Yeasts of the genus Trichosporon: ecological aspects, laboratorial characterization, virulence factors and antifungal susceptibility.

Trichosporon spp. são patógenos oportunistas emergentes que causam alta mortalidade entre pacientes imunocomprometidos. A presente investigação teve como objetivos avaliar aspectos ecológicos relacionados à colonização humana e animal; testar 28 amostras de Trichosporon através de métodos de caracterização laboratorial clássica, detectar a atividade enzimática extracelular e avaliar a suscetibilidade desses isolados contra os antifúngicos. A expressão de melanina e glucuronoxylomanana (GXM) em parede celular foi estudada em T. asahii., Trichosporon inkin e T. asahii foram isolados da região perigenital de duas mulheres e dois tamanduás, respectivamente. Microbiologicamente, as amostras investigadas (28) apresentaram características morfológicas e fisiológicas compatíveis com as descritas na literatura. Pouca especificidade na identificação de Trichosporon spp. foi verificada em CHROMagar Candida® e API ID 32C®. O estudo da atividade de exoenzimas demonstra a relevância na produção de lipase. Não foi possível detectar a expressão de melanina em T. asahii. No entanto, GXM foi expressa por amostra-padrão e isolado clínico da mesma espécie. Embora os pontos de corte não estejam, ainda, bem estabelecidos para Trichosporon spp., os testes sugerem valores elevados de concentração inibitória mínima (CIM) para anfotericina B, fluconazol, itraconazol e cetoconazol. Voriconazol demonstrou maior eficácia contra Trichosporon spp. A maior parte das amostras apresentou resistência a caspofungina.Trichosporon spp. are emergent opportunistic pathogens that cause high mortality among immunocompromised patients. The aim of the study was to evaluate ecological aspects related to human and animal colonization; to test 28 samples of Trichosporon spp. on classic laboratorial characterization, detection of the extracellular enzymatic activity and antifungal susceptibility (E-test®). Melanin and glucuronoxylomanan (GXM) wall expression was studied in T. asahii. Trichosporon inkin and T. asahii were isolated from perigenital area of two women and from the haircoat of two anteaters, respectively. Microbiologically, the samples studied (28) have presented morphological and physiological characteristics according to descriptions of the literature. Few specificity on identification of Trichosporon spp. was verified at CHROMagar Candida® and API ID 32C® commercial tests. The extracellular enzymatic activity showed the relevance of lipase production. The melanin wall expression was not verified in T. asahii.. On the other hand, GXM was expressed by the control and the clinical sample, both of the same specie. Though the sensibility break points were still not established for Trichosporon spp., the tests indicate high values of minimal inhibitory concentration (MIC) for amphotericin B, fluconazole, itraconazole and cetoconazole. Voriconazole showed the best results against Trichosporon spp. The most part of the samples was resistant to caspofungin

Eficácia da interleucina-12 (il-12) no tratamento adjuvante da tricosporonose murina experimental e caracterização in vitro de fatores associados à virulência em trichosporon spp

