ЭКСТРАКЦИОННО-ФЛУОРИМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОДЕИНА В МОЧЕ ЧЕЛОВЕКА

For the extraction-fluorimetric determination of nanogram amounts of codeine in human urine the use of the fluorescence of the toluene extract of the codeine ionic associate with eosin was proposed. The formed ionic associate was characterized by the intensive fluorescence with a maximum of 550 nm. It was shown that the fluorescence intensity of the codeine ion associate with eosin in toluene was 10 times higher than the intensity of its luminescence in carbon tetrachloride, and 3 times higher than its intensity in chloroform. The optimal conditions for the formation of the fluorescent ion associate of the positively charged codeine ion with a negatively charged form of eosin were determined. The maximum fluorescence intensity of the ion associate was observed during the toluene extraction from the aqueous solutions with pH of 6 - 8 and the eosin concentration in the range of 1·10-5-1·10-3 mol·L-1. The fluorescence intensity of the extract was maintained at the initial level for 24 hours. The extraction-fluorometric procedure for determining the nanogram amounts of codeine in human urine was developed. The limit of detection of codeine, calculated by 3s-criterion, was equal to 6 ng·ml-1. The calibration curve linearity was maintained in the range of 30 – 320 ng·ml-1. The procedure for the determination of codeine in real expert samples of urine was tested. The relative standard deviation did not exceed 0.08. The obtained results for the extraction-fluorimetric determination of codeine in human urine allowed recommending the developed procedure for its use in the solutions of certain tasks in the practice of the institutions of the corresponding profile.Keywords: Сodeine, determination, human urine, extraction, fluorescence(Russian)DOI: http://dx.doi.org/10.15826/analitika.2017.21.4.006S.I. Metelitsa1, E.V. Kireeva1, V.V. Nemikhin2, S.V. Kachin1, V.N. Losev1, S.A. Sagalakov1 1Siberian Federal University, Svobodnyi pr., 79, Krasnoyarsk, 660041,Russian Federation2Krasnoyarsk Regional Bureau of Forensic Medical Examination, Mira pr., 35, Krasnoyarsk, 660049, Russian FederationДля экстракционно-флуориметрического определения нанограммовых содержаний кодеина в моче человека предложено использование флуоресценции толуольного экстракта ионного ассоциата кодеина с эозином. Образующийся ионный ассоциат характеризуется интенсивной флуоресценцией с максимумом при 550 нм. Показано, что интенсивность флуоресценции ионного ассоциата кодеина с эозином в толуоле в 10 раз выше интенсивности его свечения в четыреххлористом углероде и в 3 раза – в хлороформе. Определены оптимальные условия образования флуоресцирующего ионного ассоциата положительно заряженного иона кодеина с отрицательно заряженной формой эозина. Максимальная интенсивность флуоресценции ионного ассоциата наблюдается при его экстракции толуолом из водных растворов с рН = 6-8 и концентрации эозина в диапазоне 1·10-5-1·10-3 М. Интенсивность флуоресценции экстракта сохраняется в течение 24 часов. Разработана методика экстракционно-флуориметрического определения нанограммовых содержаний кодеина в моче человека. Предел обнаружения кодеина, рассчитанный по 3s-критерию, равен 6 нг/мл. Линейность градуировочной зависимости сохраняется в диапазоне 30 – 320 нг/мл. Методика апробирована при определении содержания кодеина в экспертных образцах мочи человека. Относительное стандартное отклонение при определении более 50 нг/мл кодеина не превышает 0.08. Полученные результаты экстракционно-флуориметрического определения кодеина в моче человека позволяют рекомендовать разработанную методику при решении определенных задач в практике учреждений соответствующего профиля.Ключевые слова: кодеин, определение, моча человека, экстракция, флуориметрияDOI: http://dx.doi.org/10.15826/analitika.2017.21.4.00

