UPLC-MS-ESI-QTOF analysis and antifungal activity of the spondias tuberosa arruda leaf and root hydroalcoholic extracts

The aim of this study was to identify and evaluate the chemical compositions and effects of the S. tuberosa leaf and root hydroalcoholic extracts (HELST and HERST) against different strains of Candida. Chemical analysis was performed by Ultra-Performance Liquid Chromatography Coupled to Quadrupole/Time of Flight System (UPLC-MS-ESI-QTOF). The Inhibitory Concentration of 50% of the growth (IC50) as well as the intrinsic and combined action of the extracts with the antifungal fluconazole (FCZ) were determined by the microdilution method while the minimum fungicidal concentrations (MFCs) and the effect on fungal morphological transitions were analyzed by subculture and in humid chambers, respectively. From the preliminary phytochemical analysis, the phenols and flavonoids were the most abundant. The intrinsic IC50 values for HELST ranged from 5716.3 to 7805.8 \ub5g/mL and from 6175.4 to 51070.9 \ub5g/mL for the HERST, whereas the combination of the extracts with fluconazole presented IC50 values from 2.65 to 278.41 \ub5g/mL. The MFC of the extracts, individually, for all the tested strains was 6516384 \ub5g/mL. When fluconazole was combined with each extract, the MFC against CA URM 5974 was reduced (HELST: 2048 and HERST: 4096 \ub5g/mL). Synergism was observed against standard C. albicans (CA) and C. tropicalis (CT) strains and with the root extract against the CT isolate. The leaf extract inhibited the morphological transition of all strains while the root extract inhibited only CT strains

Análise fitoquímica e atividade antifúngica do óleo essencial de folhas de Lippia sidoides Cham. e do Timol contra cepas de Candida spp

RESUMO A resistência de fungos do gênero Candida aos fármacos químicos tem lançado o desafio de se identificar novas substâncias que possuam atividade antibiótica ou venham a modular o efeito de produtos atualmente usados contra candidíase. O presente estudo avaliou a atividade antifúngica do óleo essencial de Lippia sidoides Cham. e do timol, sobre cepas de Candida. Inicialmente os produtos foram testados frente a 16 cepas fúngicas pela técnica de difusão em meio sólido, o que permitiu selecionar linhagens para continuidade da pesquisa. Com as linhagens de Candida krusei (CK LMBM 01, CK LMBM 02), Candida albicans (CA LM 62) e Candida tropicalis (CT LM 20), procedeu-se, por microdiluição em caldo, a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e em meio sólido, a Concentração Fungicida Mínima (CFM) dos produtos foi identificada. O microcultivo das leveduras em meio empobrecido foi realizado para verificação de alterações morfológicas e, além disso, uma análise da composição química do óleo foi realizada por Cromatografia Gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM). Nesta análise, o constituinte majoritário foi o timol (84,95%), seguido de compostos como p-cimeno e Éter metil carvacrol, entre outros. A CIM do óleo essencial de Lippia sidoides Cham. frente às cepas variou entre 64 e 256 μg/mL, enquanto a CIM do timol foi estabelecida entre 32 e 64 μg/mL. A CFM do óleo essencial foi determinada entre 128 e 512 μg/mL e para o timol foram encontrados valores entre 64 e 128 μg/mL. Em relação à análise micromorfológica, verificada nas concentrações de CIM e CIM x 2, o óleo essencial inibiu o dimorfismo das cepas CK 01 e CT 20 na CIM e quando foi ensaiado o timol, este, na CIM, impediu a transição morfológica das cepas CK 01 e CA 62. Uma redução da morfogênese também foi obsevada na cepa CT 20, porém apenas em CIM x 2 e de forma mais discreta. Os resultados enaltecem o potencial antifúngico de L. sidoides e de seu composto majoritário timol tanto no combate à Candida quanto na neutralização de um dos fatores de virulência, a capacidade invasiva por formação de hifas e pseudohifas verificado na condição patogênica da candidíase. Estes dados são promissores e poderão incentivar futuras pesquisas sobre os aspectos fitoquímicos, toxicológicos e farmacológicos tanto do óleo essencial de Lippia sidoides como também de seus componentes químicos

Monogenoidea (Dactylogyridae) em tilápias-do-nilo cultivadas sob diferentes densidades de estocagem em tanques-rede Monogenoidea (Dactylogyridae) in Nile tilapia cultured under different stocking densities in cages

Avaliaram-se a prevalência e a intensidade de infecção por Monogenoidea em tilápias-do-nilo (Oreochromis niloticus) cultivadas sob diferentes densidades de estocagem em tanques-rede de 4m³. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso, com quatro tratamentos - densidades (D) de D1=250, D2=300, D3=350 e D4=400 peixes/m³, três repetições por tratamento, utilizando-se 360 peixes capturados e analisados no período de fevereiro a junho de 2003. Os parâmetros físico-químicos da água foram mensalmente monitorados. Observaram-se prevalências de 52,8; 62,5; 69,4; 83,3; 58,3% e intensidade média parasitária de 112,8; 65,7; 274,0; 97,8; 100,2 de Dactylogyrus sp. (Monogenoidea: Dactylogyridae). Não houve relação da prevalência e intensidade de infecção com a densidade de cultivo, porém foi verificado efeito quadrático (P<0,05) da intensidade parasitária em função do mês. Verificaram-se maior intensidade média de infecção (274) e elevada prevalência (83,3%) nos meses em que a temperatura e a transparência da água oscilaram abaixo dos limites recomendados para o conforto térmico e bem-estar das tilápias.<br>The prevalence and infection intensity of Monogenoidea in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) cultivated under different stocking densities in 4m³ cages were evaluated. The experiment was designed in sample random sampling with four treatments - densities (D) of D1=250, D2=300, D3=350, and D4=400 fish/m³- and three repetitions, using 360 fish captured and analyzed during the period from February to June 2003. Physiochemical parameters of the water were monthly monitored. Prevalences of 52.8; 62.5; 69.4; 83.3; and 58.3% and parasitic mean intensities of 112.8; 65.7; 274.0; 97.8; and 100.2 Dactylogyrus sp. (Monogenoidea: Dactylogyridae) were observed. No relationship between the prevalence and infection intensity with the cultivation density was found. However, quadratic effect was verified (P<0.05) related to the parasitic intensity in function of the month. High mean intensity of infection (274) and high prevalence (83.3%) were verified in the months in that the temperature and the transparency of the water oscillated below the recommended limits for the thermal comfort and well-being of tilapia