ATPase and Multidrug Transport Activities of the Overexpressed Yeast ABC Protein Yor1p

The Saccharomyces cerevisiae genome encodes 15 full-size ATP binding cassette transporters (ABC), of which PDR5, SNQ2, and YOR1 are known to be regulated by the transcription factors Pdr1p and Pdr3p (pleiotropic drug resistance). We have identified two new ABC transporter-encoding genes, PDR10 and PDR15, which were up-regulated by the PDR1-3 mutation. These genes, as well as four other ABC transporter-encoding genes, were deleted in order to study the properties of Yor1p. The PDR1-3 gain-of-function mutant was then used to overproduce Yor1p up to 10% of the total plasma membrane proteins. Overexpressed Yor1p was photolabeled by [gamma-32P]2', 3'-O-(2,4,6-trinitrophenyl)-8-azido-ATP (K0.5 = 45 microM) and inhibited by ATP (KD = 0.3 mM) in plasma membranes. Solubilization and partial purification on sucrose gradient allowed to detect significant Yor1p ATP hydrolysis activity (approximately 100 nmol of Pi.min-1.mg-1). This activity was phospholipid-dependent and sensitive to low concentrations of vanadate (I50 = 0.3 microM) and oligomycin (I50 = 8.5 microg/ml). In vivo, we observed a correlation between the amount of Yor1p in the plasma membrane and the level of resistance to oligomycin. We also demonstrated that Yor1p drives an energy-dependent, proton uncoupler-insensitive, cellular extrusion of rhodamine B. Furthermore, cells lacking both Yor1p and Pdr5p (but not Snq2p) showed increased accumulation of the fluorescent derivative of 1-myristoyl-2-[6-(NBD)aminocaproyl]phosphatidylethanolamine. Despite their different topologies, both Yor1p and Pdr5p mediated the ATP-dependent translocation of similar drugs and phospholipids across the yeast cell membrane. Both ABC transporters exhibit ATP hydrolysis in vitro, but Pdr5p ATPase activity is about 15 times higher than that of Yor1p, which may indicate mechanistic or regulatory differences between the two enzymes

Development of Validation Protocol for Activated Sludge Process in Water Recycling

"NATVAL 2.2 Sub Project 3" -- p.

Gyllene snittet och geometriförståelse på gymnasiet

Abstrakt Examensarbete i matematik för lärare, Titel: Gyllene snittet och geometriförståelse på gymnasiet. Författare: Simon Larsson Termin och år: VT 2015 Kursansvarig institution: Matematiska Vetenskaper Handledare: Jonny Lindström Examinator: Laura Fainsilber Rapportnummer: Nyckelord: Matematik, geometri, gyllene snittet, matematiska begrepp, Van Hiele-nivåer, förståelse, inlärning. Syftet med mitt arbete är att utreda vad det gyllene snittet innebär, samtidigt som detta förhoppningsvis ger mig en grund för att senare i arbetslivet kunna använda mig av denna kunskap för att konstruera matematikuppgifter som dels innefattar den mystik som finns kring gyllene snittet, men även ta ut eleverna mer i verkligheten och genom gyllene snittet visa hur matematik dyker upp på oväntade platser omkring oss där deras förmåga att analysera geometri blir bättre. Speciellt som både matematik- och naturkunskapslärare är det av intresse för mig, då naturen är en vanlig plats där detta snitt dyker upp. Den andra delen av uppgiften går dels ut på att undersöka hur elever i gymnasiet, årskurs två tolkar och utför geometri men även hur lärare utför och förhåller sig till geometriundervisningen. Uppgiften som eleverna löste var i grupper av tre, där jag spelade in elevernas samtal för att sedan kunna analysera dem. Jag kommer med hjälp av Van Hielenivåer försöka kategorisera var deras förståelse ligger samtidigt som jag isolerar vilken nivå som det möjligtvis finns kunskapsbrister på och föreslå vad som kan göras för att åtgärda dessa brister. Det framkom tydligt hur elevernas förmåga att ta fram tidigare inhämtad kunskap i en situation utan instruktioner var svårt för dem, där brist i deras analytiska förmåga var mest framträdande