Etude de l'absorption intestinale des polyamines chez l'animal porteur d'une greffe tumorale en vue de la mise au point d'une thérapie nutritionnelle anticancéreuse

Les polyamines, indispensables à la prolifération des cellules malignes et néoplasiques, proviennent de sources endogènes et exogènes, disponibles pour la croissance tumorale.Chez le rat cancéreux, un besoin plus important en polyamines pour les cellules tumorales est à l'origine de l'amplification du flux intestinal. Une compétition entre intestin grêle et tumeur, pour les sources d'énergie nécessaire à leurs proliférations, semble responsable de l'augmentation la captation et du métabolisme intestinal des polyamines.Les polyamines exogènes sont impliquées dans la progression tumorale : nous avons formulé un aliment pauvre en polyamines, utilisable en clinique humaine. Cet aliment réduit la croissance tumorale. Ses effets ne sont pas amplifié lorsqu'il est associé à des traitements usuels (néomycine, cyclophosphamide ou acide rétinoïque). Ces résultats démontrent l'intérêt thérapeutique du contrôle de l'apport alimentaire en cas de cancer.RENNES1-BU Sciences Philo (352382102) / SudocSudocFranceF

Vectorisation tumorale d'isotopes par les polyamines à des fins diagnostiques et thérapeutiques

Les polyamines (putrescine, spermidine et spermine) sont des petites molécules polycationiques indispensables à la prolifération cellulaire. Dans les cellules cancéreuses, la synthèse et la captation des polyamines extracellulaires sont augmentées. Le système de transport des polyamines ne possédant pas une spécificité stricte de substrat, de nombreux dérivés de polyamines peuvent l'utiliser pour pénétrer dans la cellule.Des dérivés de putrescine, de spermidine, ou de Z-1,4-diamino-2-butène ont ainsi été synthétisés pour vectoriser : - soit du bore pour la thérapie anticancéreuse par capture de neutrons (BNCT),- soit du fluor pour la tomographie par émission de positrons (TEP),- soit de l'iode pour la scintigraphie.Nous avons étudié les propriétés biologiques de ces molécules, avec un intérêt particulier pour leurs propriétés de transport dans les cellules cancéreuses, aussi bien in vitro qu'in vivo.La structure chimique des dérivés module leurs capacités à utiliser le système de transport, les molécules les plus transportées par cette voie étant des dérivés benzylés de spermidine substitués sur une de leurs amines terminales.In vivo, la sélectivité tumorale des dérivés de polyamines n'est pas strictement corrélée à une utilisation du système de transport des polyamines. La biodistribution d'un dérivé fluoré de spermidine chez des souris porteuses de tumeurs greffées semble néanmoins satisfaire aux exigences de la TEP.Parmi les différentes molécules borées étudiées, aucune ne présente de toxicité élevée. Malgré une sélectivité tumorale plus importante que les molécules utilisées en essai clinique de BNCT, une limitation majeure à l'utilisation des dérivés borés de polyamines reste leur faible accumulation tumorale in vivo. Des pharmacomodulations effectuées sur la structure des dérivés les plus intéressants devraient cependant permettre d'améliorer l'efficacité de la captation tumorale de ces molécules.RENNES1-BU Sciences Philo (352382102) / SudocSudocFranceF

