Cytogenetic characterization of Partamona cupira (Hymenoptera, Apidae) by fluorochromes

Four colonies of the stingless bee Partamona cupira (Hymenoptera: Apidae) were cytogenetically analyzed using conventional staining and the fluorochromes CMA3 e DAPI. The females have 2n = 34 chromosomes (2K = 32 M¯+2 A¯). Some females, however, presented an additional large B acrocentric chromosome, to a total of 2n = 35. Chromosome B and the chromosomal pairs 2, 9 and 10 showed CMA 3+ bands, indicating an excess of CG base-pairs. A clear association was verified between the P. helleri B chromosome SCAR marker and the presence of a B chromosome in P. cupira. The data obtained suggests that B chromosomes in P. helleri and P. cupira share a common origin

Citogenetic and specific sequence analises of B chromosomos in Partamona cupira (Hymenoptera:Apidae)

Cromossomos B, também chamados de cromossomos extra- numerários ou acessórios ocorrem em fungos, plantas e animais. Estes cromossomos possuem um padrão de segregação não mendeliano, podendo existir de uma a várias cópias por indivíduo. No gênero Partamona, de seis espécies caracterizadas citogeneticamente até então, somente P. helleri apresentou cromossomo B. Um marcador RAPD foi identificado como associado a esse cromossomo em uma colônia oriunda de Viçosa-MG, sendo posteriormente clonado, sequenciado e transformado em marcador SCAR. Este mesmo marcador foi identificado em P. cupira, P. criptica e P. rustica, o que sugere que estas espécies também possuem cromossomos B. Além disso, esse mesmo marcador foi detectado em indivíduos de um ninho de P. helleri de Salvador - BA, cujos indivíduos possuíam um grande cromossomo B heterocromático. Podendo haver uma ligação entre a presença do marcador SCAR nestas espécies e a presença de cromossomos Bs, este trabalho teve como objetivo detectar a presença de cromossomos B em P. cupira e verificar se existe uma associação entre ele e a presença do marcador SCAR descrito acima. Um outro objetivo foi o sequenciamento dos fragmentos SCARs de P. cupira, P. criptica, P. rustica e P. helleri de Salvador-BA, com o propósito de comparar o nível de identidade entre as sequencias de SCAR. Como resultado, das 4 colônias de P. cupira analisadas, duas apresentaram o número de 2n=34, ao passo que as outras duas apresentaram em alguns indivíduos um cromossomo B de grande tamanho (colônias GUI 1 e GUI 11). Observou-se ainda, uma marcação de CMA3 no braço curto destes cromossomos extranumerários, o que sugere que o mesmo pode conter sequencias de genes de DNA ribossomal nesta espécie. Verificou-se também uma clara associação entre a presença do marcador SCAR e a de cromossomos B, nos indivíduos das colônias GUI 1 e GUI 11. Levando em conta que as sequências, comparadas em conjunto possuíam apenas alguns gaps e quase nenhum sítio variável entre elas, pode-se dizer que o nível de identidade entre elas é extremamente alto, o que sugere algum tipo importância adaptativa em relação ao cromossomo B, ainda desconhecida, ou o surgimento deste último, através de cruzamentos interespecíficos, ainda não detectados entre as espécies do gênero. Estudos futuros deverão analisar as diferentes hipóteses levantadas sobre a origem dos cromossomos B no gênero Partamona, bem como a associação dos fragmentos oriundos dos primers SCAR de P. helleri com a presença destes cromossomos em P. criptica, P. rustica e P. helleri de Salvador BA.B chromosomes, called supernumerary or accessory too, has been founded in fungi, plants and animals. This chromosomes have a rate of no mendelian segregation and he can occurs, since one to many copies by individual. In the gender Partamona, of six citogenetic characterazed species nowadays, only P. helleri owned B chromosome. RAPD mark has been identified as associated to this chromosome in a colony from Viçosa City-MG. After this, it has been cloned, sequenciated and transformated in a SCAR mark. This same mark has been identified in P. cupira, P. criptica and P. rustica, what suggested this species have B chromosome, too. Moreover, this same mark has been identified in a colony of Salvador City-BA. whose individuals have a big heterochromatic B chromosome. How it's possible that there is a association between the presence of B chromosomes, this work had as aim detect the presence of B chromosome in P. cupira and verified a possible association between them and the presence of SCAR mark described above. Another object was the sequenciation of SCAR fragment from P. cupira, P. criptica, P. rustica and P. helleri (Salvador City-BA), with the aim of comparer the level of identity between the SCAR sequences. As resulted, the four colony at all from P. cupira analised, only two ownied the chromosomic number 2n=34, otherwise the other two colonies ownied same individuals that demonstrated have the presence of a great B chromosome (GUI 1 E GUI 11). Another observation was CMA3 mark in the short arm of this supernumerary chromosomes, what suggest that them may have owned ribossomal DNA sequeces. Moreover, it has been verified a clear association between the presence of SCAR mark and B chromosomes in the individuals from colonies GUI 1 E GUI 11. It's considered that sequences compared at all, have been only same gaps and almost none variable site, between them, what suggests that the level of identity between sequences is extremely high. It's suggests some kind of importance in relation to the adaptation of chromosome B, nowadays unknown, or the born of B, throw interspecific mating no detected yet. Future studies will analyze the different hypothesis about the origin of B chromosomes in the genera Partamona and the association between fragments from SCAR primers with the presence of Bs in P. criptica, P. rustica e P. helleri (Salvador City-BA).Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológic

