Dietary supplementation with lactobacilli improves emergency granulopoiesis in protein-malnourished mice and enhances respiratory innate immune response

This work studied the effect of protein malnutrition on the hemato-immune response to the respiratory challenge with Streptococcus pneumoniae and evaluated whether the dietary recovery with a probiotic strain has a beneficial effect in that response. Three important conclusions can be inferred from the results presented in this work: a) protein-malnutrition significantly impairs the emergency myelopoiesis induced by the generation of the innate immune response against pneumococcal infection; b) repletion of malnourished mice with treatments including nasally or orally administered Lactobacillus rhamnosus CRL1505 are able to significantly accelerate the recovery of granulopoiesis and improve innate immunity and; c) the immunological mechanisms involved in the protective effect of immunobiotics vary according to the route of administration. The study demonstrated that dietary recovery of malnourished mice with oral or nasal administration of L. rhamnosus CRL1505 improves emergency granulopoiesis and that CXCR4/CXCR12 signaling would be involved in this effect. Then, the results summarized here are a starting point for future research and open up broad prospects for future applications of probiotics in the recovery of immunocompromised malnourished hosts.Fil: Herrera, Héctor Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Centro de Referencia Para Lactobacilos; ArgentinaFil: Salva, Maria Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Centro de Referencia Para Lactobacilos; ArgentinaFil: Villena, Julio Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Centro de Referencia Para Lactobacilos; ArgentinaFil: Barbieri, Natalia Paola del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Centro de Referencia Para Lactobacilos; Argentina. Universidad Nacional de Chilecito; ArgentinaFil: Marranzino, Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Tucuman. Instituto Superior de Investigaciones Biologicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Centro de Referencia Para Lactobacilos; ArgentinaFil: Alvarez, Gladis Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Centro de Referencia Para Lactobacilos; Argentina. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Bioquímica Clinica I; Argentin

Estudio proteómico durante la degradación de fenantreno por Streptomyces sp. MC1

Las actividades antropogénicas impactan negativamente en el medioambiente, provocando efectos nocivos en ecosistemas y en la salud humana. El fenantreno (FEN), hidrocarburo policíclico aromático, puede encontrarse como contaminante de suelos producto de la industria petroquímica. La biorremediación mostró ser una herramienta eficiente frente a un derrame de petróleo. Diferentes estudios fisiológicos demostraron que la actinobacteria Streptomyces sp. MC1 es capaz de remover plaguicidas y metales pesados tales como Cr(VI). Sin embargo, su capacidad para degradar FEN y las posibles enzimas involucradas en su degradación, no fueron estudiadas. La proteómica libre de geles es una poderosa herramienta que se utiliza para dilucidar mecanismos involucrados en procesos fisiológicos microbianos. Con el fin de evaluar y comprender la degradación de FEN en Streptomyces sp MC1, se realizó un estudio proteómico cuantitativo libre de marcado basado en espectroscopia de masas (MS). Streptomyces sp. MC1 fue crecida durante 96h a 30°C en medio de cultivo mínimo líquido (MM) utilizando glicerol como fuente de carbono y suplementado con FEN. El crecimiento microbiano se cuantificó por peso seco, mientras que la concentración residual de FEN en el sobrenadante del cultivo se determinó por HPLC. Las proteínas utilizadas para los estudios proteómicos se obtuvieron a partir de células desarrolladas hasta fase logarítmica de crecimiento en ambas condiciones. Las células se sometieron a ruptura mecánica con nitrógeno líquido y las proteínas obtenidas fueron reducidas, alquiladas y precipitadas. Luego de ser resuspendidas y digeridas con tripsina se analizaron por LC-MS/MS. Para la identificación de las proteínas se utilizó el software Proteome Discoverer y la base de datos de proteínas de Streptomyces sp. MC1. La validación estadística y los parámetros de significancia fueron establecidos en base al análisis realizado con el software Perseus. Streptomyces sp. MC1 fue capaz de crecer en presencia de FEN, con valores de biomasa entre 0,01g/l y 0,3g/l. Se observó un 60% de remoción de FEN durante el período estudiado. El análisis proteomico mostró que en presencia de FEN, 94 proteínas aumentaron significativamente su abundancia, destacándose enzimas involucradas en las vías altas de la degradación de FEN. Nuestro estudio proteómico confirma, por primera vez, la capacidad fisiológica de MC1 para degradar fenantreno y nos permite dilucidar parcialmente los mecanismos de degradación para esta bacteria.Fil: Guerrero, Daiana Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Herrera, Héctor Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Sineli, Pedro Eugenio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Dávila Costa, José Sebastián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaVII Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química AmbientalSan LuisArgentinaSociedad Argentina de Toxicología y Química AmbientalUniversidad Nacional de San Lui