ETUDE DES EFFETS ANTICANCEREUX D'ANALOGUES SILICIES DE POLYAMINES

DES ANALOGUES HETEROATOMIQUES DE POLYAMINES COMPORTANT DANS LEUR CHAINE ALIPHATIQUE UN ATOME DE SILICIUM (SI) A LA PLACE D'UN ATOME DE CARBONE (C), ONT ETE SYNTHETISES A DES FINS THERAPEUTIQUES ANTICANCEREUSES. LES POLYAMINES ETANT DES MOLECULES DIRECTEMENT IMPLIQUEES DANS LA PROLIFERATION CELLULAIRE TUMORALE, NOUS AVONS CHOISI DE FAIRE APPEL A DES MOLECULES POSSEDANT UNE STRUCTURE AUSSI PROCHE QUE POSSIBLE DE CELLE DES POLYAMINES NATURELLES, CECI AFIN QU'ELLES SOIENT RECONNUES COMME TELLES PAR LES CELLULES CANCEREUSES, MAIS INUTILISABLES PAR CES DERNIERES. CES MIMES PHARMACOLOGIQUES DEVANT BLOQUER LA PROGRESSION TUMORALE. IN VITRO, CES ANALOGUES SILICIES INHIBENT A DE FAIBLES CONCENTRATIONS (M) LA PROLIFERATION DE CELLULES CANCEREUSES D'ORIGINE MURINE OU HUMAINE. CETTE INHIBITION S'ACCOMPAGNE D'UNE REDUCTION DES TAUX CELLULAIRES DE PUTRESCINE ET DE SPERMIDINE. CES ANALOGUES PERTURBENT LE DEROULEMENT DU CYCLE CELLULAIRE ET DIMINUENT LA SYNTHESE PROTEIQUE. DANS LES CELLULES CULTIVEES EN PRESENCE D'AZHEPSI, L'UN DES ANALOGUES SILICIES, NOUS AVONS OBSERVE EN MICROSCOPIE ELECTRONIQUE A TRANSMISSION L'APPARITION, PUIS L'ACCUMULATION AU COURS DU TEMPS, DE CORPS MYELINIQUES (OU PSEUDO-MYELINIQUES). IN VIVO, CES ANALOGUES ONT REDUIT DE MANIERE TRES SIGNIFICATIVE LA CROISSANCE D'UNE TUMEUR SOLIDE, LE CARCINOME PULMONAIRE DE LEWIS (3LL). MAIS CONTRAIREMENT A CE QUI A ETE CONSTATE IN VITRO, CET EFFET ANTIPROLIFERATIF NE S'ACCOMPAGNE PAS D'UNE DIMINUTION DES TAUX TUMORAUX DE POLYAMINES, CE QUI LAISSE PRESAGER QUE CES ANALOGUES PEUVENT INHIBER LA CROISSANCE TUMORALE DE MANIERE INDIRECTE, C'EST-A-DIRE EN N'AYANT PAS POUR SEULES CIBLES LES CELLULES CANCEREUSES. ILS POURRAIENT AINSI REDUIRE L'ANGIOGENESE TUMORALE SOLIDE ET/OU AMPLIFIER CERTAINES REPONSES IMMUNITAIRES ANTICANCEREUSES. AUCUN ANALOGUE SILICIE ADMINISTRE ISOLEMENT A L'ANIMAL N'A ETE A MEME DE REDUIRE LA PROGRESSION DE LA LEUCEMIE MURINE L1210. PAR CONTRE, L'ADMINISTRATION CONJOINTE DE DFMO (INHIBITION DE L'ORNITHINE DECARBOXYLASE), DE NEOMYCINE (DECONTAMINATION DU TRACTUS GASTRO-INTESTINAL) ET D'AZHEPSI A PROVOQUE UNE AUGMENTATION TRES SIGNIFICATIVE DE LA SURVIE DES ANIMAUX LEUCEMIQUES, ET LA GUERISON TOTALE DE 50% D'ENTRE EUX. DE PLUS, ET C'EST PROBABLEMENT LE RESULTAT LE PLUS IMPORTANT, LES ANIMAUX GUERIS ONT DEVELOPPE UNE RESISTANCE A TOUTE NOUVELLE INJECTION DE CELLULES L1210. CETTE VACCINATION MET EN EVIDENCE LE REEL INTERET THERAPEUTIQUE ANTICANCEREUX D'AU MOINS UN ANALOGUE SILICIE DE POLYAMINE, L'AZHEPSI.RENNES1-BU Sciences Philo (352382102) / SudocSudocFranceF

Polyamines, stress oxydatif et progression tumorale. Essai pré-clinique de thérapie nutritionnelle

