Use of serological diagnostic techniques in the control and eradication of caprine arthritis encephalitis: an update

A artrite encefalite caprina (CAE) é uma enfermidade crônica causada por um lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR), que ocasiona perdas significativas na caprinocultura. O estado real da infecção animal pelo LVPR é de difícil determinação em virtude da complexa patogenia do vírus, incluindo fatores como soroconversão tardia ou intermitente em testes sorológicos. Para o diagnóstico da enfermidade, diversas técnicas sorológicas estão disponíveis, como testes de triagem ou confirmatórios, com variações na sensibilidade e especificidade. Para escolha do teste a ser usado, a disponibilidade de imunorreagentes comerciais, o treinamento da equipe, o antígeno utilizado, e o custo das técnicas devem ser considerados. Esta revisão apresenta os métodos sorológicos disponíveis para uso em diferentes fases dos programas de controle e erradicação da CAE e as medidas de manejo que devem ser adotadas em conjunto com o diagnóstico sorológico da enfermidade.Caprine arthritis encephalitis (CAE) is a chronic disease caused by a small ruminant lentivirus (SRLV), which causes significant losses in goat breeding. The actual state of animal infection with SRLV is difficult to determine due to a complex pathogenesis of the virus, including factors such as delayed or intermittent seroconversion in serological tests. Several serological techniques are available for disease diagnosis, such as screening or confirmation tests, which are different in sensitivity and specificity. Regarding the choice of the test to be applied, availability of commercial immunoreagents, team training, antigen used, and cost of techniques must be considered. This review presents the serological methods available for use in different stages of CAE control and eradication programs, and management measures to be adopted in conjunction with serological diagnosis of the disease

Phylogenetic Group Determination of Escherichia coli

This study analyzes the occurrence and distribution of phylogenetic groups of 391 strains of Escherichia coli isolated from poultry, cattle, and water buffalo. The frequency of the phylogroups was A = 19%, B1 = 57%, B2 = 2.3%, C = 4.6%, D = 2.8%, E = 11%, and F = 3.3%. Phylogroups A (P<0.001) and F (P=0.018) were associated with E. coli strains isolated from poultry, phylogroups B1 (P<0.001) and E (P=0.002) were associated with E. coli isolated from cattle, and phylogroups B2 (P=0.003) and D (P=0.017) were associated with E. coli isolated from water buffalo. This report demonstrated that some phylogroups are associated with the host analyzed and the results provide knowledge of the phylogenetic composition of E. coli from domestic animals

Phylogenetic Group of Escherichia coli

The aim of the study was to determine the phylogenetic groups of E. coli strains isolated from seemingly healthy broiler and broiler condemned suspected of colibacillosis in a Brazilian slaughterhouse. Samples from respiratory tract and edible giblets (liver and heart) of broilers with and without macroscopic lesions of colibacillosis were collected at slaughter. There were 84 strains isolated from broilers condemned of which 11 were obtained from swabs of the heart, 7 from the liver, and 66 from the respiratory tract. Of the 53 E. coli strains isolated from broilers not condemned, 5 were isolated from the heart, 4 from the liver, and 44 from the respiratory tract. E coli strains were tested via PCR for phylogenetic groups A, B1, B2, C, D, E, and F. Phylogroups A and B1 were the most common phylogroups of E. coli obtained from healthy and sick-appearing broiler carcasses. The results of the study showed that phylogroups B2 and E were associated with the heart samples and phylogroup A was associated with respiratory tract samples, phylogroup B1 with not condemned carcass, and phylogroup D with liver samples

Antagonistic activity of lactic acid bacteria isolated from Minas artisanal cheeses against Brucella abortus

