Biofilm formation of Brazilian meticillin-resistant Staphylococcus aureus strains: prevalence of biofilm determinants and clonal profiles

Biofilms plays an important role in medical-device-related infections. This study aimed to determine the factors that influence adherence and biofilm production, as well as the relationship between strong biofilm production and genetic determinants in clinical isolates of meticillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Fifteen strains carrying different chromosomal cassettes recovered from hospitalized patients were selected; five SCCmecII, five SCCmecIII and five SCCmecIV. The SCCmec type, agr group and the presence of the virulence genes (bbp, clfA, icaA, icaD, fnbB, bap, sasC and IS256) were assessed by PCR. PFGE and multilocus sequence typing (MLST) techniques were also performed. The initial adhesion and biofilm formation were examined by quantitative assays. The surface tension and hydrophobicity of the strains were measured by the contact angle technique to evaluate the association between these parameters and adhesion ability. SCCmecIII and IV strains were less hydrophilic, with a high value for the electron acceptor parameter and higher adhesion in comparison with SCCmecII strains. Only SCCmecIII strains could be characterized as strong biofilm producers. The PFGE showed five major pulsotypes (AE); however, biofilm production was related to the dissemination of one specific PFGE clone (C) belonging to MLST ST239 (Brazilian epidemic clonal complex). The genes agrI, fnbB and IS256 in SCCmecIII strains were considered as genetic determinants associated with strong biofilm-formation by an ica-independent biofilm pathway. This study contributes to the understanding of biofilm production as an aggravating factor potentially involved in the persistence and severity of infections caused by multidrug-resistant MRSA belonging to this genotype.We thank FAPEMIG (Fundação de Amparo à Pesquisa de Minas Gerais, proceeding APQ 01398-11) and CAPES (Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, PDSE proceeding 8952/11-6) for the financial support and scholarships. We also thank Dr Teruyo Ito, Juntendo University, Japan, and Dr Elsa Masae Mamizuka, Universidade de São Paulo, Brazil, for kindly providing the control strains used in this study.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Ocorrência de SCCmec tipo IV de Staphylococcus aureus em infecções comunitárias e hospitalares em um hospital universitário de Minas Gerais

Since the first MRSA(Methicillin resistant Staphylococcus aureus) report, this pathogen has spread in hospitals in different regions of the world and is currently regarded as the major nosocomial infections agent, causing benign infections, such as skin and soft tissue and serious, like pneumonia and sepsis. In early 80 s MRSA samples were isolated from community infections in individuals without the presence of risk factors (CA-MRSA - Community-acquired-Methicillin-resistant Staphylococcus aureus). During the last decade there was a CA-MRSA participation in hospital infections increase, especially in the U.S.. This study aimed to investigate CA-MRSA and HAMRSA (Hospital-acquired-Methicillin-resistant Staphylococcus aureus) samples in hospital and community infections, considering classical and molecular epidemiological aspects at the Hospital de Clinicas, Universidade Federal de Uberlândia (HC-UFU), from September 2006 to September 2008. S. aureus cultures were obtained from HCUFU laboratory, and those classified as non-multiresistant were tested for genotypic (Polimerase Chain Reaction, Pulsed Field Gel Electrophoresis e Multilocus Sequence Typing). In total, 206 MRSA samples were selected, with only 45 (21.8%) nonmultiresistant. After genotyping tests eight samples were identified as SCCmec (Staphylococcal Cassete Chromossome mec) IV, belonging to a single clone by PFGE technique, with six pulsotypes. Seven of them were ST (Sequence Typing) 5 (CC5) by MLST. Data indicate a low CA-MRSA prevalence (non MR - 21.8% SCCmecIV - 3.8%) then reported in the United States, isolated from patients with several kind of hospital infections and risk factors. Only one SCCmecIV sample, recovered from a child had community origin, corresponding to an otitis, also characterized as ST5 clone. SCCmecIV samples showed distinct resistance profile and susceptibility to trimethoprim-sulfamethoxazole in all of them. Evolution to death related to multidrug resistant organism infections and skin / soft tissue infection or hospitalization in pediatric units to non-multiresistant infection, were independent risk factors. Hospital mortality was 47.8% among multidrug-resistant MRSA and 26.6% among nonmultidrug- resistant samples. There were no deaths among patients infected with MRSA SCCmecIV. Epidemiological studies of different MRSA strains, in hospital or community, for the medical and hospital relevance, should be cause for public health services concern and additional investigations.Doutor em Imunologia e Parasitologia AplicadasDesde o primeiro relato de MRSA (―Methicillin resistant Staphylococcus aureus‖), este microrganismo se disseminou nos hospitais em diferentes regiões do mundo e, atualmente, é considerado como o principal agente de infecções hospitalares causando infecções benignas, como as de pele e tecido mole, e graves, como pneumonia e sepse. A partir da década de 80, amostras de MRSA / CA-MRSA (―Community-acquired-Methicillin-resistant Staphylococcus aureus‖) foram isoladas a partir infecções comunitárias em indivíduos sem a presença de fatores de risco. Na última década houve um aumento na participação destas amostras em infecções de natureza hospitalar, sobretudo nos EUA. Este estudo teve como objetivo investigar a ocorrência de amostras de CA-MRSA e HA-MRSA (―Hospital-acquired-Methicillin-resistant Staphylococcus aureus‖) associadas a infecções comunitárias e hospitalares considerando aspectos epidemiológicos clássicos e moleculares no Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia (HC-UFU), no período de Setembro de 2006 a Setembro de 2008. As culturas de S. aureus foram obtidas no laboratório de microbiologia clínica do HCUFU e, aquelas classificadas como não-multirresistentes foram submetidas aos testes genotípicos (―Polimerase Chain Reaction‖, ―Pulsed Field Gel Electrophoresis‖ e ―Multilocus Sequence Typing‖). No total, foram selecionadas 206 amostras de MRSA, com apenas 45 (21,8%) não-multirresistentes. Após a realização dos testes genotípicos oito amostras foram identificadas como SCCmec (―Staphylococcal Cassete Chromossome mec‖) IV pertencentes a um único clone pela técnica de PFGE, com seis pulsotipos, sendo sete identificadas como do clone ST (―Sequence Typing‖) 5 pelo MLST. Os dados obtidos revelaram uma prevalência de CA-MRSA inferior (não-multirresistente 21,8%, SCCmecIV 3,8%) à relatada nos Estados Unidos, com predomínio de um clone (CC5/ST5, PVL-) de HA-MRSA isolado de pacientes com diversos tipos de infecções hospitalares e fatores de risco. Em apenas uma criança foi recuperada uma amostra do tipo SCCmecIV de origem comunitária correspondente a um episódio de otite, também caracterizado como do clone ST5. As amostras SCCmecIV mostraram resistogramas distintos e 100% de susceptibilidade ao sulfametoxazol-trimetoprim. Foram fatores de risco independentes relacionados às infecções pelo microrganismo multirresistente evolução para óbito e relacionada a infecção pela amostra não-multirresistente infecção de pele e tecido mole e internação em unidades pediátricas. A mortalidade hospitalar no prazo de 30 dias foi de 47,8% de entre MRSA multirresistentes e 26,6% entre amostras não-multirresistentes. Não houve óbitos entre os pacientes infectados por MRSA SCCmecIV. A vigilância epidemiológica das diversas linhagens / clones de MRSA, hospitalares ou comunitárias, por sua importância médica e hospitalar, deve ser motivo de investigação preocupação pelos serviços de saúde pública

