Electrochemical and mathematical study of interactions of selenite with biologically active thiols

Proteiny s thiolovými skupinami interagují s ionty kovů v organismu. Udržují jejich homeostázu, účastní se buněčné signalizace, chrání buňku před účinky toxických kovů a detoxikují je. Tato práce je zaměřena na proteiny s thiolovými skupinami glutathionu a metalothioneinu a jejich účinky na selen. Metoda studia je elektrochemická.Proteins with thiol groups interact with metal ions in the human body. They maintain their homeostasis, participate in cell signaling, protect the cell against the effects of toxic metals and detoxify them. This work is focused on proteins with thiol groups glutathione and metallothionein and their effects on selenium. The method of study is electrochemical.

Expression and functional activity of pro-oxidants and antioxidants in murine heart exposed to acute hypobaric hypoxia

AbstractUnder hypobaric hypoxia, antioxidant defenses of the heart are stressed by the enhanced production of ROS. Mammalian heart acclimatizes to hypoxia through altered gene expression, which we studied in murine heart exposed to 10h of acute hypobaric hypoxia (AHH), equivalent to 15000ft, using cDNA arrays. Functional classification of genes with a ⩾2-fold change revealed a number of pro-oxidants like Cyba, Xdh, Txnip, Ppp1r15b and antioxidants like Cat, Gpx1, Mt1, Mgst1. Interestingly, the protein level of Cyba, a subunit of NADPH oxidase, was markedly decreased in AHH exposed heart, suggesting the involvement of some stress response pathways. The AHH exposure also caused a significant reduction (50%) in the level of GSH (P<0.05). The present study provides a retrospective insight on the cellular antioxidant defense mechanisms under AHH

Clonaje, expresión y caracterización estructural de una nueva metalotioneína de crustáceos a partir de la langosta panulirus argus. Estudios de su función en la mitocondria

Las metalotieneinas constituyen una superfamilia de proteínas de bajo peso molecular (menos de 9 kg), ricas en residuos de cisteína, que le confieren una alta capacidad para enlazar iones metálicos. A pesar de que el primer miembro de esta gran familia fue descubierto en 1957, aun no se ha podido establecer con precisión el papel biológico de estas proteínas, existiendo muy pocos trabajos que hayan contribuido a esclarecer sus funciones invertebrados. El presente trabajo describe la caracterización de una nueva metalotioneina (mtpa) obtenida, por vía recombinante, a partir del hepatopáncreas de la langosta del Caribe panulirus argus. Mediante rt-pcr semicuantitativa se analiza la expresión de mtpa en hepatopancreas, intestino, tejido nervioso y musculo; detectándose mrna de mtpa en todos los tejidos examinados, aunque la mayor expresión se observa en el hepatopáncreas. Estos resultados demuestran por primera vez la expresión de mrna de metalotioneina en crustáceos, no solo en tejidos digestivos, sino también en musculo y tejido nervioso. Adicionalmente, se analiza la inducción por cd del mrna de mtpa en explantes de diferentes tejidos de la langosta, observándose el mayor nivel de inducción en el tejido nervioso. La secuencia aminoacidica de mtpa, deducida a partir del cdna obtenido, tiene 59 aminoácidos y presenta homología con el resto de las secuencias de metalotioneinas de crustáceos conocidas. Curiosamente, mtpa tiene una cisteina extra (19 en total) en la región correspondiente al dominio c-terminal, en comparación con la mayoría de las metalotioneinas de crustáceos, lo cual podría implicar una mayor capacidad para unir metales. Sin embargo, como se demuestra por 2 técnicas diferentes de análisis (esi-ms y txrf), esta profeina una 6 iones zn2+, al igual que las metalotioneinas de crustáceos que presentan 18 cisteínas. Por homología con las estructuras de los dominios c-terminal de mt-1 de calinectes sapidus (1dmc) y de la mt de homarus americanus (1j5l), se muestra un modelo preliminar de la estructura tridimensional del dominio c-terminal de mtpa, en el cual la cisteina extra estaria orientada hacia el exterior y por tanto no formaría parte del "cluster" zn-s. Por otro lado, mtpa-zn2+6 inhibe la cadena de transporte electrónico mitocondrial y, como consecuencia, aumenta los niveles intramitocondriales de ros, mientras que tpa tiene un efecto contrario. A pesar de esto, mtpa ejerce un efecto protector contra el estrés oxidativo, ya que la estimulación de la producción de ros por esta proteína, es mucho menor en comparación con la provocada por cantidades equivalentes de zn2+ libre. El hecho de que mtpa afecta al consumo de oxigeno mitocondrial es hepatopancreas de crustáceos constituye el primer estudio de este tipo en invertebrados y concuerda con otros resultados descritos en la literatura para mamíferos, que sugieren una relación de las metalotioneinas con el metabolismo energético