Este estudo teve como objetivo avaliar métodos de estudo in vitro da atividade antimicrobiana de bactérias lácticas contra Brucella abortus e avaliar o efeito antagônico das mesmas sobre a viabilidade deste patógeno. Um total de 18 amostras de bactérias lácteas (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; e Lactobacillus brevis, n = 2), isoladas de exemplares de Queijo Minas Artesanal produzidos em três regiões (Canastra, Campos das Vertentes e Araxá) do estado de Minas Gerais, Brasil, foram testados quanto à sua atividade antimicrobiana contra B. abortus usando três métodos: spot-on-lawn, ensaio de difusão em poço e atividade antagonista de sobrenadante de cultura. Nenhuma das cepas testadas foi capaz de inibir B. abortus nos ensaios spot-on-lawm e de difusão em poço. Os sobrenadantes produzidos pelas bactérias lácteas apresentaram pH ácido, com intensidade dependente do crescimento bacteriano e da amostra, podendo inibir o crescimento de B. abortus. Em contraste, os sobrenadantes com pH neutralizado (pH 7,0) não inibiram o crescimento de B. abortus. Os resultados mostraram que a melhor técnica para estudar o antagonismo in vitro de bactérias lácteas contra B. abortus foi a atividade antagonista de sobrenadante de cultura. O crescimento de B. abortus pode ter sido inibido pela produção de ácido.This study aimed to evaluate methods for studying the in vitro antimicrobial activity of lactic acid bacteria (LAB) against Brucella abortus and to evaluate the antagonistic effect of LAB on the viability of this pathogen. A total of 18 LAB strains (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; and Lactobacillus brevis, n = 2), isolated from Minas artisanal cheeses produced in three regions (Canastra, Campos das Vertentes, and Araxá) of Minas Gerais State, Brazil, were tested for their antimicrobial activity against B. abortus using three methods: spot-on-lawn, agar well diffusion assay, and antagonistic activity of the culture supernatants. None of the tested LAB strains could inhibit B. abortus in the spot-on-lawn and agar-well diffusion assays. The supernatants produced by LAB had an acidic pH, with intensity depending on bacterial growth and strain, and could inhibit the growth of B. abortus. In contrast, pH-neutralized (pH 7.0) LAB supernatants did not suppress the growth of B. abortus. The results showed that the best technique to study the in vitro antagonism of LAB against B. abortus was the antagonistic activity of culture supernatants. The growth of B. abortus may have been inhibited by acid production

Antagonistic activity of lactic acid bacteria isolated from Minas artisanal cheeses against Brucella abortus

This study aimed to evaluate methods for studying the in vitro antimicrobial activity of lactic acid bacteria (LAB) against Brucella abortus and to evaluate the antagonistic effect of LAB on the viability of this pathogen. A total of 18 LAB strains (Lactobacillus plantarum, n = 11; Pediococcus acidilactici, n = 1; Lactobacillus rhamnosus, n = 4; and Lactobacillus brevis, n = 2), isolated from Minas artisanal cheeses produced in three regions (Canastra, Campos das Vertentes, and Araxá) of Minas Gerais State, Brazil, were tested for their antimicrobial activity against B. abortus using three methods: spot-on-lawn, agar well diffusion assay, and antagonistic activity of the culture supernatants. None of the tested LAB strains could inhibit B. abortus in the spot-on-lawn and agar-well diffusion assays. The supernatants produced by LAB had an acidic pH, with intensity depending on bacterial growth and strain, and could inhibit the growth of B. abortus. In contrast, pH-neutralized (pH 7.0) LAB supernatants did not suppress the growth of B. abortus. The results showed that the best technique to study the in vitro antagonism of LAB against B. abortus was the antagonistic activity of culture supernatants. The growth of B. abortus may have been inhibited by acid production

Perfil das propriedades comerciais com caprinos em Minas Gerais e sua relação com a soroprevalência do lentivírus de Pequenos ruminantes

