><p></p