cDNA cloning and expression of a hamster α-thrombin receptor coupled to Ca2+ mobilization

AbstractThe serine protease α-thrombin (thrombin) potently stimulates G-protein-coupled signaling pathways and DNA synthesis in CCL39 hamster lung fibroblasts. To clone a thrombin receptor cDNA, selective amplification of mRNA sequences displaying homology to the transmembrane domains of G-protein-coupled receptor genes was performed by polymerase chain reaction. Using reverse transcribed poly(A)+ RNA from CCL39 cells and degenerate primers corresponding to conserved regions of several phospholipase C-coupled receptors, three novel putative receptor sequences were identified. One corresponds to an mRNA transcript of 3.4 kb in CCL39 cells and a relatively abundant cDNA. Microinjection of RNA transcribed in vitro from this cDNA in Xenopus oocytes leads to the expression of a functional thrombin receptor. The hamster thrombin receptor consists of 427 amino acid residues with 8 hydrophobic domains, including one at the extreme N-terminus that is likely to represent a signal peptide. A thrombin consensus cleavage site is present in the N-terminal extracellular region of the receptor sequence followed by a negatively charged cluster of residues present in a number of proteins that interact with the anion-binding exosite of thrombin

Tourisme polaire

Téoros marque à sa façon la fin de l'Année polaire internationale avec ce numéro spécial consacré à la recherche en tourisme polaire.  La collection de textes que vous trouverez dans nos pages offre un échantillon représentatif des diverses thématiques abordées en tourisme polaire ces dernières années. Ces textes représentent les enjeux les plus importants, tant pour l'Arctique que pour l'Antarctique: le rôle de la mythologie polaire dans la construction culturelle des attraits et des expériences touristiques, l'activité touristique comme moyen d'appropriation du territoire, les enjeux identitaires du développement touristique en milieu inuit, le cadre juridique du tourisme en Antarctique et l'impact des changements climatiques sur le tourisme polaire

Tourisme polaire

Téoros marque à sa façon la fin de l'Année polaire internationale avec ce numéro spécial consacré à la recherche en tourisme polaire.  La collection de textes que vous trouverez dans nos pages offre un échantillon représentatif des diverses thématiques abordées en tourisme polaire ces dernières années. Ces textes représentent les enjeux les plus importants, tant pour l'Arctique que pour l'Antarctique: le rôle de la mythologie polaire dans la construction culturelle des attraits et des expériences touristiques, l'activité touristique comme moyen d'appropriation du territoire, les enjeux identitaires du développement touristique en milieu inuit, le cadre juridique du tourisme en Antarctique et l'impact des changements climatiques sur le tourisme polaire

Sulphation of hirudin in BHK cells

Hirudin, a thrombin inhibitor of the leech, was expressed in BHK cells; the alpha 1-antitrypsin signal peptide was used to direct secretion into the culture medium. The recombinant hirudin so produced inhibited thrombin and was shown by labelling experiments with [35S]sulphate to have been posttranslationally modifie