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-10T23:29:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 disserta__o_jamili__final_11814.pdf: 1562713 bytes, checksum: b1c2c7c8842c8878e84c6db12c96efda (MD5) Previous issue date: 20O Estado de Minas Gerais (MG) destaca-se na caprinocultura leiteira juntamente com outros estados da Região Sudeste brasileira. Como as demandas são específicas, as propriedades devem ser analisadas considerando aptidão, corte ou leite, e perfil de criação, comercial/tecnificado ou tradicional/subsistência. A determinação da prevalência segundo o perfil das propriedades comerciais corte e leite quanto ao Lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR) possibilitará a proposição de programa estadual de controle das lentiviroses de pequenos ruminantes. Objetivou-se determinar a soroprevalência do LVPR em rebanhos caprinos comerciais de MG, no ano de 2011, considerando a tipologia produtiva; avaliar variáveis que possuem influência na soropositividade para o LVPR e caracterizar as propriedades soroepidemiologicamente com ênfase no LVPR. Foi realizada amostragem estatística em 70 propriedades comerciais, sendo 10 para corte e 60 para leite, em 12 mesorregiões de MG. Os 1400 soros foram analisados por imunodifusão em gel de agarose (IDGA) e as variáveis foram obtidas por meio do questionário epidemiológico. A prevalência e as frequências das variáveis estudadas foram calculadas com base nos resultados sorológicos para presença de infecção pelo LVPR. A soroprevalência geral em animais dos rebanhos caprinos comerciais foi de 13,8% (202/1400), e quando considerada a tipologia produtiva passou para 23% (202/1194) em caprinos dos rebanhos leiteiros e 0% (0/206) em caprinos de corte. A prevalência em propriedades comerciais foi de 81,4% (57/70). Das propriedades leiteiras 95% (57/60) foram positivas para o LVPR e das propriedades de corte, nenhuma foi positiva (0/10) para o LVPR. A prevalência aumentou com a idade, porém não foi alterada em função da raça, gênero e grau de sangue. Em 55,0% (33/60) das propriedades era realizada alguma forma de controle para a CAE no rebanho, sendo que desta 93,9% eram positivas para o LVPR, demonstrando que ocorriam falhas nas medidas de controle adotadas. Nas propriedades leiteiras, caracterizadas por regime de confinamento, eram adotadas práticas de manejo coletivas que favoreceram a disseminação do LVPR, necessitando de medidas de controle adequadas. As propriedades de corte, com prevalência nula, necessitam de medidas profiláticas para evitar a introdução do vírus.Minas Gerais (MG) State stands out in dairy goat with other states in the Brazilian Southeast Region. As the demands are specific, properties should be analyzed considering its profile, beef or dairy; intensive or subsistence production. Determining the prevalence according to the profile of commercial beef and dairy properties as small ruminant lentivirus (SRLV) enable the proposition state program for control of small ruminant lentiviruses. This study aimed to determine the SRLV seroprevalence in commercial goat herds in Minas Gerais, in 2011, considering the productive typology. Rating variables that has influence on SRLV seropositivity and characterize the properties with emphasis on SRLV. The sampling was performed in 70 commercial properties, 10 for beef and 60 for milk, in 12 MG regions. The 1400 serum was analyzed by the agar gel immunodiffusion test (AGID) and variables were obtained through epidemiological questionnaire. The prevalence and frequencies of variables were calculated based on IDGA results for the presence of SRLV infection. The overall prevalence in commercial goat herds was 13.8 % (202/1400), and when we consider the typology production, prevalence increased to 23 % (202/1194) in dairy goats and 0 % (0 / 206) in beef goats. The prevalence in commercial properties with at least one seropositive goat for SRLV was 81.4% (57/70) and 95% (57/60) in dairy properties and null (0/10) in beef properties. The prevalence increased with age, but it was not altered based on breed, gender and degree of blood. In 55.0% (33/60) is made of the properties some form of control for CAE in the herd, and of this 93.9% are positive for SRLV, demonstrating that failures occur in the control measures taken. The properties characterized by dairy feedlot perform collective management practices that favor the spread of SRLV, requiring the adoption of appropriate control measures. The cutting properties, zero prevalence, need for prophylactic measures to prevent introduction of the virus