Trichosporon yeasts have been associated with invasive and severe opportunistic infections in immunocompromised patients. In spite of recent scientific and technological advances, are still frequent reports of treatment failure and mortality rates are quite high. The concern of the scientific community with the patient of the new century stimulated the search for more effective methods of diagnosis and new therapeutic regimens. The objective of this research was to evaluate the efficacy of interleukin -12 as an adjuvant of voriconazole in the treatment of experimental murine trichosporonosis; verify the sensitivity to antifungal agents by comparing the E-test™ with the microdilution method, to investigate the influence that the incubation temperature over the expression of proteasis , phospholipasis , lipasis and DNasis in Trichosporon species through the use of specific substrates , following the classical recommendations in the literature and characterize the production of polymers compatible with melanin in the cell wall of Trichosporon spp. by growing isolates on media with different sources of diphenols . The use of IL -12 in the adjuvant treatment of experimental murine trichosporonosis highest efficiency in controlling the growth of the fungus and minimized general clinical signs of BALB/c mice immunosuppressed and inoculated with standard strain of T. asahii (CBS 2479). We conclude that IL - 12 is an effective alternative for the treatment of trichosporonosis and future studies will evaluate its use in humans. Elevated MICs for fluconazole were observed in sensitivity tests with eminent discriminatory capacity of the E-test™ in identifying isolates with resistance trend. Comparative tests for MICs presented by E-test™ and microdilution indicated a low correlation between the methods. Lipases were the main enzymes produced by Trichosporon spp. and its activity showed enhanced at 25 °C, although all enzymes studied have been detected , albeit at varying intensities. Although the enzymatic expression was variable among species, the temperature has significant influence on the activity of lipases, phospholipasis and proteinasis in yeast of the genus Trichosporon. Studies that characterize the actual role of these enzymes in the pathogenesis of trichosporonosis are still needed. T. mucoides specimens demonstrated capability to express eletrondensos particularly compatible with the polymers of melanin in the cell wall. Trichosporon yeasts are capable of expressing melanin-like polymers eletrondensos difenólicas when stimulated by different sources, however, this ability should be better characterized in different species.Leveduras do gênero Trichosporon têm sido associadas a infecções oportunísticas invasivas e graves em pacientes imunocomprometidos. A pesar dos recentes avanços científicos e tecnológicos, ainda são frequentes os relatos de insucesso no tratamento e os índices de mortalidade são bastante elevados. A preocupação da comunidade científica com o paciente do novo século estimulou a busca por métodos diagnósticos mais eficazes e por novos regimes terapêuticos. O objetivo da presente investigação foi avaliar a eficácia da interleucina-12 como coadjuvante do voriconazol no tratamento da tricosporonose murina experimental; verificar o perfil de sensibilidade aos antifúngicos através da comparação do E-test® com o método da microdiluição, investigar a influência que a temperatura de incubação exerce sobre a expressão de proteinases, fosfolipases, lipases e DNAses em espécies de Trichosporon através do emprego de substratos específicos, seguindo as recomendações clássicas da literatura e caracterizar a produção de polímeros compatíveis com a melanina na parede celular de Trichosporon spp. através do cultivo de isolados em meios com diferentes fontes de difenóis. O emprego da IL-12 no tratamento adjuvante da tricosporonose murina experimental apresentou maior eficiência no controle da multiplicação do fungo e minimizou sinais clínicos gerais dos camundongos BALB/c imunossuprimidos e inoculados com cepa-padrão de T. asahii (CBS 2479). Concluímos que a IL-12 constitui uma alternativa eficaz para o tratamento da tricosporonose e futuros estudos permitirão avaliar seu emprego em seres humanos. CIMs elevadas para fluconazol foram observadas nos testes de sensibilidade, com eminente capacidade discriminatória do E-test® em identificar isolados com tendência à resistência. Os testes comparativos para as CIMs apresentadas por E-test® e microdiluição indicaram uma baixa correlação entre os métodos. As lipases foram as principais enzimas produzidas por Trichosporon spp. e sua atividade se mostrou potencializada a 25ºC, embora todas as enzimas pesquisadas tenham sido detectadas, ainda que em intensidades variáveis. Embora a expressão enzimática tenha sido variável entre as espécies, a temperatura exerce influência significativa sobre a atividade de lipases, fosfolipases e proteinases em leveduras do gênero Trichosporon, estudos que caracterizem o papel real dessas enzimas na patogênese da tricosporonose ainda são necessários. Amostras de T. mucoides demonstraram particular capacidade em expressar polímeros eletrondensos compatíveis com os de melanina, na parede celular. Leveduras do gênero Trichosporon são capazes de expressar polímeros eletrondensos semelhantes à melanina quando estimuladas por diferentes fontes difenólicas, contudo, essa capacidade deve ser mais bem caracterizada nas diferentes espécies.Dados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2013 a 2016

Ethidium bromide-induced demyelination in the sciatic nerve of diabetic rats Desmielinização induzida pelo brometo de etídio no nervo ciático de ratos diabéticos

