Achados patológicos e imuno-histoquímicos em bovinos com doença granulomatosa sistêmica pelo consumo de Vicia villosa (Leg. Papilionoideae) no Rio Grande do Sul

A doença granulomatosa sistêmica associada ao consumo de Vicia villosa (Leg. Papilionoideae) foi diagnosticada em 5 bovinos no período de 2005 a 2008. Os bovinos apresentavam alopecia, lesões crostosas na pele, prurido, febre, queda da produção leiteira, anorexia e emagrecimento. O curso clínico médio da doença foi de 2 semanas. Dos bovinos analisados três morreram e dois foram eutanasiados. As lesões macroscópicas de alopecia e crostas na pele eram localizadas principalmente na face e pescoço. Observava-se nódulos multifocais a coalescentes branco-acinzentados que infiltravam vários órgãos especialmente em linfonodos, rins e coração. As lesões microscópicas consistiam na infiltração de linfócitos, macrófagos, células epitelioides, células gigantes multinucleadas, eosinófilos e plasmócitos. Linfonodos, rins, adrenal, baço e fígado de todos os bovinos apresentaram infiltrado granulomatoso, porém de intensidade variável. Nos testes imuno-histoquímicos dos órgãos com infiltrado inflamatório, as principais células visualizadas foram os linfócitos T, seguidos de macrófagos/células epitelioides/células gigantes multi-nucleadas e os linfócitos B foram raramente detectados nos locais de inflamação granulomatosa. O número reduzido de células marcadas por Ki-67 nas lesões granulomatosas, tende a indicar que a proliferação celular não foi responsável pela hipercelularidade das lesões e que o recrutamento de macrófagos e linfócitos para o local da inflamação provavelmente tenha sido o responsável pelo acúmulo de células no infiltrado inflamatório

A novel mechanism of functional cooperativity regulation by thiol redox status in a dimeric inorganic pyrophosphatase

Inorganic PPases are essential metal-dependent enzymes that convert pyrophosphate into orthophosphate. This reaction is quite exergonic and provides a thermodynamic advantage for many ATP-driven biosynthetic reactions. We have previously demonstrated that cytosolic PPase from R. microplus embryos is an atypical Family I PPase. Here, we explored the functional role of the cysteine residues located at the homodimer interface, its redox sensitivity, as well as structural and kinetic parameters related to thiol redox status. Methods In this work, we used prokaryotic expression system for recombinant protein overexpression, biochemical approaches to assess kinetic parameters, ticks embryos and computational approaches to analyze and predict critical amino acids as well as physicochemical properties at the homodimer interface. Results Cysteine 339, located at the homodimer interface, was found to play an important role in stabilizing a functional cooperativity between the two catalytic sites, as indicated by kinetics and Hill coefficient analyses of the WT-rBmPPase. WT-rBmPPase activity was up-regulated by physiological antioxidant molecules such as reduced glutathione and ascorbic acid. On the other hand, hydrogen peroxide at physiological concentrations decreased the affinity of WT-rBmPPase for its substrate (PPi), probably by inducing disulfide bridge formation. Conclusions Our results provide a new angle in understanding redox control by disulfide bonds formation in enzymes from hematophagous arthropods. The reversibility of the down-regulation is dependent on hydrophobic interactions at the dimer interface. General significance This study is the first report on a soluble PPase where dimeric cooperativity is regulated by a redox mechanism, according to cysteine redox status

Biological parameters of larvae, nymphs, and engorged females of Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (Acari: Ixodidae) obtained from artificial and successive infestations on Oryctolagus cuniculus (Linnaeus, 1758) (Lagomorpha: Ochotonidae) Parâmetros biológicos de larvas, ninfas e fêmeas ingurgitadas de Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (Acari:Ixodidae) obtidas de infestações artificiais e sucessivas em Oryctolagus cuniculus (Lagomorpha:Ochotonidae)

The development of acquired resistance to Amblyomma cajennense ticks was evaluated. A total of 18 rabbits were uniformly distributed into three groups named GL, GN, and GA that were submitted to three consecutive infestations with, respectively, larvae, nymphs, and adults of A. cajennense. After the infestations, the parasitic and reproductive parameters of recovered instars were evaluated. A significant reduction of recovery rates of inoculated ticks was observed only after the third infestation of animals in groups GL and GN (P<0.01). The modal day for drop-off of engorged larvae and nymphs increased along the infestations. The recovered engorged nymphs presented a significant reduction of the mean body weight between the first and the third infestations (P<0.01). A significant reduction in the mean recovery rate of engorged females was only observed during the third infestation. However, significant reductions (P<0.05) in body weight, egg mass weight, and larva eclosions were observed for recovered engorged females after the second infestation onwards. The results suggest the occurrence of resistance of rabbits to A. cajennense infestations, being more evident against the adult stage.<br>Avaliou-se o desenvolvimento de resistência adquirida frente ao parasitismo por Amblyomma cajennense. Para tanto, 18 coelhos foram uniformemente distribuídos em três grupos denominados GL, GN e GA e submetidos a três infestações consecutivas por, respectivamente, larvas, ninfas ou adultos de A. cajennense. Após a infestação, estudaram-se os parâmetros parasitários e reprodutivos dos exemplares recuperados. Apenas a partir da terceira infestação dos animais dos grupos GL e GN, pôde-se observar uma queda significativa na taxa de recuperação dos ixodídeos inoculados (P<0,01). O dia modal de queda das larvas e ninfas recuperadas aumentou com o decorrer das infestações. As ninfas ingurgitadas recuperadas apresentaram uma redução significativa (P<0,01) no peso médio corporal entre a primeira e terceira infestação. Observou-se uma queda significativa na taxa média de recuperação das fêmeas ingurgitadas somente na terceira infestação (P<0,01). Todavia, a partir da segunda infestação observou-se nas teleóginas recuperadas, uma redução significativa no peso corporal, peso da postura e eclodibilidade das larvas (P<0,05). Os dados sugerem a ocorrência de resistência em coelhos à infestação por A. cajennense que foi mais evidente contra o estádio adulto