Hematological and hemostaseological alterations after warm and cold limb ischemia-reperfusion in a canine model Alterações hematológicas e hemostaseológicas após isquemia-reperfusão morna e fria de membro inferior em modelo canino

PURPOSE: Acute ischemia-reperfusion (I/R) of extremities means serious challenge in the clinical practice. Furthermore, the issue of preventive cooling is still controversial. In this canine model we investigated whether limb I/R -with or without cooling- has an influence on hematological and hemostaseological factors. METHODS: Femoral vessels were exposed and clamped for 3 hours. After release the clamps, 4-hour reperfusion was secured. The same procedures with cooling using ice bags, as well as warm and cold sham-operations were performed. Before operations, from the excluded limb by the end of ischemia, during the reperfusion, and for 5 postoperative days afterwards blood samples were collected for testing hematological and blood coagulation parameters. RESULTS: After I/R activated partial thromboplastin time was elongated on 2nd-4th postoperative days. The highest values were on the 2nd day in cold I/R group, accompanied by increased prothrombin time values. The hematological parameters and fibrinogen level showed non-specific changes. In excluded ischemic limb the blood composition showed controversial data. Cold ischemia induced larger alterations, however platelet count, hematocrit changed more expressly in warm ischemia. CONCLUSION: These results indicate the risk of coagulopathy following limb I/R on early post-eventually days, which risk is higher in the case of cold I/R.<br>OBJETIVO: Isquemia-Reperfusão aguda (I/R) de extremidades representa um desafio sério na prática clínica. Além disso, o tema de prevenção pelo resfriamento é ainda controverso. Nesse modelo canino, investigou-se se I/R de membros -com ou sem resfriamento- tem influência nos fatores hematológicos e hemostaseológicos. MÉTODOS: Os vasos femorais foram expostos e clampeados por 3 horas. Após liberação dos clampes, foi realizada a reperfusão por 4-horas. Os mesmos procedimentos com e sem resfriamento usando bolsas de gelo, assim como operações simuladas com e sem resfriamento foram realizados. Antes das operações, do membro excluído ao final da isquemia, durante a reperfusão e por 5 dias de pós-operatório, amostras sanguíneas foram colhidas para exames hematológicos e parâmetros de coagulação. RESULTADOS: Após I/R, o tempo de tromboplastina parcial ativada foi alargado no 2º.-4º. dias de pós-operatório. Os valores mais altos foram no 2º.dia no grupo deI/R fria, acompanhada pelo aumento dos valores do tempo de protrombina. Os parâmetros hematológicos e o nível de fibrinogênio mostraram mudanças não específicas. No membro isquêmico excluído a composição sanguínea mostrou dados controversos. A isquemia fria induziu maiores alterações, entretanto, a contagem de plaquetas e o hematócrito mudaram mais expressivamente na isquemia morna. CONCLUSÃO: Estes resultados indicam risco de coagulopatia após I/R de membros nos dias mais precoces após o evento, sendo mais elevado no caso da I/R fria

Effects of allopurinol and preconditioning on apoptosis due to ischemia-reperfusion on a double jejunum-segment canine model Efeitos do alopurinol e precondicionamento na apoptose devido a isquemia-reperfusão em duplo segmento de jejuno em cães