Oral administration of Lactobacillus fermentum CRL1446 improves biomarkers of metabolic syndrome in mice fed a high-fat diet supplemented with wheat bran

This work aimed to evaluate the effect of oral administration of probiotic Lactobacillus (L.) fermentum CRL1446, with feruloyl esterase (FE) activity, on metabolic biomarkers and intestinal microbiota of mice with high fat diet-induced Metabolic Syndrome (MS) and supplemented with wheat bran as a source ofesterified ferulic acid. Six-week-old male Swiss albino mice developed the components of MS when fed with high fat diet supplemented with wheat bran (HFD + WB) for 14 weeks. Positive impact of L. fermentum CRL1446 administration on these animals was reflected in a decrease in body weight gain and adiposity index compared to the animals that did not receive the probiotic strain. In addition, a decrease in plasma leptin levels, improvement of inflammatory profile, reduction of fatty infiltration in hepatocytes and modification of lipid profile (increased HDL-cholesterol and decreased LDL-cholesteroland triglyceride levels) were observed. On the other hand, L. fermentum CRL1446 reduced fasting glucose and insulin levels, improving the HOMA index in mice with MS. Postprandial glucose levels were also reduced in the oral glucose tolerance test. Consumption of L. fermentum CRL1446 with HFD + WB (HFD + WB-Lf mice group) had a great impact on host metabolism, modulating intestinal microbiota, with an increase in Bacteroidetes and a decrease in Firmicutes abundance being observed. Increased intestinal FE activity, improved oxidative status and increased abundance of 3-hydroxyphenylpropionic acid andbutyric acid concentration in colonic content, were also demonstrated in HFD + WB-Lf mice. Results obtained suggest that supplementation with L. fermentum CRL1446 enhances beneficial effects of a bran diet, attenuating the risk factors associated with MS.Fil: Russo, Matias Irineo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Márquez, María Antonela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Herrera, Héctor Matías. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; ArgentinaFil: Abeijon Mukdsi, Maria Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Saavedra, Maria Lucila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Hebert, Elvira Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Gauffin Cano, María Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Medina, Roxana Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Agronomía y Zootecnia; Argentin