Efeito do antagonismo in vitro de bactérias ácido-láticas e da maturação na sobrevivência de brucella abortus em queijos tipo Minas artesanal

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-14T15:16:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 jamili_maria_suhet_mussi.pdf: 3223400 bytes, checksum: 8ea18cbdde7f6b4346e1a46aa2b32e22 (MD5) Previous issue date: 26A brucelose possui importância mundial e a sua ocorrência na população humana está relacionada diretamente com a prevalência da doença em animais. No Brasil, Brucella abortus é endêmica em bovinos, com distribuição heterogênea entre os estados. A eliminação de Brucella spp. no leite de animais infectados possibilita que este alimento seja fonte de infecção para seres humanos. Além disso, Brucella spp. pode sobreviver em diversos produtos lácteos, incluindo queijos produzidos com leite cru que passam por período de maturação, mesmo que este processo ocasione em alterações físico-químicas e microbiológicas no queijo, contribuindo com a redução de patógenos. O queijo Minas artesanal é produzido com leite cru bovino e fermento natural endógeno e é maturado por período variável, dependendo da microrregião do estado de Minas Gerais em que é produzido. A presença de bactérias ácido-láticas (BAL) neste produto tem elevado a sua segurança alimentar, uma vez que estudos prévios demonstraram o potencial de BAL na inibição de patógenos de importância em saúde pública, por produção de substância antimicrobianas em teste in vitro e in vivo. Desta forma, esta tese é composta de dois experimentos: o primeiro objetivou avaliar métodos para estudo in vitro da atividade antimicrobiana de BAL contra B. abortus e avaliar o seu efeito antagonista na viabilidade deste patógeno. O segundo experimento objetivou avaliar o efeito da maturação na sobrevivência de B. abortus em queijos tipo Minas artesanal. Para o primeiro experimento, 18 amostras de BAL isoladas de queijos Minas artesanais, de três regiões (Canastra, Campos das Vertentes e Araxá) do estado de Minas Gerais, Brasil, foram testadas contra três isolados de B. abortus (2308, 544 e 2683), por três metodologias: spot-on-the-lawn, ensaio de difusão em ágar e atividade antagonista dos sobrenadantes de cultura de BAL. Os resultados encontrados demonstraram que: apenas o ensaio de sobrenadantes de cultura de BAL possibilitou o estudo do antagonismo in vitro de BAL contra B. abortus e o crescimento de B. abortus foi totalmente inibido pela maioria das amostras testadas (13/18), exceto quando os sobrenadantes foram neutralizados (pH 7,0). O segundo experimento foi composto de três grupos experimentais: 103 UFC/mL B. abortus, 106 UFC/mL B. abortus e grupo controle negativo. B. abortus 2308 foi inoculada no leite nas concentrações determinadas por grupo experimental. Posteriormente 2% de fermento endógeno foi adicionado para confecção dos queijos, que foram maturados em BOD a 22,5°C e avaliados em 7 períodos de maturação (1, 8, 15, 22, 29, 45, 60 dias). A viabilidade de B. abortus foi determinada pelas técnicas de contagem pelo drop counting method, por plaqueamento direto de 1mL e pré enriquecimento. Os queijos do grupo controle negativo foram analisados quanto a contagem de coliformes, E. coli, Staphylococcus coagulase positivo e negativo, BAL, bolores e leveduras, presença de Salmonella spp., percentagem de extrato seco total, umidade, gordura, proteína total, cloreto e pH. A redução da concentração de B. abortus durante a maturação foi avaliada por análise de sobrevivência e a influência das variáveis microbiológicas e físico-químicas na sobrevivência deste patógeno ao longo da maturação foi avaliada por regressão de Poisson utilizando generalized estimating equations (GEE). Os resultados encontrados para o tratamento com 103 UFC/mL de B. abortus, demonstram ausência do patógeno entre 8 e 15 dias de maturação. Já para o inóculo de 106 UFC/mL de B. abortus, entre 22 e 29 dias de maturação foram necessários para inocuidade dos queijos Minas artesanais inoculados experimentalmente. A única variável no modelo que mostrou um efeito significativo na redução de B. abortus durante