PURPOSE: To investigate the duration of apoptosis caused by ischemia-reperfusion in the intestine in a new double jejunum-segment model, and to analyze the protective effects of allopurinol or ischemic preconditioning (IPC). METHODS: In Experiment I for harvesting the double jejunum-segment model after laparotomy a 30-cm-long jejunum part was selected on mongrel dogs (n=24). End-to-end anastomoses were performed at both ends and in the middle of the jejunum part, creating two equal segments. In one segment ischemia was induced by occluding the supplying vessels, the other segment served as control. Tissue samples for detecting apoptosis were taken at 30th minutes, 1st, 2nd, 4th, 6th, 8th, 12th and 24th hours of reperfusion. In Experiment II using the same model the 4-hour reperfusion time period, allopurinol (50 mg/kg) pre-treated and IPC (3 cycles of 5x1) groups (n=5 per each) were also investigated. RESULTS: In Experiment I the greatest apoptotic activity was detected at the 4th and 6th hour of reperfusion (14.2 ± 1.31 and 16.3 ± 1.05 per visual field at 40x magnification). In Experiment II Using the 4-hour reperfusion time period allopurinol pre-treatment increased the apoptotic activity (10.72 ± 0.47 per 50 intestinal villi) approximately two-fold than the IPC (6.72 ± 0.46 per 50 intestinal villi) did (p<0.05). CONCLUSIONS: Apoptotic activity has a characteristic time curve, reaching the highest values between the 4th and 6th hours after 30-minute intestinal ischemia. Ischemic preconditioning seemed to be protective against the morphological changes caused by intestinal ischemia-reperfusion.<br>OBJETIVO: Investigar a duração da apoptose causada pela isquemia-reperfusão no intestino em um novo modelo de duplo segmento de jejuno e analisar os efeitos protetores do alopurinol ou precondicionamento isquêmico (IPC). MÉTODOS: No experimento I para obter o modelo do duplo segmento de jejuno, após a laparotomia, uma parte de 30cm de comprimento de jejuno foi selecionada em cães mestiços (n=24). Anatomoses T-T foram realizadas em ambas as extremidades no meio do segmento de jejuno, criando dois segmentos iguais. Em um segmento foi induzida isquemia por oclusão dos vasos que o irrigavam e o outro segmento foi usado como controle. Amostras de tecido para detecção da apoptose foram obtidos aos 30 minutos, 1h, 2h, 4h, 6h, 8h, 12h e 24 horas de reperfusão. No experimento II usando o mesmo modelo, no tempo de reperfusão de 4 horas, foram investigados dois outros grupos (n=5 cada) usando precondicionamento com alopurinol (50 mg/kg) e IPC (3 ciclos de 5x1). RESULTADOS: No experimento I a maior atividade de apoptose detectada foi às 4h e 6h de reperfusão (14,2 ± 1,31 e 16,3 ± 1,05 no campo visual de 40x). No experimento II usando o período de 4horas de reperfusão o pré-tratamento com alopurinol aumentou a atividade apoptótica (10,72 ± 0,47) aproximadamente 2 vezes mais do que o IPC (6,72 ± 0,46) (p<0,05). CONCLUSÕES: A atividade de apoptose tem uma curva caractetística, atingindo maiores valores entre a 4ª e a 6ª horas após 30 minutos de isquemia intestinal. O precondicionamento isquêmico parece proteger contra alterações morfológicas causadas pela isquemia-reperfusão intestinal

Following-up hemorheological consequences of gonadectomy in male and female rats

Growing number of clinical and experimental data reflect to the gender differences of hemorheological parameters.However, little is known about the potential hemorheological effect of gonadectomy and consequent changes in sex hormoneconcentration. Adult, same-aged male and female rats were involved in the study. In control male and female group no surgicalintervention was performed. In gonadectomized (GoE) male and female groups bilateral orchidectomy or ovariectomy werecompleted. Body weight measurement and blood sampling were carried out in the 1st, 2nd and 3rd postoperative months.The GoE females had significant bodyweight augmentation and their plasma estrogen concentration decreased by 40?45%by the 1st postoperative month, while in males the testosterone level was not detectable after gonadectomy. Leukocyte andplatelet counts moderately increased in GoE males. Elongation index values of erythrocytes slightly decreased in both gendersafter gonadectomy, showing converging values. Erythrocyte aggregation index values of GoE females significantly raised bythe 2nd month. It can be concluded that gonadectomy in rats resulted in alteration (dominantly impairment) of blood microrheologicalparameters, by different manner in males and females. Supposedly decrease in estrogen can cause more expressedhemorheological changes than the cessation of testosteron