Marcadores de inflamación y perfil lipídico en pacientes obesos

La obesidad es una enfermedad metabólica asociada a insulinorresistencia (IR) y a un estado proinflamatorio, constituyendo un factor de riesgo de diabetes tipo 2 y enfermedad cardiovascular. En condiciones de obesidad, el tejido adiposo sufre una remodelación que favorece la síntesis de adipoquinas proinflamatorias y reactantes de fase aguda que promueven una inflamación crónica de bajo grado. El objetivo de este trabajo fue estudiar los niveles plasmáticos de Fibrinógeno (Fg), PCR ultrasensible (uPCR), TNF-α y mieloperoxidasa (MPO) en pacientes obesos y su correlación con IR e índices antropométricos. Se estudiaron 54 pacientes obesos (20M/34F), de 48±11años, que fueron comparados con 20 individuos sanos de sexo y edades semejantes. En ambos grupos se midió peso, talla, circunferencia de cintura (CC), se calculó el índice de masa corporal (IMC) y se determinó: glucemia y perfil lipídico (Wiener Lab), TNF-α (R&D Systems), MPO (Binding Site Ltd.), Fg (Diag.Stago), Insulina (ECLIA) y se calculó el HOMA. Los datos se analizaron con el programa SPSS 25 y se expresaron como la media±DS. Se consideró significativo un p<0,05. Los pacientes obesos, presentaron valores aumentados de: Fg (385±117 vs. 275±32 mg/dl, p=0,004); uPCR (7,4±5,6 vs. 1,4±1,6 m/dl, p=0,001); Insulina (23±16 vs. 7,2±2,4 uUI/ml, p=0,001), HOMA (5,2±3,9 vs. 2,1±0,3 p=0,001), Colesterol total (223±47 vs. 187±22 mg/dl, p=0,04) y LDL-C (150±45 vs.118±49 mg/dl, p=0,046). Sin embargo, los valores de TNF-α y MPO no mostraron diferencias significativas con los controles. El IMC se correlacionó positivamente con insulina, HOMA, Fg y uPCR, mientras que el CC lo hizo con insulina, HOMA y uPCR. Los resultados sugieren la presencia de un estado inflamatorio de bajo grado asociado a IR en pacientes obesos.Fil: Aleman, Mariano Nicolás. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Luciardi, María Constanza. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Díaz, E. L.. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Mariani, A. C.. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Herrera, Héctor Matías. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Albornoz, Estela Roxana. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Valdez, M. E.. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; ArgentinaFil: Abregu, Adela Victoria. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaXXXVI Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de TucumánArgentinaAsociación de Biología de Tucumá

Biomarcadores de riesgo protrombótico en niños con diabetes tipo 1

Los factores de riesgo cardiovascular, incluida la diabetes, producen perturbación endotelial induciendo un microambiente proinflamatorio, protrombótico y antifibrinolítico. En niños y adolescentes diabéticos, el desarrollo de enfermedades cardiovasculares se produce precozmente. OBJETIVO: investigar el riesgo protrombótico en niños con diabetes tipo 1 (DT1) mediante pruebas globales de coagulación, niveles del Inhibidor del activador del plasminógeno 1 (PAI-1) y del ligando CD40 soluble (sCD40L) y analizar la correlación entre variables. METODOLOGÍA: Se estudiaron 35 niños con DT1 de 11 ± 2,5 años de edad, sin complicaciones vasculares y 20 controles, provenientes del Servicio de Endocrinología del Hospital del Niño Jesús. Se determinó recuento de plaquetas, Tiempo de Protrombina, Tiempo de Tromboplastina Parcial Activado y Fibrinógeno(Fg) (coagulómetro ACL 300, Research Instrumentation Laboratory, Italia). Se empleó métodos ELISA para PAI-1 (Asserachrom, Diagnostica Stago) y sCD40L (PeproTech, EEUU). El control glucémico se evaluó mediante glucemia en ayunas (método enzimático, Wiener Lab) y HbA1c (DCA 2000, Siemens). Los resultados se expresaron como la media ± DE y con el coeficiente de Pearson se investigó las correlaciones. El protocolo fue aprobado por Comité de Docencia e Investigación del Hospital y los padres firmaron un consentimiento informado. RESULTADOS: Los niños diabéticos tuvieron niveles más elevados de Fg (308±66 vs. 246±18 mg/dl), PAI-1 (41,6±12,0 vs. 11,0±1,0 ng/ml), sCD40L (1608±149 vs. 106±17 pg/ml) que los controles. PAI-1 y sCD40L se correlacionaron positivamente con glucemia, HbA1c, y Fg. CONCLUSIÓN: Los niveles elevados de Fg, PAI-1 y sCD40L reflejan un riesgo protrómbótico en la población de niños diabéticos estudiada.Fil: Abregu, Adela Victoria. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Luciardi, María Constanza. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; ArgentinaFil: Diaz, Eduardo Luis. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Aleman, Mariano Nicolás. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán; ArgentinaFil: Mariani, Agustina Cecilia Edith. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Albornoz, Estela Roxana. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Herrera, Héctor Matías. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Aguero, T. H.. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; ArgentinaFil: Bazán Muñoz, Carla Maria. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Bioquímica Clinica Aplicada. Cátedra de Practica Profesional; Argentina19° Reunión de Investigación en Ciencias de la SaludSan Miguel de TucumánArgentinaUniversidad Nacional de Tucumán. Facultad de Medicin

Can immunobiotics beneficially modulate hemato-immune responses in immunocompromised hosts?

