Dietary chia seed (Salvia hispanica L.) rich in a-linolenic acid improves adiposity and normalises hypertriacylglycerolaemia and insulin resistance in dyslipaemic rats

The present study investigates the benefits of the dietary intake of chia seed (Salvia hispanica L.) rich in α-linolenic acid and fibre upon dyslipidaemia and insulin resistance (IR), induced by intake of a sucrose-rich (62.5 %) diet (SRD). To achieve these goals two sets of experiments were designed: (i) to study the prevention of onset of dyslipidaemia and IR in Wistar rats fed during 3 weeks with a SRD in which chia seed was the dietary source of fat; (ii) to analyse the effectiveness of chia seed in improving or reversing the metabolic abnormalities described above. Rats were fed a SRD during 3 months; by the end of this period, stable dyslipidaemia and IR were present in the animals. From months 3-5, half the animals continued with the SRD and the other half were fed a SRD in which the source of fat was substituted by chia seed (SRD+chia). The control group received a diet in which sucrose was replaced by maize starch. The results showed that: (i) dietary chia seed prevented the onset of dyslipidaemia and IR in the rats fed the SRD for 3 weeks - glycaemia did not change; (ii) dyslipidaemia and IR in the long-term SRD-fed rats were normalised without changes in insulinaemia when chia seed provided the dietary fat during the last 2 months of the feeding period. Dietary chia seed reduced the visceral adiposity present in the SRD rats. The present study provides new data regarding the beneficial effect of chia seed upon lipid and glucose homeostasis in an experimental model of dislipidaemia and IR.Fil: Chicco, Adriana Graciela. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: D'alessandro, Maria Eugenia Guadalupe. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Hein, Gustavo Juan. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Oliva, Maria Eugenia. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Lombardo, Yolanda B.. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Departamento de Ciencias Biológicas; Argentin

Saliva as a noninvasive biological sample to compare bioavailability of phenytoin formulations by LC-MS/MS

The use of noninvasive biological samples such as saliva, it is of great interest for therapeutic drug monitoring (TDM), including the anticonvulsants Phenytoin (PHT). A simple analytical methodology by liquid chromatography-tandem mass spectrometry was developed and validated to carry out a relative comparative bioavailability (RBA) study of two PHT formulations in human plasma and saliva and the subsequent correlation between both matrixes. A single-dose, randomized-sequence, open-label, two-way crossover study, was conducted in 24 healthy Latin American male volunteers. The bioequivalence of 200 mg PHT tablet was evaluated using plasma and saliva to determine Cmax, Tmax, AUC0-t and AUC0-∞. Figures of merit of the proposed methodology were as follows: linear ranges of 40-5055 ng/mL and 5-1340 ng/mL for plasma and saliva, respectively, with a correlation coefficient of (r)>0.999. The LOD and LOQ were 15 ng/mL -40ng/mL for plasma and 1.5 ng/mL – 5.0 ng/mL for saliva. Accuracy, precision (as %CV) and recovery were accepted according the bioequivalence criteria. Stability showed %bias<15%. The PHT saliva/PHT plasma ratios for all parameters were: 5.4, 2.2, 1.4 for Cmax, and 1.7, 1.2, 1.1 for AUC. Plasma and saliva results were correlated (R=0.9889 and R=0.9947 for Reference and Test, respectively). Saliva not only is a suitable matrix for RBA studies and TDM, but also a more convenient tool since it provides analogous information with mayor analytical, ethical, and biosafety advantages. However, an additional pre-study of product dissolution in oral cavity is suggested before carrying out complete RBA studies for prompt-release drugsFil: Baldo, Matias Nicolas. Dominguez Lab; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Hunzicker, Gabriel Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Dominguez Lab; ArgentinaFil: Altamirano, Jorgelina Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales. Provincia de Mendoza. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales. Universidad Nacional de Cuyo. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales; ArgentinaFil: Murguia, Marcelo Cesar. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Hein, Gustavo Juan. Dominguez Lab; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentin

Effect of precalving body condition score on insulin signaling and hepatic inflammatory state in grazing dairy cattle