Extraction-fluorimetric determination of codeine in human urine

For the extraction-fluorimetric determination of nanogram amounts of codeine in human urine the use of the fluorescence of the toluene extract of the codeine ionic associate with eosin was proposed. The formed ionic associate was characterized by the intensive fluorescence with a maximum of 550 nm. It was shown that the fluorescence intensity of the codeine ion associate with eosin in toluene was 10 times higher than the intensity of its luminescence in carbon tetrachloride, and 3 times higher than its intensity in chloroform. The optimal conditions for the formation of the fluorescent ion associate of the positively charged codeine ion with a negatively charged form of eosin were determined. The maximum fluorescence intensity of the ion associate was observed during the toluene extraction from the aqueous solutions with pH of 6 - 8 and the eosin concentration in the range of 1·10-5-1·10-3 mol·L-1. The fluorescence intensity of the extract was maintained at the initial level for 24 hours. The extraction-fluorometric procedure for determining the nanogram amounts of codeine in human urine was developed. The limit of detection of codeine, calculated by 3s-criterion, was equal to 6 ng·ml-1. The calibration curve linearity was maintained in the range of 30 – 320 ng·ml-1. The procedure for the determination of codeine in real expert samples of urine was tested. The relative standard deviation did not exceed 0.08. The obtained results for the extraction-fluorimetric determination of codeine in human urine allowed recommending the developed procedure for its use in the solutions of certain tasks in the practice of the institutions of the corresponding profile.Для экстракционно-флуориметрического определения нанограммовых содержаний кодеина в моче человека предложено использование флуоресценции толуольного экстракта ионного ассоциата кодеина с эозином. Образующийся ионный ассоциат характеризуется интенсивной флуоресценцией с максимумом при 550 нм. Показано, что интенсивность флуоресценции ионного ассоциата кодеина с эозином в толуоле в 10 раз выше интенсивности его свечения в четыреххлористом углероде и в 3 раза – в хлороформе. Определены оптимальные условия образования флуоресцирующего ионного ассоциата положительно заряженного иона кодеина с отрицательно заряженной формой эозина. Максимальная интенсивность флуоресценции ионного ассоциата наблюдается при его экстракции толуолом из водных растворов с рН = 6-8 и концентрации эозина в диапазоне 1·10-5-1·10-3 М. Интенсивность флуоресценции экстракта сохраняется в течение 24 часов. Разработана методика экстракционно-флуориметрического определения нанограммовых содержаний кодеина в моче человека. Предел обнаружения кодеина, рассчитанный по 3s-критерию, равен 6 нг/мл. Линейность градуировочной зависимости сохраняется в диапазоне 30 – 320 нг/мл. Методика апробирована при определении содержания кодеина в экспертных образцах мочи человека. Относительное стандартное отклонение при определении более 50 нг/мл кодеина не превышает 0.08. Полученные результаты экстракционно-флуориметрического определения кодеина в моче человека позволяют рекомендовать разработанную методику при решении определенных задач в практике учреждений соответствующего профиля

Получение и свойства микрочастиц поли(3-гидроксибутирата-со‑3- гидроксивалерата), нагруженных рифампицином

In this work, polyhydroxyalkanoates-based microparticles containing antibacterial drug rifampicin were obtained. The main characteristics of the microparticles were investigated: the particles yield, encapsulation efficiency and drug loading, average radius, surface morphology, polydispersity index, zeta potential and cytotoxicity towards HeLa cells. Loading of RIF into microparticles leads to the substantial decrease of its cytotoxicityВ настоящей р аботе о писан п роцесс п олучения м икрочастиц п оли(3-гидроксибутирата-со‑3- гидроксивалерата), содержащих антибактериальный препарат рифампицин. Определены основные параметры процесса получения и свойства микрочастиц: выход, эффективность инкапсулирования и включение препарата, средние размеры, морфология поверхности, индексы полидисперсности, дзета-потенциал, цитотоксичность в модельной культуре клеток HeLa. Установлено, что цитотоксичность полученной системы существенно ниже таковой для чистого РИ