In the present chapter, we revised the progress in the influence of immunobiotic LAB on cells involved in the innate and adaptive immune response with special emphasis in the recovery of the lymphopoiesis and myelopoiesis. The results described and discussed here showed that the deterioration of the immune system in immunocompromised hosts often involves the impairment of the bone marrow hematopoiesis. Hence, we can expect that the improvement of the immune response induced by probiotics in these populations is intimately related with the recovery of hematopoiesis. On the other hand several works have showed that circulating hematopoietic and progenitor stem cells may act as sentinels of infection, serve as readily available precursors of mature blood leukocytes, or participate as effectors themselves. Moreover, hematopoietic and progenitor stem cells can secrete inflammatory cytokines, chemokines, growth factors, and antimicrobial peptides and may participate in the response to invading pathogens. Then, the influence of immunobiotics on the recovery of hematopoietic cells could be useful in pathologies that affect the hematopoiesis, such as those associated to administration of immunosuppressive drugs. Even though many interactive events may be human specific, animal models will continue to bring important new insights into the mechanisms involved in immunobiotics actions. The influence of probiotic LAB on hematopoiesis is the result of the combinatory effects of different immune cells interacting with probiotics. Hence, further research is required to study the effect of specific probiotics in the recovery of hematopoiesis in immunocompromised hosts. However, the results revised here give the basis for future research applications.Fil: Salva, Maria Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Villena, Julio Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Herrera, Héctor Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Alvarez, Gladis Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia; Argentin

Quantitative proteomic and transcriptional analyses reveal degradation pathway of γ- hexachlorocyclohexane and the metabolic context in the actinobacterium Streptomyces sp. M7

Highly γ-hexachlorocyclohexane (lindane) contaminated areaswere reported worldwide. Low aqueous solubility and high hydrophobicitymake lindane particularly resistant to microbial degradation.Physiological and genetic Streptomyces features make this genus moreappropriate for bioremediation compared with others. Complete degradationof lindane was only proposed in the genus Sphingobium although themetabolic context of the degradation was not considered. Streptomyces sp.M7 has demonstrated ability to remove lindane from culture media andsoils. In this study, we used MS-based label-free quantitative proteomic,RT-qPCR and exhaustive bioinformatic analysis to understand lindanedegradation and its metabolic context in Streptomyces sp. M7. Weidentified the proteins involved in the up-stream degradation pathway. Inaddition, results demonstrated that mineralization of lindane is feasiblesince proteins from an unusual down-stream degradation pathway were alsoidentified. Degradative steps were supported by an active catabolism thatsupplied energy and reducing equivalents in the form of NADPH. To ourknowledge, this is the first study in which degradation steps of anorganochlorine compound and metabolic context are elucidate in abiotechnological genus as Streptomyces. These results serve as basementto study other degradative actinobacteria and to improve the degradationprocesses of Streptomyces sp. M7.Fil: Sineli, Pedro Eugenio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Herrera, Héctor Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Cuozzo, Sergio Antonio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Dávila Costa, José Sebastián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; Argentin

Análisis proteómico de la actinobacteria Streptomyces sp. Mc1 durante la remoción de cromo y degradación de fenantreno