During postpartum, high-production dairy cows show a temporary period of insulin resistance, during which glucose uptake by peripheral tissues is reduced to prioritize milk production. However, this can further increase their negative energy balance by compromising liver function, especially in cows with excessive body condition score (BCS) and a pro-inflammatory state. Based on this, the aim of this study was to evaluate the hepatic expression of proteins of the insulin signaling pathway (PI3K) and of the cytokines TNFα, IL-6 and NF-κB, as well as the plasma concentrations of non-esterified fatty acids (NEFA), beta-hydroxybutyrate, glucose, triglycerides (TAG), insulin and insulin-like growth factor-1, insulin sensitivity indexes, and the hepatic content of TAG during the transition period in cows with different BCS. Sixteen Holstein cows were selected 14 days before the expecting calving date and classified into 2 groups: low BCS (LBCS) ≤ 3.25 (n = 9) and high BCS (HBCS) ≥ 3.5 (n = 7). Blood and liver samples were obtained 14 (±3) days before the expected calving date and 4 (±3), 14 (±3) and 28 (±3) days after calving. The concentration of NEFA was higher in the HBCS group than in the LBCS group. Glucose concentration showed an interaction effect, with a greater concentration on day 28 in HBCS. Insulin concentration showed no changes. While the pAkt/total Akt ratio was lower in the HBCS group, the TNFα protein expression was higher only on day 4 postcalving in the HBCS group. In agreement with these results, the insulin sensitivity indexes RQUICKI and RQUICKIBHBA were lower in the HCBS group. The results suggest an insulin resistance and a pro-inflammatory state in the liver of cows with HBCS.Fil: Angeli, Emmanuel. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Agronomia y Veterinaria. Instituto de Ciencias Veterinarias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Ciencias Veterinarias.; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Barcarolo, Daiana. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Agronomia y Veterinaria. Instituto de Ciencias Veterinarias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Ciencias Veterinarias.; ArgentinaFil: Durante, Leandro Ivan. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Agronomia y Veterinaria. Instituto de Ciencias Veterinarias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Ciencias Veterinarias.; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Santiago, Gonzalo. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Agronomia y Veterinaria. Instituto de Ciencias Veterinarias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Ciencias Veterinarias.; ArgentinaFil: Matiller, Valentina. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Agronomia y Veterinaria. Instituto de Ciencias Veterinarias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Ciencias Veterinarias.; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Rey, Florencia. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Agronomia y Veterinaria. Instituto de Ciencias Veterinarias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Ciencias Veterinarias.; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Ortega, Hugo Hector. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Agronomia y Veterinaria. Instituto de Ciencias Veterinarias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Ciencias Veterinarias.; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Hein, Gustavo Juan. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Agronomia y Veterinaria. Instituto de Ciencias Veterinarias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Ciencias Veterinarias.; Argentin

Relevant aspects of dietary n-3 polyunsaturated fatty acids in the adaptation of dairy cattle to the transition period

During the transition period, cows undergo a series of metabolic and immunological changes, which represent a physiological challenge that is often a risk for their production and health. During this period, dairy cows have a pro-inflammatory state associated with frequent infectious diseases and lipomobilization, and present an insulin resistance state related to fat mobilization and a high body condition score. In humans, the polyunsaturated fatty acids (PUFAs) from the omega-3 (n-3) family, which are involved in many biological systems and processes, have been shown to exert beneficial effects on health, particularly on the metabolic syndrome. Therefore, the incorporation of n-3 PUFAs in the diets of dairy cows could represent an interesting supplement for them to afford the challenge of the peripartum. This review describes the novel information and advances in the understanding of relevant aspects concerning the effects of dietary PUFAs on dairy cows, focusing on metabolic and inflammatory aspects with possible effects on the cows' physiology and adaptation to the peripartum period.Fil: Angeli, Emmanuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Barcarolo, Daiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Ribas, L.. Universidad Nacional del Litoral; ArgentinaFil: Marelli, Belkis Ester. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Roskopf Perez, Pablo Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Salado, Eloy Eduardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Ortega, Hugo Hector. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Hein, Gustavo Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentin

Evaluation of metabolic and biochemical blood parameters in lactating cows with Cystic Ovarian Disease

