Microbiota ileal de frangos de corte submetidos a diferentes dietas Ileal microbiota of broilers fed different diets

Este estudo foi conduzido para analisar as alterações do perfil microbiano da digesta ileal de frangos de corte alimentados com dietas contendo diferentes níveis de energia e aditivos. Foram preparadas duas dietas: uma à base de milho e farelo de soja com nível de energia padrão e outra de baixa energia com milho e os farelos de soja e trigo. Para cada nível de energia, foram ou não acrescentados o probiótico Enterococcus faecium; as enzimas xilanase, amilase mais &#946;-glucanase; e a combinação do probiótico com as enzimas, resultando em 8 tratamentos. As aves foram distribuídas em delineamento inteiramente ao acaso com arranjo fatorial 2 × 4 e cada tratamento teve 5 repetições de 12 aves. Aos 19 dias, uma ave de cada repetição foi abatida e o conteúdo ileal coletado e armazenado a -24 ºC. Foram feitas as extrações do DNA do microrganismo probiótico e da microbiota ileal utilizando-se o kit QIAamp DNA Stool, conforme as recomendações do fabricante. As amostras extraídas foram amplificadas por PCR. Utilizou-se a técnica de eletroforese em gel com gradiente desnaturante para caracterização do perfil da microbiota ileal e do probiótico utilizado nas dietas. Todos os tratamentos apresentaram padrões de amplicons diferentes, com exceção das enzimas isoladas e em combinação nas dietas com energia padrão. O perfil do microrganismo probiótico esteve ausente em todas as dietas. Os aditivos introduzidos às dietas foram capazes de alterar a microbiota digestiva do lúmem ileal, porém o probiótico utilizado não foi capaz de colonizar o trato ileal dos frangos de corte.<br>The study was conducted to analyze alterations in the microbiological profile of the ileal digesta of broilers fed different levels of energy and additives. A standard diet based on corn-soybean meal and a low energy diet based on corn, soybean and wheat bran were prepared. Either Enterococus faecium probiotic or xylanase, amylase plus &#946;-glucanase enzymes or the mix of probiotic and exzymes were added or not to each energy level, resulting in eight treatments. Birds were distributed in a 2 × 4 factorial arrangement in a completely randomized design, and each treatment had 5 replications of 12 birds. One bird of each repetition was slaughtered at 19 days of age and the ileal contents were collected and stored at -24 ºC until analysis. DNA was extracted from the microorganism probiotic and ileal content using the QIAamp DNA Stool kit following the recommendations of the manufacturer. The extracted samples were amplified by PCR and the ileal microbiota and probiotic profiles were characterized using denaturing gradient gel electrophoresis. The results show that all treatments resulted in different profiles of amplicons, except for enzymes alone or mix with probiotic in the standard energy diet. The probiotic microorganism profile was absent in all diets. The use of additives changed the digestive microbiota in the ileum, although the probiotic was not capable of colonizing the ileum of the birds

Molecular methods to evaluate effects of feed additives and nutrients in poultry gut microflora Metodologias moleculares para avaliar efeitos de aditivos e nutrientes na microflora intestinal das aves

Intestines of each animal are the niche of a complex and dynamic ecosystem with important effects to the host. The members or final products of this ecosystem influence nutrient digestion, absorption, mucosa metabolism, general physiology, and local and systemic immunological responses of avian hosts. Better understanding of the avian gut microbial ecosystem may lead to improvements on poultry productivity, health, welfare, and reduction of food borne pathogens and the environmental impact of poultry production for a more sustainable industry. Molecular methods of microbial ecology are key tools to gain this knowledge. The objective of this presentation is to outline the basic concepts, applications, advantages, limitations, and evolution of these molecular methods used to study intestinal microbial ecology. The final goal is to stimulate their application in poultry applied research and development of new feed additives. Some practical examples in poultry research will be described to illustrate their relevance to advance in control methods for pathogens, avoid or manage disbiosis or subclinical intestinal diseases, reduce environmental impact, elucidate effects of nutrients in gut mucosa, microflora, and in general to improve poultry performance.<br>O intestino de cada animal é o nicho de um ecossistema complexo e dinâmico com efeitos importantes para o hospedeiro. As comunidades microbianas componentes deste ecossistema e/ou os produtos finais do metabolismo influenciam a digestão e absorção de nutrientes, o metabolismo das mucosas, a fisiologia geral e as respostas imunitárias locais e gerais da ave hospedeira. A melhor compreensão do ecossistema microbiano do intestino das aves pode levar a melhorias na produtividade, saúde, bem estar, e redução de agente patogênicos dos alimentos e do impacto ambiental da produção avícola para uma indústria mais sustentável. Os métodos moleculares da ecologia microbiana são ferramentas chaves para obter este conhecimento. O objetivo desta apresentação é descrever os conceitos básicos, aplicações, vantagens, limitações, e evolução destes métodos moleculares usados para estudar a ecologia microbiana do intestino. A meta final é estimular sua aplicação em pesquisa avícola aplicada e desenvolvimento de novos aditivos para alimentos. Alguns exemplos práticos em pesquisa avícola serão descritos para ilustrar sua relevância para avançar em métodos de controle de agentes patogênicos, evitar ou manejar a disbiose ou doenças intestinais sub-clínicas, reduzir o impacto ambiental, esclarecer os efeitos dos nutrientes na mucosa intestinal, a microflora e, em geral, melhorar o desempenho das aves