Las actividades antropogénicas impactan negativamente en el medioambiente, provocandoefectos nocivos en ecosistemas y en la salud humana. El fenantreno (FEN), hidrocarburoaromático policíclico (HAP), puede encontrarse como contaminante de suelos, derivado de laindustria petroquímica. Los compuestos de cromo (Cr) provienen principalmente de lafabricación de acero, pinturas, tratamiento de maderas, entre otros. La contaminaciónambiental ha suscitado la necesidad de encontrar soluciones para contrarrestar sus efectos.La biorremediación es una tecnología para tratar sitios contaminados presentando ventajascon respecto a los métodos tradicionales. Diferentes estudios demuestran que laactinobacteria Streptomyces sp. MC1 es capaz de remover plaguicidas y metales pesadostales como Cr(VI). Sin embargo, su capacidad para degradar FEN y las posibles enzimasinvolucradas en su degradación son una incógnita. También se desconoce el contextometabólico celular de MC1 durante la remoción del cromo. El objetivo de este trabajo fueidentificar proteínas sobre-sintetizadas en presencia de Cr(VI) y FEN mediante estudiosproteómicos. La proteómica libre de geles es una herramienta que se utiliza para dilucidarmecanismos involucrados en procesos fisiológicos microbianos. Con el fin de evaluar ycomprender la degradación de FEN y remoción de Cr(VI) en Streptomyces sp. MC1, se realizóun estudio proteómico cuantitativo libre de marcado basado en espectroscopia de masas(MS). MC1 fue crecida durante 96 h a 30 °C y 150 rpm en medio de cultivo mínimo líquido,utilizando glicerol como fuente de carbono y suplementado con FEN o Cr(VI). El crecimientomicrobiano se cuantificó por peso seco, mientras que la concentración residual de FEN yCr(VI) en el sobrenadante del cultivo se determinó por HPLC y método colorimétrico dedifenilcarbazida respectivamente. Las proteínas utilizadas para los estudios proteómicos seobtuvieron a partir de células en fase logarítmica de crecimiento; se sometieron a rupturamecánica con nitrógeno líquido y las proteínas obtenidas fueron reducidas, alquiladas yprecipitadas. Luego de ser resuspendidas y digeridas con tripsina se analizaron por LCMS/MS. Para la identificación de las proteínas se utilizó el software Proteome Discoverer y labase de datos de proteínas de Streptomyces sp. MC1. La validación estadística y losparámetros de significancia fueron establecidos en base al análisis realizado con el softwarePerseus. Streptomyces sp. MC1 fue capaz de crecer en presencia de FEN y/o Cr(VI). Seobservó un 60% de remoción de FEN y 42% de cromo durante el período estudiado. El análisisproteómico mostró que en presencia de FEN, 66 proteínas aumentaron su abundancia demanera significativa (p<0,05), destacándose enzimas involucradas en las vías altas de ladegradación del hidrocarburo. En la condición con Cr(VI), 27 proteínas fueron sobrereguladassignificativamente (p<0,05), las cuales participan principalmente en el metabolismo generalde la célula y en la respuesta al estrés oxidativo. Por lo tanto, nuestro estudio proteómicopermitió dilucidar el contexto metabólico de Streptomyces sp. MC1 durante la remoción deCr(VI). Confirmó, por primera vez, la capacidad fisiológica de Streptomyces sp. MC1 paradegradar fenantreno, permitiendo dilucidar en parte, los mecanismos de degradación de estehidrocarburo.Fil: Guerrero, Daiana Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Herrera, Héctor Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Sineli, Pedro Eugenio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Cuozzo, Sergio Antonio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Dávila Costa, José Sebastián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaIII Jornadas de Microbiología sobre Temáticas Epecíficas del NOASan Miguel de TucumánArgentinaAsociación Argentina de Microbiologí

Lactobacillus rhamnosus CRL1505 nasal administration improves recovery of T-cell mediated immunity against pneumococcal infection in malnourished mice