This study aims to observe the process of myelin loss and repair following the injection of the gliotoxic agent ethidium bromide (EB) in the sciatic nerve of rats previously induced to diabetes mellitus by streptozotocin. Injection of EB was also done in non-diabetic rats. The animals were euthanatized from 3 to 31 days after intraneural injection and nerve sections were collected for ultrastructural study. In non-diabetic rats, Schwann cells (CS) showed signs of intoxication 3 days after, with cytoplasmic vacuolization and rejection of their myelin sheaths. Myelin debris were removed by macrophages in the endoneurium and mast cells were abundant in the lesions. From 14 days following EB injection, supernumerary CS were seen in the expanded endoneurium as well as thin myelin sheaths indicating remyelination. Diabetic rats presented a more extensive myelin vesiculation and segmentar demyelination, with delayed activities from both macrophages and remyelinating SC. No mast cells were noted.O estudo visa à observação do processo de perda e reparo mielínico pós-injeção do gliotóxico brometo de etídio (BE) no nervo ciático de ratos previamente induzidos a diabetes mellitus pela estreptozotocina. Injeção de BE foi igualmente realizada em ratos não-diabéticos. Os animais foram eutanasiados dos 3 aos 31 dias pós-injeção intraneural, com colheita de amostras neurais para estudo ultra-estrutural. Nos animais não-diabéticos, as células de Schwann (CS) mostraram sinais de intoxicação a partir dos 3 dias pós-gliotóxico, com vacuolização citoplasmática e rejeição de suas bainhas de mielina. Restos mielínicos eram removidos por macrófagos no interior do endoneuro e mastócitos eram abundantes nas lesões. A partir dos 14 dias, CS supranumerárias foram encontradas no endoneuro expandido, além de finas bainhas de mielina indicativas de remielinização. Os ratos diabéticos apresentaram vesiculação mielínica e desmielinização segmentar mais extensas, bem como ausência de mastócitos e atraso na atividade macrofágica e na função remielinizante das CS

Trichosporon inkin: An Uncommon Agent of Scalp White Piedra. Report of Four Cases in Brazilian Children

We report four cases of scalp white piedra (SWP) in Brazilian female children. Morphological and physiological approaches gave inconsistent results for identifying Trichosporon to species level, while the sequencing of the intergenic spacer 1 region of ribosomal DNA accurately identified the agent of SWP as T. inkin. These cases emphasize the occurrence of this species causing this type of infection. the molecular identification of the suspected agent is needed for appropriate epidemiological surveillance of superficial mycoses caused by Trichosporon species.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Universidade Federal de São Paulo, Dept Microbiol Imunol & Parasitol, Lab Diagnost Micol, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Dept Med, Lab Especial Micol, São Paulo, BrazilUniv São Paulo, Inst Med Trop São Paulo, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Dept Dermatol, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Dept Microbiol Imunol & Parasitol, Lab Diagnost Micol, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Dept Med, Lab Especial Micol, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Dept Dermatol, São Paulo, BrazilWeb of Scienc

Expectativa de vida e causas de morte em cães na área metropolitana de São Paulo (Brasil) Life expectation and causes of death in dogs in the metropolitan area of São Paulo (Brazil)

Com o objetivo de avaliar a expectativa de vida dos cães na área metropolitana de São Paulo e as causas relacionadas com a morte destes, foram analisados dados correspondentes a 2.011 animais provenientes de um hospital veterinário universitário, de clínicas particulares, de canis e de proprietários particulares. A idade mediana de sobrevivência dos animais foi de 36 meses. Os animais de porte médio, grande e gigante tiveram maior longevidade que os cães de porte pequeno. As fêmeas viveram mais que os machos e os animais castrados viveram mais que os não-castrados. Não houve diferença na expectativa de vida entre os animais de raça pura e os animais sem raça definida. Constatou-se que as causas mais importantes de mortalidade foram, em ordem decrescente de ocorrência, as doenças infecciosas, as neoplasias e os traumas. Pode-se concluir que a expectativa de vida dos cães foi menor que a observada na literatura internacional e que as doenças infecciosas constituem a principal causa de óbito.<br>In order to evaluate the canine life expectation in the metropolitan area of São Paulo, as well as the causes of death of these animals, data related to 2,011 dogs attended at a University Veterinary Hospital or collected from veterinary clinics, kennels and private owners were analyzed. It was observed that the median age of the dogs at death due to all causes was 36 months old. Dogs of medium, large and giant breeds had longer longevity than the small ones. Female and neutered dogs lived longer than male and intact dogs. There was no difference in life expectation related to the fact that the animal was from a pure breed or not. The most important causes of mortality were, in decrescent order of occurrence, infeccious diseases, neoplasms and traumatic injuries. Canine life expectation found in this survey was shorter than that observed in other countries and infeccious diseases constitute the major cause of death