Carbapenem-resistant Citrobacter spp. isolated in Spain from 2013 to 2015 produced a variety of carbapenemases including VIM-1, OXA-48, KPC-2, NDM-1 and VIM-2

Objectives: There is little information about carbapenemase-producing (CP) Citrobacter spp.We studied the molecular epidemiology and microbiological features of CP Citrobacter spp. isolates collected in Spain (2013-15). Methods: In total, 119 isolates suspected of being CP by the EUCAST screening cut-off values were analysed. Carbapenemases and ESBLs were characterized using PCR and sequencing. The genetic relationship among Citrobacter freundii isolates was studied by PFGE. Results: Of the 119 isolates, 63 (52.9%) produced carbapenemases, of which 37 (58.7%) produced VIM-1, 20 (31.7%) produced OXA-48, 12 (19%) produced KPC-2, 2 (3.2%) produced NDM-1 and 1 (1.6%) produced VIM- 2; 9 C. freundii isolates co-produced VIM-1 plus OXA-48. Fourteen isolates (22.2%) also carried ESBLs: 8 CTX-M-9 plus SHV-12, 2 CTX-M-9, 2 SHV-12 and 2 CTX-M-15. Fifty-seven isolates (90.5%) were C. freundii, 4 (6.3%) were Citrobacter koseri, 1 (1.6%) was Citrobacter amalonaticus and 1 (1.6%) was Citrobacter braakii. By EUCAST breakpoints, eight (12.7%) of the CP isolates were susceptible to the four carbapenems tested. In the 53 CP C. freundii analysed by PFGE, a total of 44 different band patterns were observed. Four PFGE clusters were identified: cluster 1 included eight isolates co-producing VIM-1 and OXA-48; blaVIM-1 was carried in a class 1 integron (intI-blaVIM-1 - aacA4-dfrB1-aadA1-catB2-qacE¿1/sul1) and blaOXA-48 was carried in a Tn1999.2 transposon. Conclusions: We observed the clonal and polyclonal spread of CP Citrobacter spp. across several Spanish geographical areas. Four species of Citrobacter spp. produced up to five carbapenemase types, including coproduction of VIM-1 plus OXA-48. Some CP Citrobacter spp. isolates were susceptible to the four carbapenems tested, a finding with potential clinical implications

Desarrollo de un Sistema de Inyección en Flujo Multijeringa para la Monitorización de la Degradación de Agentes Antituberculosos por Fotocatálisis Heterogénea

En este estudio, se llevó a cabo el desarrollo de un sistemadc monitorización en línea del proceso de degradación fotocataliticade los fármacos antituberculosos isoniazida (ISO) y pirazinamida (PIRA) en solución acuosa, mediante un sistema de análisis por inyección en flujo multijeringa (MSFIA). Para la monitorización de los fármacos en linea se realizó la separación cromatográfica en una columna C18 de tipo monolftica, empleando como fase móvil 10 mM ácido l-heptanosuIfónico pH 3 Y acetonitrilo (98:2), con un caudal de elución de 1 mL/min Y volumen de inyección de 200 flL. La detección de los fármacos fue por espectroscopia UV (267 nm). Se acopló un reactor fotocatalitico al sistema MSFIA-separación cromatográfica para llevar a cabo la degradación en mezcla de ISO Y PIRA aplicando un diseño de experimentos factorial 23 para seleccionar las mejores condiciones del proceso, tomando como variables: tipo de catalizador (TO2y ZnO), cantidad de catalizador (0.5 y 1.0 gIL) y longitud de onda de irradiación (254 y 365 nm). Aplicando la función de deseabilidad (desirability function) se determinaron los parámetros óptimos para la degradación, los cuales fueron: l gIL del catalizador TiO2 y radiación de 365 nm. El proceso de degradación conjunta de los fármacos fue mejorado cuando se incrementó la intensidad de la radiación UV (de 304 a 5500 W/cm) ajustando el pH de la disolución a 7. Se realizaron pruebas control en las condiciones experimentales óptimas: adsorción y fotólisis, y se compararon con la fotocatálisis. Los porcentajes de degradación a 240 min para ISO y PIRA en la mezcla fueron del 1000/0; mientras que el porcentaje de mineralización fue del 71 %