28 research outputs found
Morfologia e sistemática das espécies do gênero Ophioscion Gill, 1864 do Atlântico Ocidental (persiformes, sciaenidae)
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Estudo da fosforilação e estrutura de filamentos intermediários em astrócitos permeabilizados com digitonina
O dinâmico processo de polimerização e despolimerização dos filamentos intermediários de astrócitos é modulado principalmente por fosforilação da proteína ácida fibrilar glial (GFAP). Os sítios de fosforilação da GFAP estão localizados na porção N-terminal, onde atuam proteínas quinases dependentes de AMPc e Ca2+. Este processo vem sendo investigado em fatias cerebrais, culturas de astrócitos, frações citoesqueléticas ou sistemas purificados. Neste trabalho estamos descrevendo uma nova técnica para o estudo do sistema fosforilante da GFAP que consiste na permeabilização de astrócitos em cultura com digitonina, Este modelo permite o acesso aos sítios intracelulares mantendo preservada, ainda que parcialmente, a compartimentalização celular. As condições de permeabilização foram estebelecidas com base na exclusão ao azul de Tripan. A incubação das células com AMPc e Ca2+ promoveram o aumento da fosforilação da GFAP, enquanto imunocitoquímica com anti-GFAP mostrou que em condições basais astrócitos permeabilizados mantém sua morfologia protoplasmática típica e apresenta a estrutura dos filamentos intermediários preservada. Ao incubar os astrócitos permeabilizados com AMPc estes filamentos aparentemente condensaram formando longos processos. Estes resultados sugerem que esta técnica tem potencial considerável para o estudo de alterações estruturais nos filamentos gliais em paralelo com a fosforilação de proteínas por permitir o uso de moduladores específicos de proteínas quinases e fosfatases
Morfologia e sistemática das espécies do gênero Ophioscion Gill, 1864 do Atlântico Ocidental (persiformes, sciaenidae)
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Efeito inibitório da S100b sobre a fosforilação da proteína ácida fibrilar glial em citoesqueleto de astrócitos em cultura
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Astrócitos permeabilizados com digitonina : avaliação da viabilidade funcional por quantificação protéica e imunocitoquímica
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Alterações morfológicas em cultura primária de astrócitos de hipocampo de ratos : possível envolvimento de uma Rho-GTPase
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Astrócitos permeabilizados com digitonina : avaliação da viabilidade funcional por quantificação protéica e imunocitoquímica
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Alterações morfológicas em cultura primária de astrócitos de hipocampo de ratos : possível envolvimento de uma Rho-GTPase
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