Les polyamines, nécessaires à la croissance cellulaire, sont synthétisées dans la cellule grâce à l'ornithine dcarboxylase (ODC). Les sources exogènes de polyamines sont l'alimentation et la flore intestinale : un traitement comportant un inhibiteur de l'ODC (DFMO), une alimentation pauvre en polyamines et une antibiothérapie intestinale permet d'inhiber à 95 % la croissance tumorale chez l'animal. Il est impossible d'appliquer cette tri-thérapie nutritionnelle à l'homme : la DFMO n'est pas disponible sur le marché. Nos travaux ont consisté à déterminer s'il existe un lien entre stress oxydatif et métabolisme des polyamines et s'il est possible d'utiliser des antioxydants en remplacement de la DFMO. Nos résultats indiquent que les antioxydants n'inhibent pas assez l'ODC pour obtenir un effet anti-tumoral satisfaisant, mais permettent d'améliorer l'état général, de réduire la cachexie et de stimuler la synthèse des protéines impliquées dans la défense immunitaire.RENNES1-BU Sciences Philo (352382102) / SudocSudocFranceF

Facteurs pronostiques cliniques, histopathologiques et immunohistochimiques dans les carcinomes à cellules rénales de type conventionnel (conséquences sur le suivi du patient)

RENNES1-BU Santé (352382103) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Détection d'interaction avec les protéines (synthèse de sondes polyfonctionnelles et application aux polyamines)

Le terme anglophone de "Chemical Biology" définit un domaine dont l'objectif principal est le développement d'outils chimiques pour la biologie. Dans ce domaine nous nous sommes intéressés à deux thématiques importantes : la modification de protéines endogènes et la synthèse de sondes polyfonctionnelles. Ce travail de thèse s est plus particulièrement articulé autour de l étude la biologie des polyamines. Il présente une approche originale puisqu'il allie à la fois méthodologie de synthèse et synthèse multi-étapes. L'objectif de ce travail est dans un premier temps de développer une réaction organométallique catalysée par les complexes de cuivre pour la N-arylation d'hétérocycles azotés. Son développement a permis de mettre au point des conditions optimales ayant été appliquées à la modification de protéines endogènes. Dans un second temps, des sondes bifonctionnelles et trifonctionnelles, dérivées des polyamines, ont été synthétisées. Ces molécules possédant des propriétés de fluorescence, d'affinité ou de photo-activation ont finalement été testées sur différents systèmes biologiques.Chemical Biology defines a domain focused on the development of chemical tools for biology. Among this domain, our interests were directed toward two important areas: endogenous protein chemical modification and polyfunctional probes synthesis. This work was especially focused on the biology of polyamines. Its originality lies in the combination of methodology and multi-step synthesis. We first developped a copper catalyzed reaction for nitrogen heterocycles N-arylation. After optimization of reaction conditions, it was applied to endogenous protein chemical modification. Then bifunctional and trifunctional probes, derived from polyamines, have been synthesized. These molecules have fluorescent, affinity or photo-activatable moieties. They subsequently have been tested on different biological systems.RENNES1-BU Sciences Philo (352382102) / SudocSudocFranceF

Three-dimensional reconstruction and morphologic measurements of human embryonic hearts: a new diagnostic and quantitative method applicable to fetuses younger than 13 weeks of gestation.

2 figures supplémentaires par rapport à la version 1International audienceImprovements in the diagnosis of congenital malformations explain the increasing early termination of pregnancies. Before 13 weeks of gestation, an accurate in vivo anatomic diagnosis cannot currently be made in all fetuses with current imaging instrumentation. Anatomopathologic examinations remain the gold standard to make accurate diagnoses, although they reach limits between 9 and 13 weeks of gestation. We present the first results of a methodology that can be applied routinely, using standard histologic section, thus enabling the reconstruction, visual estimate, and quantitative analysis of 13-week human embryonic cardiac structures. The cardiac blocks were fixed, embedded in paraffin, and entirely sliced by a microtome. One of 10 slices was topographically colored and digitized on an optical microscope. Cardiac volume was recovered by semiautomatic realignment of the sections. Another semiautomatic procedure allowed extracting and labeling of cardiac structures from the volume. Structures were studied with display tools, which disclosed the internal and external cardiac components and enabled determination of size, thickness, and precise positioning of ventricles, atria, and large vessels. This pilot study confirmed that a new 3-dimensional reconstruction and visualization method enables accurate diagnoses, including in embryos younger than 13 weeks. Its implementation at earlier stages of embryogenesis will provide a clearer view of cardiac development