Toxoplasma gondii: II. Tachyzoite antigenic characterization of eigth strains

Oito amostras de T. gondii - LIV IV, LIV V e S 11 isoladas de suínos, RH e VPS de seres humanos, AS 28 de camundongo, HV III de cão e CN de gato - foram analisadas com o objetivo de verificar a existência de possíveis diferenças na resposta imune quando inoculadas em coelhos. Através da técnica de ELISA, não foram constatadas diferenças entre as oito amostras estudadas. Todas as amostras reagiram de forma semelhante com soros homólogos e heterólogos. A suspensão antigênica, constituída de extrato celular total, mostrou-se eficiente no ELISA teste indireto, já que os soros positivos reagiram fortemente e os soros negativos não apresentaram reação contra os antígenos testados. A análise das amostras, pela técnica de Western blot, revelou que os isolados de T. gondii compartilham vários antígenos com algumas variações. Dentre as bandas reconhecidas no Western blot, três foram comuns a todas as amostras: a p33 (33-37 kDa), p54 (52-55 kDa) e a p66 (66 kDa). A amostra HV III, isolada recentemente de um cão, foi a que mais diferiu no perfil antigênico. Essa amostra não apresentou três antígenos (50, 70 e 75 kDa) presentes nas demais amostras. Apenas dois antígenos, um de 62 kDa da CN e outro de 67 kDa da LIV IV, foram amostra-específicos.Eight Toxoplasma gondii strains were analyzed using ELISA and Western blot techniques, in order to demonstrate possible immunological differences. The analyzed strains were: LIV IV, LIV V and S 11 isolated from swine, RH and VPS from a human being, AS 28 from a wild mouse, HV III from a dog and CN from a cat. With the ELISA assay the eight strains showed similar reactivity with homologous and heterologous sera. The antigenic suspension, consisting of total cellular extract of tachyzoites, was effective in the indirect ELISA assay, with the positive sera reacting strongly and the negative not reacting with the antigens. The Western blot analysis showed that the T. gondii strains have similar antigenic profiles with a few variations. Three bands were observed in all strains: one of about 33 kDa (p33), another of 54 kDa (p54) and a third one of 66 kDa (p66). The HV III strain, isolated from a dog, did not show three antigens (50, 70 and 75 kDa) that were present in the others. However, this difference was not detected by the ELISA assay. Only two antigens (62 kDa of the CN and 67 kDa of the LIV IV) were strain-specific antigens

Soropositividade para anticorpos anti-Tiypanosoma cruzi em doadores de sangue do Hospital Universitário Regional do Norte do Paraná, Londrina, Brasil

The most frequent form of acquisition of Chagas' disease in endemic areas was the transmission through the feces of contaminated triatominae. However, special attention should be paid in urban areas to transmission by blood transfusion, justifying the compulsory screening of blood donors. Early investigations at blood banks in the town of Londrina, Brazil, demonstrated that the seroprevalence of anti-Trypanosoma cruzi antibodies among blood donors was approximately 7.0% in the fifties9,34. Further studies demonstrated pratically the same seroprevalence until the eighties4,32,41. In an attempt to obtain data about the real dimension of the seropositivity for anti-Trypasonoma cruzi antibodies in the region, the authors carried out a large-scale study on 45,774 serum samples from blood donors of the Hemocentro of Hospital Universitário Regional do Norte do Paraná (HURNP), Universidade Estadual de Londrina. The immunological tests were done at the Division of Clinical Immunology of HURNP from May 1990 to December 1994. The serum samples were studied by the indirect hemagglutination assay (IHA, using kits commercially obtained from EBRAM) and by indirect immunofluorescence (IFI, using kits from LIO SERUM) with anti-human IgG conjugate (LABORCLIN). The results demonstrated that 643 serum samples were positive in both assay corresponding to a seroprevalence of 1.4%, i.e., a significant decrease in anti-Trypanosoma cruzi antibodies in the region in comparison with the previously mentioned rates. Data correlating sex and age of seropositive blood donors are presented, as well as the possible factors that may have contributed to the results observed.A forma de aquisição mais freqüente da Doença de Chagas em áreas endêmicas foi a transmissão clássica, através das fezes de triatomíneos contaminados. Entretanto, atualmente deve-se dar especial atenção nos centros urbanos para a transmissão por transfusão de sangue, justificando a necessidade de rigorosa triagem sorológica dos doadores. As primeiras investigações em bancos de sangue de Londrina mostraram uma soroprevalência de anticorpos anti-T. cruzi de aproximadamente 7,0% nos anos 50(9,34). Estudos posteriores praticamente registraram a manutenção desta soroprevalência até a década de 80(4,32,41). Com o objetivo de obter subsídios quanto a dimensão atual da soropositividade de anticorpos anti-T. cruzi em nossa região, foi feito um levantamento dos resultados das reações sorológicas para doença de Chagas em 45.770 amostras de soro de doadores de sangue do Hemocentro do HURNP. realizadas no período de maio de 1990 a dezembro de 1994. As amostras foram analisadas empregando-se a técnica de hemaglutinação indireta (HAI, comercialmente obtida da EBRAM) e imunofluorescência indireta (IFI, obtidos da LIO SERUM) usando-se conjugados anti-IgG humano (fornecidos pela LABORCLIN). Destas, 643 (1,4%) amostras apresentaram resultado reagente para ambas as técnicas. Pode-se observar uma alteração significativa nos índices de positividade de anticorpos anti-T. cruzi em doadores de sangue de Londrina. Dados correlacionando sexo e idade dos doadores soropositivos são apresentados, bem como os possíveis fatores que contribuíram para os resultados observados