Diversity genetics in Zabrotes subfasciatus and about her endosymbiont bacteria Wolbachia sp

O feijão é um grão oriundo de espécies leguminosas como Phaseolus vulgaris ou mesmo dos gêneros Vigna e Vicia, tendo uma importância em nossa nutrição. Danos causados por Zabrotes subfasciatus (Coleptera: Chrysomelidae) reduzem a qualidade do grão. Por isso, é necessário estudar a genética populacional desta praga, assim como a presença de sua bactéria endocelular Wolbachia sp. e sua relação filogenética com outras cepas. Para isso, analisamos amostras coletadas de Z. subfasciatus em onze locais do Brasil, além de Peru e Colômbia. Detectamos a presença da bactéria em populações de Z. subfasciatus por meio de um marcador molecular específico e a análise filogenética foi feita por meio de sequencias de seis genes de Wolbachia sp. Também realizamos estudos filogeográficos nas populações de Z. subfasciatus por meio de DNA mitocondrial e nuclear. Os resultados mostraram a presença da bactéria em todas as populações e indicam o predomínio de uma única cepa chamada Zsub. As análises filogenéticas indicam que a cepa presente em Lissorhoptrus oryzophilus (Coleoptera: Curculionidae) é a mais próxima de Zsub. Detectamos também alelos compartilhados da cepa Zsub com cepas presentes em outros Coleópteros e pragas de grãos armazenados. Constatamos a transmissão horizontal e recombinação intra e inter-gene entre cepas. Os resultados de filogeografia mostram o predomínio de uma única linhagem mitocondrial no Brasil, efeito gargalo e compartilhamento de haplótipos entre regiões e países. Portanto, é importante que as autoridades tomem providências para prevenir a chegada de novos alelos de resistência nas populações e que dificultaria o controle dessa praga.Beans are grains from leguminous species like Phaseolus vulgaris or even from Vigna and Vicia genrer and it have an importance in our nutrition. Damage caused by Zabrotes subfasciatus (Coleptera: Chrysomelidae) reduce the grain quality. Therefore, it is necessary study the populational genetics of this pest, as the presence of its endocellular bacteria Wolbachia sp. and its phylogenetic relation with others Wolbachia sp. strains. For this reason, we analyse Z. subfasciatus samples from eleven Brazilian places, beside places in Peru and Colombia. We detected the bacteria presence in Z. subfasciatus populations by means of a Wolbachia specific molecular mark and the phylogenetic analyses were done by means of sequences from six Wolbachia genes. We also did phylogeographic studies in Z. subfasciatus by means of mitochondrial and nuclear DNA. The results showed the Wolbachia sp. presence in all populations and indicated the predominance of a unique strain called Zsub. The phylogenetic analyses indicate that the strain hosted in Lissorhoptrus oryzophilus (Coleoptera: Curculionidae) is the nearest to Zsub. We also detected alleles shared between Zsub and strains hosted in coleopterans and stored grain pests. We verified the horizontal transmission besides inter- and intragenic recombinations between strains. The phylogeographic results showed the predominance of a unique mitochondrial lineage and bottleneck effect in Brazilian populations and haplotype shared between regions and Countries. Therefore, it is important that the authorities will take measures to prevent the arrive of new resistence alleles in the populations, which it could difficult the control of this pest.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológic

Cytogenetic characterization of Partamona cupira (Hymenoptera, Apidae) by fluorochromes

Abstract Four colonies of the stingless bee Partamona cupira (Hymenoptera: Apidae) were cytogenetically analyzed using conventional staining and the fluorochromes CMA 3 e DAPI. The females have 2n = 34 chromosomes (2K = 32M+2A). Some females, however, presented an additional large B acrocentric chromosome, to a total of 2n = 35. Chromosome B and the chromosomal pairs 2, 9 and 10 showed CMA 3 + bands, indicating an excess of CG base-pairs. A clear association was verified between the P. helleri B chromosome SCAR marker and the presence of a B chromosome in P. cupira. The data obtained suggests that B chromosomes in P. helleri and P. cupira share a common origin. Stingless bees of the genus Partamona (Hymenoptera, Apidae) are widely distributed geographically. Their range extends from the south of Mexico to south Brazil, spreading northwards along the Pacific coast until Peru The cytogenetic characterization of eight species of the genus Partamona, viz., P. pearsoni, P. helleri (cited as P. cupira by B chromosomes of P. helleri were cytogenetically characterized using C, Q and NOR banding, GTG method, CMA 3, DAPI and FISH (Brito et al., 2005). Using molecular techniques, Considering that in P. helleri the SCAR marker is present exclusively in individuals possessing B chromosomes, and that this marker was also identified in P. cupira, the aim of this study was to cytogenetically characterize the latter species, to check for the presence of B chromosomes. As the presence of a B chromosome was detected in some individuals of P. cupira, an additional molecular analysis was carried out by using the SCAR marker previously described, in order to check whether there is an association between this sequence and the presence of B chromosomes in this species