Immunobiotic lactic acid bacteria have become an interesting alternative for the prevention of respiratory infections. Previously, we demonstrated that the nasal administration of Lactobacillus rhamnosus CRL1505, during repletion of malnourished mice, resulted in diminished susceptibility to the challenge with the respiratory pathogen Streptococcus pneumoniae. Considering the known alterations induced by malnutrition on T lymphocytes and the importance of this cell population on the protection against respiratory pathogens, we aimed to study the effect of L. Rhamnosus CRL1505 nasal administration on the recovery of T cell-mediated defences against pneumococcal infection in malnourished mice under nutritional recovery. Malnourished mice received a balanced conventional diet (BCD) for seven days or BCD for seven days with nasal L. Rhamnosus CRL1505 supplementation during last two days of the treatment. After the treatments mice were infected with S. Pneumoniae. Flow cytometry studies were carried out in bone marrow, thymus, spleen and lung to study T cells, and Th1/Th2 cytokine profiles were determined in broncho-alveolar lavages and serum. The administration of CRL1505 strain to malnourished mice under recovery reduced quantitative and qualitative alterations of CD4+ T cells in the bone marrow, thymus, spleen and lung induced by malnutrition. In addition, CRL1505 treatment augmented Th2- cytokines (interleukin 10 and 4) in respiratory and systemic compartments after pneumococcal infection. These results show that modulation of CD4+ T lymphocytes induced by L. Rhamnosus CRL1505 has an important role in the beneficial effect induced by this strain on the recovery of malnourished mice. These data also indicate that nasally administered L. Rhamnosus CRL1505 may represent a non-invasive alternative to modulate and improve the T cell-mediated immunity against respiratory pathogens in immunocompromised malnourished hosts.Fil: Barbieri, Natalia Paola del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Centro de Referencia Para Lactobacilos; Argentina. Universidad Nacional de Chilecito; ArgentinaFil: Herrera, Héctor Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Centro de Referencia Para Lactobacilos; ArgentinaFil: Salva, Maria Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Centro de Referencia Para Lactobacilos; ArgentinaFil: Villena, Julio Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Centro de Referencia Para Lactobacilos; ArgentinaFil: Alvarez, Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Centro de Referencia Para Lactobacilos; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán; Argentin

Nasal Priming with Lactobacillus rhamnosus CRL1505 Stimulates Mononuclear Phagocytes of Immunocompromised Malnourished Mice: Improvement of Respiratory Immune Response

The effect of Lactobacillus rhamnosus CRL1505 (Lr) on macrophages (Ma) and dendritic cells (DC) in the orchestration of anti-pneumococcal immunity was studied using malnutrition and pneumococcal infection mouse models. Monocytes (Mo), Ma, and DC in two groups of malnourished mice fed with balanced diet (BCD) were studied through flow cytometry; one group was nasally administered with Lr (BCD+Lr group), and the other group was not (BCD group). Well-nourished (WNC) and malnourished (MNC) mice were used as controls. Malnutrition affected the number of respiratory and splenic mononuclear phagocytes. The BCD+Lr treatment, unlike BCD, was able to increase and normalize lung Mo and Ma. The BCD+Lr mice were also able to upregulate the expression of the activation marker MHC II in lung DC and to improve this population showing a more significant effect on CD11b + DC subpopulation. At post-infection, lung Mo values were higher in BCD+Lr mice than in BCD mice and similar to those obtained in WNC group. Although both repletion treatments showed similar values of lung Ma post-infection, the Ma activation state in BCD+Lr mice was higher than that in BCD mice. Furthermore, BCD+Lr treatment was able to normalize the number and activation of splenic Ma and DC after the challenge. Lr administration stimulates respiratory and systemic mononuclear phagocytes. Stimulation of Ma and DC populations would increase the microbicide activity and improve the adaptive immunity through its antigen-presenting capacity. Thus, Lr contributes to improved outcomes of pneumococcal infection in immunocompromised hosts.Fil: Barbieri, Natalia Paola del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; Argentina. Universidad Nacional de Chilecito; ArgentinaFil: Salva, Maria Susana. Universidad Nacional de Chilecito. Departamento de Ciencias Basicas y Tecnologicas; ArgentinaFil: Herrera, Héctor Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Villena, Julio Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Alvarez, Gladis Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; Argentin