Mesenchymal Stem Cell Manufacturing for Clinical Use

Mesenchymal stromal/stem cells (MSCs) are adult, self-renewable, multipotent cells that can be isolated in various tissues, most commonly bone marrow (BM) and adipose tissue. Because of their capacity for self-renewal and differentiation into tissues of mesodermal origin and due to their immunomodulatory ability, MSCs are used in many preclinical and clinical studies as possible new therapeutic agents for the treatment of a very broad range of conditions, including heart, hepatic, and neurodegenerative diseases

A low-cost Portable Device to Deliver Smoke, Volatile or Vaporized Substances to Drosophila melanogaster, Useful for Research and/or Educational Assays

Drosophila melanogaster has been used to test drugs of abuse, substances with potential benefits for medical purposes, as well as contaminants and hazardous volatile compounds. This model has also been used for the characterization of behavioral changes, physiopathological consequences, and subcellular mechanisms of the use of cocaine, methamphetamines, ethanol, nicotine, cannabinoids, toluene, and other airborne volatile organic compounds. When testing these substances, routes of administration are important to define. Admixing the test compounds with water or food is one suitable option in many cases, but the inhalation route is especially suitable when the administration of one or more volatile compounds is desired. One advantage of the administration of substances via the inhalation route is its rapid exchange and distribution throughout the cuticle and the tracheal system. In addition, this route allows treating a large group of individuals simultaneously. Moreover, the inhalation route is frequently used to administer different drugs to humans. A good model system shares physiology and molecular pathways with humans, and D. melanogaster possesses almost 75% homologous genes associated with human diseases. Methodologies to deliver the abovementioned substances usually include customized devices. Herein, we focus on the development of a low-cost customized device useful to deliver smoke or vaporizable compounds to D. melanogaster. This approach might be applied for acute or chronic exposure to vaporized substances. In particular, our device was utilized for testing cigarette smoke and vaporized cannabis extract on cardiac performance of adult individuals during chronic treatment. We are describing how to set up this low-cost portable device, useful for research and/or educational assays, taking advantage of the amenability of D. melanogaster to test different compounds in relatively short periods, and especially including a large number of individuals at the same time.Fil: Santalla, Manuela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigaciones Cardiovasculares "Dr. Horacio Eugenio Cingolani". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Centro de Investigaciones Cardiovasculares "Dr. Horacio Eugenio Cingolani"; ArgentinaFil: Gómez, Ivana María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigaciones Cardiovasculares "Dr. Horacio Eugenio Cingolani". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Centro de Investigaciones Cardiovasculares "Dr. Horacio Eugenio Cingolani"; ArgentinaFil: Valverde, Carlos Alfredo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigaciones Cardiovasculares "Dr. Horacio Eugenio Cingolani". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Centro de Investigaciones Cardiovasculares "Dr. Horacio Eugenio Cingolani"; ArgentinaFil: Ferrero, Paola Viviana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigaciones Cardiovasculares "Dr. Horacio Eugenio Cingolani". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Centro de Investigaciones Cardiovasculares "Dr. Horacio Eugenio Cingolani"; Argentina. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires; Argentin

CARACTERIZACIÓN DE LA ADMINISTRACIÓN DE CANNABIDIOL (CBD) SOBRE LOS EFECTOS MOTORES Y CARDÍACOS EN UN MODELO GENÉTICO DE PARKINSONISMO EN Drosophila melanogaster. CBD