a maturação foi o tempo. Em conjunto, estes dois experimentos mostram a importância das bactérias ácido-láticas e do processo de maturação na redução da viabilidade de B. abortus, contribuindo para inocuidade do queijo Minas artesanal.Brucellosis has global importance and the occurrence in the human population is directly related to the prevalence of the disease in animals. In Brazil, Brucella abortus is endemic in cattle, with a heterogeneous distribution between the states. The shedding of Brucella spp. in the milk of infected animals makes this food a source of infection for humans. In addition, Brucella spp. can survive on various dairy products, including ripeness cheeses produced with raw milk, even if this process causes physical-chemical and microbiological alterations in cheese, which may lead to the reduction of pathogens. The Minas artisanal cheese is produced with bovine raw milk, endogenous starter culture and is matured for a variable period, depending on the micro-region of Minas Gerais state where it is produced. The presence of acid lactic bacteria (LAB) in this product has been increased its food safety, since previous studies have demonstrated the potential of LAB in the inhibition of pathogens of public health importance, by producing antimicrobial substance under in vitro and in vivo assays. Thus, this thesis is composed of two experiments: the first aimed to evaluate methods for in vitro study of the antimicrobial activity of LAB against B. abortus and to evaluate the antagonistic effect of LAB on viability of this pathogen. The second experiment aimed to evaluate the effect of maturation on the survival of B. abortus in Minas artisanal cheese. For the first experiment, 18 LAB strains isolated from Minas artisanal cheese from three regions (Canastra, Campos das Vertentes and Araxá), Minas Gerais, Brazil, were tested against three isolates of B. abortus (2308, 544 and 2683), using three methodologies: spot-on-the-lawn, agar well diffusion assay and antagonistic activity of the culture supernatants. The results showed that: only the acid lactic bacteria culture supernatants allowed the study of the in vitro antagonism of LAB against B. abortus and the B. abortus growth was totally inhibited by almost all LAB isolates tested (13/18), except when the supernatants were neutralized (pH 7.0). The second experiment was composed of three experimental groups: 103 CFU/mL B. abortus, 106 CFU/mL B. abortus and negative control group. B. abortus 2308 was inoculated in the milk at concentrations determined in experimental group. Subsequently, 2% of endogenous starter culture was added to the cheeses, which were matured in BOD at 22.5 ° C and evaluated in 7 ripeness periods (1, 8, 15, 22, 29, 45, 60 days). The B. abortus viability was determined by techniques the counting of drop counting method, direct plating of 1mL and pre-enrichment. Cheeses from the negative control group were analyzed for coliform counts at 30 °C, E. coli, Staphylococcus coagulase positive and negative, lactic acid bacteria, molds and yeasts, presence of Salmonella spp, percentage of total dry extract, moisture, fat, total protein, chloride and pH. A survival analysis was performed to evaluate the decrease of B. abortus concentration during ripening time. The influence of microbiological and physico-chemical variables on the survival of B. abortus in cheeses during ripening was evaluated by a Poisson regression using generalized estimating equations (GEE). The results found for treatment with 103 UFC/mL of B. abortus, demonstrated that between 8 and 15 days of ripeness, the pathogen was no longer detected. For 106 UFC/mL of B. abortus, between 22 and 29 days of ripeness were necessary for the innocuity of the Minas artisanal cheese experimentally inoculated. The percentage of moisture, fat in the dry extract and total protein in the cheeses were related to the survival of B. abortus. Together these two experiments demonstrated the importance of acid lactic bacteria and the ripeness process in reducing the viability of B. abortus, contributing to the food safety of the Minas artisanal chees