Renal involvement in canine leishmaniasis: a morphological and immunohistochemical study

Caracterizou-se a deposição de IgG e IgM em rins de cães com leishmaniose visceral (LV) pelo uso da técnica imunoistoquímica. Foram estudados rins de 25 cães sintomáticos (caso) e de 15 cães assintomáticos (controle). Todos os animais foram positivos para leishmaniose pela reação em cadeia da polimerase, pelo ELISA e pela imunofluorescência indireta. Fragmentos renais foram submetidos à reação imunoistoquímica. Diversos padrões morfológicos de distribuição de grânulos subendoteliais de IgG e IgM foram identificados nos capilares glomerulares: global, segmentar, difuso ou focal. A intensidade da reação imunoistoquímica da IgG, medida pelo teste exato de Fisher não diferiu entre os grupos sintomáticos e assintomáticos e a intensidade de reação da IgM foi diferente entre os grupos (P<0,01). Depósitos de IgM nas células mesangiais e no infiltrado inflamatório raramente foram visualizados, no entanto as reações IgG foram freqüentemente visualizadas nesses locais. Concluiu-se que as reações de IgM foram mais intensas que as reações de IgG na LV canina e caracterizam-se pela distribuição de grânulos subendoteliais nos capilares glomerulares.IgG and IgM deposits in kidneys of dogs with visceral leishmaniasis (VL) were studied in 25 symptomatic dogs (case) and 15 asymptomatic dogs (control) by an immunohistochemical method. All tested dogs were positive for VL by polymerase chain reaction, enzyme-linked immunosorbent assay, and indirect immunofluorescence test. Kidney fragments were submitted to immunohistochemical reaction. Many morphological patterns of distribution of subendothelial granules were identified for IgG and IgM in glomerular capillaries: global, segmental, diffuse, or focal. Intensity of immunohistochemical reaction to IgG was not significantly different when comparing the symptomatic and the asymptomatic animal groups by Fisher's exact test. IgM reactions were significantly different between groups (P<0.01). Deposits of IgM on mesangial cells and in inflammatory interstitial infiltrate were rarely seen, although IgG reactions were frequent at these sites. This study concluded that immunohistochemical reactions for IgM were more intense than those observed for IgG in canine VL, and these reactions were characterized by distribution of subendothelial granules in glomerular capillaries.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP

Intralesional polysulphated glycosaminoglycan as treatment of equine collagenase induced tendinitis: clinical, ultrasonographic and histopathologic evaluation

Estudou-se o efeito de aplicações intratendíneas do polissulfato de glicosaminoglicanas (PSGAG) no tratamento de tendinite induzida pela colagenase. Dois grupos (GI e GII) de cinco eqüinos da raça Puro-Sangue Árabe, machos e fêmeas, com idades entre dois e seis anos, foram submetidos à tendinite do tendão flexor digital superficial do membro torácico esquerdo por aplicação intratendínea de 1,0ml de colagenase (2,5mg/ml). Decorridos sete dias da indução da lesão, os eqüinos do GI receberam cinco aplicações intralesionais de 1,0ml (125mg) de PSGAG, a intervalos de quatro dias, enquanto que os do GII receberam aplicações de solução fisiológica em igual volume e freqüência. Efetuaram-se avaliações clínicas e ultra-sonográficas, periodicamente, durante 150 dias. Todos os animais apresentaram claudicação e aumento local de sensibilidade, de temperatura e de volume 24 horas após a indução da lesão. Com exceção do aumento de volume, que permaneceu visível até o final do experimento, observou-se regressão de todos os sinais em todos os animais. A avaliação ultra-sonográfica evidenciou lesões de tamanho, forma e posição variados, de maior severidade entre o sétimo e 23º dia. Ao término do experimento, o grau de ecogenicidade encontrava-se entre 1 e 2, e o grau de paralelismo entre 0 e 2. A análise histopatológica evidenciou áreas cicatriciais com intensa fibroplasia e neovascularização, fibras colágenas pouco organizadas e endotendão hipercelular e espessado. Não se observou diferenças significativas entre os grupos quanto ao processo de reparação das lesões, concluindo-se que a aplicação intralesional de PSGAG não produziu efeito benéfico para tratar tendinite induzida por colagenase.The effect of intratendineous injections of polysulphated glycosaminoglycan (PSGAG) as treatment of collagenase-induced tendonitis was studied. Two groups (GI and GII) of five Arabian horses each, males and females, two to six year-old, were submitted to experimental tendinitis of the superficial digital flexor tendon of the left thoracic limb by intratendineous injection of 1.0ml of collagenase (2.5mg/ml). Seven days after the induced-lesions were created, the horses of GI received five intralesional injections of 1.0ml (125mg) of PSGAG, every four days. Horses of GII received injections of saline in the same dose and rate. Clinical and ultrasonographic evaluations were performed periodically, during 150 days. All animals showed lameness, increased local pain, heat and swelling 24 hours after the injury was created. All signs, except to swelling, which remained visible by the end of the study, showed regression in all animals. Lesions of variable size, shape and position were evidenced by the ultrasonographic evaluation, reaching maximum severity between the seventh and the 23rd days. By the end of the study, the echogenicity grade ranged from 1 to 2, and the grade of fiber alignment from 0 to 2. The histopathologic analysis demonstrated repair areas with intense fibroplasia and neovascularization, collagen fibers poorly organized, and thickened hypercellular endotenon. The data of this study did not show significant differences between the treated and control groups, therefore leading to the conclusion that the intralesional injection of PSGAG did not have beneficial effects in the treatment of collagenase-induced tendinitis

