Preparative Purification of Pseudomonas aeruginosa Bacteriophages via the Combination of Gel-Permeation and Anion-Exchage Chromatography

Abstract: We developed and described a method for the purification of Pseudomonas aeruginosa bacteriophages that consists of sequential steps of size-exclusion and anion-exchange chromatography. The technique was tested on five bacteriophages of different size and morphology. Similar results were obtained, which allows the proposed approach to be considered universal and highly scalable. © 2020, Pleiades Publishing, Inc

Увеличивается ли тонус сосудов системы микроциркуляции при артериальной гипертонии?

Rationale: An increase in vascular tone is believed to be a major factor leading to arterial hypertension (AH). There are no means for a direct measurement of the vascular tone in clinical practice. Perfusion assessment by laser Doppler flowmetry (LDF) allows for an indirect evaluation of the vascular tone of the microcirculation system. Perfusion is assessed by the change in blood flow per unit of time in the given area. Therefore, this parameter should be inversely correlated with vascular tone. Aim: To compare the forearm skin perfusion measured by LDF in patients with AH and healthy volunteers with normal blood pressure, and to review the feasibility of this parameter for the assessment of the microvasculature tone.Materials and methods: The study was carried out in two groups: group one, patients with AH (n = 43; age 62 [57; 71] years), and group 2, healthy volunteers without AH (n = 62; age 28 [24; 37] years). The perfusion in the forearm skin was measured by LDF for 2 minutes without any functional tests. "Baseline perfusion” for each subject was calculated as the average perfusion rate in a representative portion of the microcirculatory curve.Results: Median of basic perfusion in the forearm skin in the patients with AH is significantly higher than that in the normotensive individuals: 4.88 [2.87; 8.98] PU and 3.41 [2.47; 4.99] PU, respectively (p = 0.013). The interquartile range of the baseline perfusion in the control group was chosen as provisional threshold values for the "normal” perfusion level. In 39.5% of patients with AH, their basic perfusion was within the "normal level”; 46.5% of the patients had the baseline perfusion above the "normal level”, which might be due to reduced tone of the peripheral vessels. Only 14.0% of the patients had a decreased level of the basic perfusion.Conclusion: An increase in the skin perfusion in some patients with AH may indicate a decrease in their peripheral vascular tone, which could be a potential compensatory reaction in response to the rise in blood pressure. The results obtained could have been influenced by the age-related changes in the cardiovascular system, drug therapy, etc. Further studies into the specifics of peripheral vasculature seem reasonable. They can contribute to the understanding of the pathophysiology of AH in a given patient and, in future, could be used to guide a personalized choice of therapy.Актуальность. Увеличение тонуса сосудов считается одним из важных факторов, приводящих к артериальной гипертонии (АГ). В клинической практике нет методов прямого измерения тонуса сосудов. Косвенно оценить тонус сосудов системы микроциркуляции можно при помощи исследования перфузии методом лазерной доплеровской флоуметрии (ЛДФ). Перфузия характеризует изменение потока крови в единицу времени в анализируемом участке, следовательно, этот параметр должен быть обратно пропорционален тонусу сосудов. Цель - сравнить перфузию кожи предплечья, измеренную методом ЛДФ, у пациентов с АГ и добровольцев с нормальными показателями артериального давления (АД), рассмотреть практическую применимость этого параметра для оценки тонуса сосудов системы микроциркуляции.Материал и методы. Работа проведена на двух группах: группу 1 составили пациенты с АГ (n = 43; медиана возраста - 62 [57; 71] года), группу 2 - добровольцы без АГ (n = 62; медиана возраста - 28 [24; 37] лет). Измерение перфузии кожи предплечья проводили методом ЛДФ в течение 2 минут без применения функциональных проб. Для каждого обследуемого рассчитывали «базовую перфузию» - средний показатель перфузии на репрезентативном участке микроциркуляторной кривой.Результаты. Медиана базовой перфузии в коже руки у пациентов с АГ значимо больше, чем у нормотензивных лиц: 4,88 [2,87; 8,98] и 3,41 [2,47; 4,99] ПЕ соответственно (р = 0,013). В качестве условного «нормального» уровня перфузии принято значение, соответствующее интерквартильному диапазону в контрольной группе. У 39,5% пациентов с АГ базовая перфузия соответствовала «норме», 46,5% пациентов имели показатель базовой перфузии выше «нормы», что может быть обусловлено сниженным тонусом периферических сосудов, и лишь у 14,0% пациентов базовая перфузия была снижена.Заключение. Повышение перфузии крови в коже у части пациентов с АГ может свидетельствовать о снижении тонуса периферических сосудов, что, предположительно, является компенсаторной реакцией организма в ответ на повышение артериального давления. На полученные результаты, вероятно, влияли возрастные изменения сердечно-сосудистой системы, лекарственная терапия и другие факторы. Представляется целесообразным продолжить исследования состояния периферических сосудов. Их результаты могут внести вклад в понимание механизмов развития АГ у конкретного пациента, а в перспективе - применяться для персонализированного подхода в подборе терапии

Bacteriophage Control of Pseudomonas savastanoi pv. glycinea in Soybean

Bacterial viruses (bacteriophages) have been considered as potential agents for the biological control of bacterial phytopathogens due to their safety and host specificity. Pseudomonas savastanoi pv. glycinea (Psg) is a causative agent of the bacterial spotting of soybean (Glycine max Willd). The harm caused by this bacterium to crop production and the development of antibiotic resistance in Psg and other pathogenic microorganisms has led to the pursuit of alternative management strategies. In this study, three Psg-specific lytic bacteriophages were isolated from soybean field soil in geographically distant regions of Russia, and their potential for protective action on plants was assessed. Sequencing of phage genomes has revealed their close relatedness and attribution to the genus Ghunavirus, subfamily Studiervirinae, family Autographiviridae. Extensive testing of the biological properties of P421, the representative of the isolated phage group, has demonstrated a relatively broad host range covering closely related Pseudomonas species and stability over wide temperature (4–40 °C) and pH (pH 4–7) ranges, as well as stability under ultraviolet irradiation for 30 min. Application of the phages to prevent, and treat, Psg infection of soybean plants confirms that they are promising as biocontrol agents. © 2022 by the authors. Licensee MDPI, Basel, Switzerland