Study of Spectroluminescent Properties of Codeine For it’s Determination in Some Drugs

Определены оптимальные условия люминесценции растворов кодеина: 0,1 н H 2 SO 4 , λ возб =300 нм, λ люм = 345 нм. Разработана люминесцентная методика его определения в диапазоне содержаний 25–1000 мкг/мл. Предел обнаружения кодеина составляет 3 мкг/мл, относительное стандартное отклонение не превышает 0,05. Методика апробирована при определении содержания кодеина в образцах лекарственных препаратов «Седальгин – Нео, «Пенталгин-Н, «Пенталгин Плюс с использованием тонкослойной хроматографии и метода добавок. Полученные результаты люминесцентного определения кодеина в лекарственных препаратах позволяют рекомендовать разработанную методику для ее использования в практике экспертных учреждений.The optimal conditions of the codeine solutions luminescence were determined: 0.1 N H 2 SO 4 , λ ex = 300 нм, λ lum = 345 нм. The luminescence procedure of i

Study of Spectroluminescent Properties of Codeine For it’s Determination in Some Drugs

Определены оптимальные условия люминесценции растворов кодеина: 0,1 н H 2 SO 4 , λ возб =300 нм, λ люм = 345 нм. Разработана люминесцентная методика его определения в диапазоне содержаний 25–1000 мкг/мл. Предел обнаружения кодеина составляет 3 мкг/мл, относительное стандартное отклонение не превышает 0,05. Методика апробирована при определении содержания кодеина в образцах лекарственных препаратов «Седальгин – Нео, «Пенталгин-Н, «Пенталгин Плюс с использованием тонкослойной хроматографии и метода добавок. Полученные результаты люминесцентного определения кодеина в лекарственных препаратах позволяют рекомендовать разработанную методику для ее использования в практике экспертных учреждений.The optimal conditions of the codeine solutions luminescence were determined: 0.1 N H 2 SO 4 , λ ex = 300 нм, λ lum = 345 нм. The luminescence procedure of i

Using of Biomarkers in Diagnostics of Connective Tissue Dysplasia

Обсуждаются методы и средства диагностики патологии различных органов и систем организма человека, связанной с дисплазией соединительной ткани (ДСТ). Предложен ряд соединений-биомаркеров для оценки морфофункциональных нарушений висцеральных и локомоторных органов, ассоциированных с ДСТ. Отмечена перспективность использования инструментария Центра коллективного пользования СФУ для разработки новых методик определения биомаркеров.Methods and ways of pathology diagnostics in different organs and systems of human being dealing with connective tissue dysplasia (СTD) are discussed. Number of some compounds such as biomarkers are proposed for evaluation of morphological and functional breaking of visceral and locomotive motor organs associated with (СTD). Perspective activity of the Centre for Collective Work's (Siberian Federal University) facilities for working out new methods of biomarkers' determination has been underlined

Using of Biomarkers in Diagnostics of Connective Tissue Dysplasia

Обсуждаются методы и средства диагностики патологии различных органов и систем организма человека, связанной с дисплазией соединительной ткани (ДСТ). Предложен ряд соединений-биомаркеров для оценки морфофункциональных нарушений висцеральных и локомоторных органов, ассоциированных с ДСТ. Отмечена перспективность использования инструментария Центра коллективного пользования СФУ для разработки новых методик определения биомаркеров.Methods and ways of pathology diagnostics in different organs and systems of human being dealing with connective tissue dysplasia (СTD) are discussed. Number of some compounds such as biomarkers are proposed for evaluation of morphological and functional breaking of visceral and locomotive motor organs associated with (СTD). Perspective activity of the Centre for Collective Work's (Siberian Federal University) facilities for working out new methods of biomarkers' determination has been underlined