Deformities in reared cobia, Rachycentron canadum L. and grouper, Epinephelus marginatus, in São Paulo state coast, Brazil: case report

ABSTRACT Skeletal deformities are frequent problems in cultured fish populations due mainly to unfavorable abiotic conditions, inappropriate nutrition, and genetic factors. These may cause erratic swimming, decrease of conversion rate, growth, and market value. The aim of this case report was to present the occurrence of deformities in juvenile cobia and groupers from an offshore marine farm in Ilhabela, São Paulo, Brazil. Nine cobias and seven juvenile groupers, that presented deformities, were euthanized and fixed in 10% formaldehyde. They were tagged, processed, and stained with "Alcian Blue" (AB) and "Alizarin Red-S" (ARS) for visualization of cartilage and bone tissue, respectively. After evisceration, radiographic examination was performed. The deformities observed in cobia were atrophy of the operculum, disorganization of the gill lamellae, deformity of the lower jaw, kyphosis, and scoliosis. Groupers presented lower jaw deformity and saddleback syndrome. The farm studied in this case report had poor management standards, fed commercial feed for freshwater herbivorous fish and cooked sardines, high inbreeding and absence of adequately trained professionals to manage these species. The sum of these factors must have directly influenced the appearance of these deformities. It is necessary to control this situation to minimize the incidence of malformations that have economic impacts to farmers

Ativação de células de memória na produção de anticorpos e na expressão de células IgM positivas no baço de tilápias-do-nilo

RESUMO O presente trabalho avaliou o papel do baço no armazenamento e na reativação das linhagens de células B, representadas por células IgM positivas imunomarcadas no tecido esplênico, bem como a funcionalidade dessas células, sobre a cinética dos linfócitos e na produção sistêmica de anticorpos em tilápias-do-nilo (Oreochromis niloticus). Foram separados dois grupos: grupo memória, constituído por peixes previamente imunizados com hemácia de carneiro a 2,5%, para a geração da memória imune, e o grupo naive, que recebeu o mesmo volume de solução salina a 0,65%. Após 32 dias, os dois grupos foram submetidos a uma nova dose do antígeno na mesma concentração, volume e via de inoculação. A reativação dos clones de memória foi evidenciada pelo aumento do número de células IgM positivas no baço do grupo memória no dia zero/pré-imune. Além disso, o mesmo grupo apresentou aumento dos títulos de anticorpos séricos no 14º dia e no número absoluto de linfócitos no 21º dia em relação ao grupo naive. Esses resultados sugerem que o baço não seja apenas um local de armazenamento, mas também de reativação de células B de memória em tilápia-do-nilo

Transferência passiva de soro hiperimune anti-Streptococcus agalactiae e seu efeito profilático em tilápias-do-nilo infectadas experimentalmente: sobrevivência e títulos de anticorpos

A bactéria Streptococcus agalactiae é um potente agente causador de surtos por doenças bacterianas em peixes. O estresse provocado pelo manejo zootécnico e pela má qualidade ambiental torna a tilápia susceptível às infecções por essa bactéria. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a resistência de tilápias-do-nilo imunizadas com soro hiperimune anti-S. agalactiae, posteriormente desafiadas com cepa homóloga da mesma bactéria. Após determinação da DL 50 de S. agalactiae, 36 tilápias foram distribuídas em quatro aquários, dois para o grupo controle e dois para inoculação celomática para produção de anticorpos anti-S. agalactiae. No 21° e 28° dias, foi coletado sangue para obtenção de soro hiperimune utilizado na transferência passiva. Em seguida, 30 tilápias foram distribuídas em três aquários e submetidas a três tratamentos: GI: controle; GII: imunizadas com o soro inativado; GIII: imunizadas com soro ativo. Após 48 horas e sete, 14, 21, 28 e 35 dias, foram realizadas coletas de sangue para titulação de anticorpos anti-S. agalactiae utilizando-se o teste de aglutinação direta. Para avaliar a taxa de sobrevivência, outras 30 tilápias foram distribuídas em três aquários e submetidas a três tratamentos (GI: controle; GII: imunizadas com soro inativado; GIII: imunizadas com soro ativo). Após 48 horas da imunização, as tilápias foram desafiadas via celomática com 100µL de S. agalactiae e avaliadas duas vezes ao dia, pelo período de 35 dias. Os resultados dos títulos séricos de anticorpos foram detectados pela aglutinação direta até o 21° dia pós-transferência passiva, e, no mesmo período, houve proteção de 80% entre os grupos imunizados com soro inativado e soro ativo contendo anticorpos anti-S. agalactiae. Ao final, os grupos soro inativado e soro ativo apresentaram 60 e 80% de proteção, respectivamente, enquanto no grupo controle 100% dos peixes adoeceram, apresentando sinais graves da infecção, e foram eutanasiados. Não houve diferença estatística significativa na taxa de proteção entre os grupos imunizados