La enfermedad de Parkinson (EP) es la segunda enfermedad neurodegenerativa más frecuente en humanos (Rodrigues et al., 2019) y se manifiesta por el deterioro progresivo de las funciones motoras (Aminoff et al., 1998). Las formas hereditarias de la EP son causadas por mutaciones en genes que codifican proteínas claves en el desarrollo de la fisiopatología de la enfermedad, como DJ-1 y parkin. Aunque el motivo exacto de la neurodegeneración no se conoce, se sabe que existen diferentes procesos que convergen dando como resultado la acumulación de dopamina en el citoplasma de las neuronas. Dada la alta susceptibilidad de este neurotransmisor para oxidarse, se conduce a una sobreproducción de especies reactivas del oxígeno (EROs), que sumada a la falla en los sistemas antioxidantes del cuerpo (frecuentes en individuos con EP) inducen la neurodegeneración. Actualmente, se propone que la disfunción mitocondrial podría estar involucrada en el desarrollo de la EP debido al rol preponderante que tienen las mitocondrias en el mantenimiento de la bioenergética celular, la producción de EROs y el control de la apoptosis. Distintos estudios han demostrado que la disfunción mitocondrial induce la producción crónica de EROs y causa la muerte de neuronas dopaminérgicas (Bose et al., 2016). Por su parte, las células cardíacas también pueden ser susceptibles a las mutaciones sistémicas que originan la EP. De hecho, se ha evidenciado una correlación entre esta enfermedad y el desarrollo de patologías cardíacas. El corazón es un órgano muy susceptible al estrés oxidativo y sumamente dependiente del correcto funcionamiento de las mitocondrias. Por lo tanto, condiciones que involucren disfunción mitocondrial y sobreproducción de EROs podrían estar relacionadas al desarrollo de comorbilidades cardíacas. Debido a la importancia que el estrés oxidativo posee en la fisiopatología de la EP es que el estudio de compuestos antioxidantes como posibles tratamientos ha tomado mayor envergadura en los últimos años. En este marco, se propone caracterizar el fenotipo de parkinsonismo a nivel motor y la función cardíaca en un modelo genético de parkinsonismo en Drosophila melanogaster, que presenta deleciones sistémicas de las 2 isoformas de DJ-1 (mutaciones en este gen causan EP de inicio temprano en humanos). A su vez, se propone estudiar los efectos de la administración crónica del cannabidiol (CBD), principio activo derivado de la planta de Cannabis sativa L. con demostrada acción antioxidante y neuroprotectora. De esta forma, se espera evaluar no sólo el efecto del tratamiento sobre los síntomas motores, sino también el impacto cardíaco de la administración de este compuesto

Effect of In Vitro Exposure of Corticosteroid Drugs, Conventionally Used in AMD Treatment, on Mesenchymal Stem Cells

Age-related macular degeneration (AMD) is a leading cause of legal blindness in individuals over 60 years of age, characterized by the dysfunction of retinal pigmented epithelium cells, specifically in the macular area. Despite several treatment options, AMD therapy remains difficult, especially for exudative AMD. Multipotent mesenchymal stem cells (MSCs), with great plasticity and immunomodulant properties, are a promising cell source for cellular therapy and tissue engineering. We evaluated the effects of steroid drugs, often used to treat AMD, in association with MSCs, in view of a possible application together to treat AMD. Morphology, viability, growth kinetics, and immunophenotype were evaluated on healthy donors' MSCs, treated with triamcinolone acetonide, alcohol-free triamcinolone acetonide, micronized intravitreal triamcinolone and dexamethasone at different concentrations, and in a human retinal pigment epithelial cell line supernatant (ARPE-19). The morphological analysis of MSCs in their standard medium showed a negative correlation with drug concentrations, due to the numerous crystals. Dexamethasone was the least toxic corticosteroid used in this study. ARPE-19 seemed to help cells preserve the typical MSC morphology. In conclusion, this in vitro study demonstrated that high doses of corticosteroid drugs have a negative effect on MSCs, reduced in the presence of a conditioned media

Characterization of Cannabidiol (CBD) Administration on Motor and Cardiac Effects in a Genetic Model of Parkinsonism in <I>Drosophila Melanogaster</I>. CBD as a Possible Therapy

La enfermedad de Parkinson (EP) es la segunda enfermedad neurodegenerativa más frecuente en humanos (Rodrigues et al., 2019) y se manifiesta por el deterioro progresivo de las funciones motoras (Aminoff et al., 1998). Las formas hereditarias de la EP son causadas por mutaciones en genes que codifican proteínas claves en el desarrollo de la fisiopatología de la enfermedad, como DJ-1 y parkin. Aunque el motivo exacto de la neurodegeneración no se conoce, se sabe que existen diferentes procesos que convergen dando como resultado la acumulación de dopamina en el citoplasma de las neuronas. Dada la alta susceptibilidad de este neurotransmisor para oxidarse, se conduce a una sobreproducción de especies reactivas del oxígeno (EROs), que sumada a la falla en los sistemas antioxidantes del cuerpo (frecuentes en individuos con EP) inducen la neurodegeneración. Actualmente, se propone que la disfunción mitocondrial podría estar involucrada en el desarrollo de la EP debido al rol preponderante que tienen las mitocondrias en el mantenimiento de la bioenergética celular, la producción de EROs y el control de la apoptosis. Distintos estudios han demostrado que la disfunción mitocondrial induce la producción crónica de EROs y causa la muerte de neuronas dopaminérgicas (Bose et al., 2016).Universidad Nacional de La Plat