Biomarcadores moleculares no camarão branco, Litopenaeus vannamei (Crustacea: Decapoda), submetido a estresse ambiental e infectado pelo vírus da síndrome da mancha branca (White Spot Syndrome Virus, WSSV)

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Biociências, 2011O vírus da síndrome da mancha branca (White Spot Syndrome Virus - WSSV) é o agente etiológico da doença viral que afeta a maior parte dos cultivos de camarão marinho no mundo. A ocorrência do WSSV em Santa Catarina, no início de 2005, revelou a fragilidade das medidas sanitárias aplicadas nas fazendas de criação de camarões marinhos e do sistema de vigilância sanitária animal. A saúde dos camarões e, conseqüentemente, a produtividade de uma fazenda de cultivo são fortemente influenciadas pelas condições físicas, químicas e biológicas que prevalecem ao longo do processo de cultivo. Compostos tóxicos, como pesticidas, alterações na salinidade temperatura da água de cultivo, são alguns dos fatores que podem promover estresse e induzir alterações bioquímicas, moleculares e fisiológicas nesses animais, podendo, ainda, favorecer a incidência de enfermidades virais. A permetrina é o inseticida piretróide mais utilizado em práticas de cultura de arroz em muitos países. Concentrações sub-letais de permetrina podem causar impacto nos cultivos, afetando sua produtividade. Neste estudo, camarões juvenis, Litopenaeus vannamei foram expostos permetrina (0,01, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 e 0,8 µg.L-1) por 96h e em um segundo experimento (0,8 µg.L-1) por 6, 12, 24, 48, 72 e 96h. Ensaios enzimáticos envolvendo a determinação da atividade da superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx), glutationa S-Transferase (GST) e acetilcolinesterase (AChE), foram realizados em brânquias e hepatopâncreas de camarão exposto a permetrina. Níveis de transcrição dos genes que codificam estes biomarcadores enzimáticos foram investigados por PCR em tempo real (qPCR) em ambos os tecidos. Num segundo experimento, os camarões foram expostos a 0,8 µg.L-1 de permetrina durante 7 dias antes de serem inoculados com o WSSV. O perfil de expressão de proteínas de estresse e de defesa, tais como ferritina, ß-actina, proteína quinase C., ubiquitina, HSP90 Hsp60, Hsp70, caspase-3 e proteína QM, foi avaliado no tecido branquial destes animais, através de qPCR e por Western blot. Mudanças nos níveis de expressão sugerem que a toxicidade de permetrina promove alterações na expressão de genes-alvo no camarão L. vannamei, modulando a transcrição e os níveis de proteínas, bem como a atividade enzimática de biomarcadores de estresse oxidativo. Além disso, a infecção e a carga viral poderiam ser associadas a um diferencial de transcrição de alguns dos genes que codificam essas proteínas. O padrão de respostas provocadas após a exposição à permetrina, através da análise mútua de respostas transcricionais, traducionais e enzimáticas relacionadas a estes genes, apóiam o desenvolvimento de um sistema multi-biomarcador que poderia ser usado como ferramenta para o monitoramento de ambientes aquáticos e, consequentemente, de saúde dos camarões de cultivo. Outra etapa deste trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do estresse térmico sobre a taxa de replicação do WSSV em camarões marinhos, mantidos em água quente (29±0,5°C), em comparação com camarões mantidos em água fria (18±0,5°C), além disso, pós-larvas e crustáceos selvagens capturados foram selecionados quanto à presença ou ausência do WSSV, após serem mantidos por 48h em estresse térmico. No caso de camarões silvestres, previamente negativos para o vírus, foram obtidos resultados positivos para o WSSV após estresse térmico de 48h. Os resultados apóiam a aplicação de um protocolo de estresse térmico como estratégia de seleção de reprodutores e para monitoramento dos ambientes de cultivo

Respostas bioquímicas do camarão-branco, Litopenaeus vannamei (Boone, 1931), exposto ao inseticida Carbofuran e determinação da prevalência natural do vírus da necrose hipodermal e hematopoiética infecciosa - IHHNV

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia

PADRONIZAÇÃO DE METODOLOGIAS PARA A IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR DE ENFERMIDADES EM PÓS-LARVAS DE Macrobrachium rosenbergii

Enfermidades são um dos principais entraves para o desenvolvimento daaquicultura. Este projeto objetivou padronizar metodologias para a identificaçãomolecular de WSSV e Vibrio sp . em pós-larvas de M. rosenbergii . Problemas para aobtenção de pós-larvas inviabilizaram sua utilização e amostras de tecidos deanimais adultos foram utilizadas. O DNA extraído de pleópodes e músculoapresentou ausência de inibidores de reação, fato comprovado através daamplificação do gene constitutivo. A PCR e RT-qPCR para diagnóstico de WSSVforam padronizadas e nenhuma das amostras apresentou infecção por WSSV.Atrasos na obtenção das amostras inviabilizaram o diagnóstico de Vibrio sp

Genomic Surveillance of SARS-CoV-2 in Healthcare Workers: A Critical Sentinel Group for Monitoring the SARS-CoV-2 Variant Shift

SARS-CoV-2 genome surveillance is important for monitoring risk groups and health workers as well as data on new cases and mortality rate due to COVID-19. We characterized the circulation of SARS-CoV-2 variants from May 2021 to April 2022 in the state of Santa Catarina, southern Brazil, and evaluated the similarity between variants present in the population and healthcare workers (HCW). A total of 5291 sequenced genomes demonstrated the circulation of 55 strains and four variants of concern (Alpha, Delta, Gamma and Omicron—sublineages BA.1 and BA.2). The number of cases was relatively low in May 2021, but the number of deaths was higher with the Gamma variant. There was a significant increase in both numbers between December 2021 and February 2022, peaking in mid-January 2022, when the Omicron variant dominated. After May 2021, two distinct variant groups (Delta and Omicron) were observed, equally distributed among the five Santa Catarina mesoregions. Moreover, from November 2021 to February 2022, similar variant profiles between HCW and the general population were observed, and a quicker shift from Delta to Omicron in HCW than in the general population. This demonstrates the importance of HCW as a sentinel group for monitoring disease trends in the general population