Investigação de Chlamydia psittaci em aves de estimação da cidade de Uberlândia, Minas Gerais, Brasil

A clamidiose é uma zoonose de importância na saúde pública e sua transmissão para humanos ocorre, principalmente, por meio do contato com aves de estimação. Esses animais ocupam o segundo lugar no ranking de animais de estimação no Brasil, onde a ocorrência da clamidiose é subestimada, apesar de estudos indicarem que a doença é endêmica no país. Diante disso, o presente trabalho teve como objetivo investigar a ocorrência de Chlamydia psittaci em 68 aves de estimação da espécie calopsita (Nymphicus hollandicus) da cidade de Uberlândia-MG. Foram coletadas amostras de coana, cloaca e amostras fecais frescas para a detecção da bactéria por meio do teste da PCR. A ocorrência encontrada foi nula. Este trabalho concluiu que a conscientização dos tutores e criadores quanto à adoção de medidas para a prevenção e controle dessa doença é importante, e que a orientação destes quanto aos riscos do uso indiscriminado de antimicrobianos é uma questão de saúde pública

Biological and Enzymatic Characterization of Proteases from Crude Venom of the Ant Odontomachus bauri

Hymenoptera venoms constitute an interesting source of natural toxins that may lead to the development of novel therapeutic agents. The present study investigated the enzymatic and biological characteristics of the crude venom of the ant Odontomachus bauri. Its crude venom presents several protein bands, with higher staining for six proteins with gelatinolytic activity (17, 20, 26, 29, 43 and 48 kDa). The crude venom showed high proteolytic activity on azocasein at optimal pH 8.0 and 37 °C. In the presence of protease inhibitors as aprotinin, leupeptin and EDTA, the azocaseinolytic activity was reduced by 45%, 29% and 9%, respectively, suggesting that the enzymes present in the crude venom belong to the three classes of proteases, with the serine proteases in greater intensity. The crude venom degraded the fibrinogen α-chain faster than the β-chain, while the fibrinogen γ-chain remained unchanged. In biological assays, O. bauri venom showed hemolytic and coagulant activity in vitro, and defibrinating activity in vivo. In addition, the venom showed antimicrobial activity against Staphylococcus aureus and Escherichia coli as well as antiparasitic activity on Toxoplasma gondii infection in vitro. In that sense, this study sheds perspectives for pharmacological applications of O. bauri venom enzymes