El objetivo de este trabajo fue determinar y evaluar indicadores bioquímicos sanguíneos asociados a procesos metabólicos energéticos, proteicos, minerales y de funcionalidad hepática, junto con parámetros productivos y reproductivos en vacas lecheras que fueron diagnosticadas con enfermedad quística ovárica (COD) y controles. Se emplearon vacas Holando Argentino en lactancia de 5 rebaños de la provincia de Santa Fe (Argentina) que presentaban COD (n= 80) diagnosticada mediante ultrasonografía y controles clínicamente sanas (n= 124). De las vacas se obtuvo sangre coccígea para determinar las concentraciones séricas de las hormonas de crecimiento (GH), factor de crecimiento similar a la insulina-1 (IGF-1) e insulina, la actividad sérica de AST, FA, GGT y las concentraciones séricas de albúmina, proteínas totales, relación albúmina: globulinas, Bilirrubina total y directa, β-hidroxibutirato, colesterol, glucosa, urea, creatinina, calcio, fósforo y magnesio. Las concentraciones séricas de insulina e IGF-1 fueron menores (P0,05) entre ambos grupos en las demás variables séricas y productivas evaluadas, sin embargo, el intervalo parto-concepción fue mayor en vacas que presentaron COD. Los resultados nos permitieron concluir que habría una asociación entre los valores séricos de IGF-1 e insulina y la COD, y que ésta comprometería el futuro reproductivo de las vacas.The aim of the study was to determine and evaluate different blood parameters associated to energetic, protein, mineral and liver metabolic processes together with productive and reproductive parameters in dairy cows of Santa Fe province (Argentina) that were diagnosed with cystic ovarian disease (COD). Lactating Argentine Holstein cows from five dairy herds with spontaneous COD (n= 80) diagnosed by ultrasound and control cows (n= 124) were included in the study. Blood samples were obtained from all cows to determine serum concentrations of: growth hormone, insulin-like growth factor (IGF-1), insulin, aspartate aminotransferase, alkalin phosphatase, gamma glutamiltransferase, albumin, total proteins, albumin: globulin ratio, total and direct bilirrubin, β-hidroxibutirate, colesterol, glucose, urea, creatinin, calcium, phosphorus and magnesium. Serum concentrations of insulin and IGF-1 were lower (P<0.05) in COD than control cows. No significant differences among groups were observed in any other variables studied, however, the calving to conception interval was higher in cows with COD compared to controls. These results allowed us to conclude that there would be an association between blood concentrations of IGF-1 and insulin and COD that, ultimately, compromise the reproductive performance of the cow.Fil: Cattaneo, L.. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Barberis, F. C.. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Stangaferro, M. L.. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Signorini Porchietto, Marcelo Lisandro. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; ArgentinaFil: Ruiz, Marcelo Fabián. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Zimmermann, R.. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Bo, Gabriel Amilcar. Instituto de Reproduccion Animal Córdoba; ArgentinaFil: Hein, Gustavo Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Cs.veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Ortega, Hugo Hector. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Cs.veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentin

Impaired insulin signaling pathway in ovarian follicles of cows with cystic ovarian disease

Cystic ovarian disease (COD) is an important cause of infertility in dairy cattle. Follicular cell steroidogenesis and proliferation in ovulatory follicles is stimulated by hormones such as insulin and its necessary post-receptor response. The aim of this study was to determine the expression of insulin receptor (IR), IR substrate-1 (IRS1) and phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K), key intermediates in the insulin pathway, in control cows and cows with spontaneous COD and ACTH-induced COD. IR and IRS1 mRNA levels were greater in granulosa cells and lower in follicular cysts than in control tertiary follicles. PI3K mRNA levels were similar in all follicles evaluated, whereas the expression of IR, IRS1 and PI3K was similar in theca cells. Protein expression of IR was higher in control tertiary follicles than in the same structures in animals with COD and with cysts. IRS1 and PI3K protein expression showed the same pattern in tertiary and cystic follicles. However, the protein expression of subunit alpha p85 of PI3K was greater in theca cells from tertiary follicles than in cystic follicles. These results provide new insights into the insulin response in cows with COD. The lower gene and protein expressions of some insulin downstream effectors at an early stage of the signaling pathway could negatively influence the functionality of ovaries and contribute to follicle persistence.Fil: Hein, Gustavo Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Morfológicas. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; ArgentinaFil: Panzani, Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Morfológicas. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; ArgentinaFil: Rodríguez, Fernanda Mariel. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Morfológicas. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Salvetti, Natalia Raquel. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Morfológicas. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Díaz, Pablo Uriel. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Morfológicas. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Gareis, Natalia Carolina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Morfológicas. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Benitez, G. A.. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Morfológicas. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Ortega, Hugo Hector. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Morfológicas. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Rey, Florencia. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Morfológicas. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentin

Validation of analytical methodology to quantify tulathromycin in bovine tissues by high performance liquid chromatography and detection by mass spectrometry

La tulatromicina es un antimicrobiano aprobado para el tratamiento de enfermedades respiratorias de bovinos. Dada la importancia del uso de este antibiótico en los animales, se validó un método analítico basado en cromatografía liquida de alta performance en tandem con ionización por electrospray y detección por espectrometría de masas/masas (LC ESI MS/MS) para cuantificar tulatromicina en diferentes tejidos bovinos, de acuerdo a normas de Agencias Regulatorias Nacionales e Internacionales. El procedimiento optimizado implicó la homogeneización de la muestra con acetato de etilo y ácido clorhídrico, e hidrólisis de la fase acuosa resultante, para convertir la tulatromicina y sus metabolitos en el residuo marcador (2R, 3S, 4R, 5R, 8R, 10R, 11R, 12S, 13S, 14R) -2-etil-3,4,10,13-tetrahidroxi-3, 5,8,10,12,14-hexametil-11 – [[3,4,6-tridesoxi-3- (dimetilamino) -β-D-xilohexopiranosil] oxi] -1-oxa-6-azaciclopentadecan-15-ona, conocido como CP-60,300. Seguidamente, se realizó una limpieza del extracto acuoso mediante un cartucho de intercambio catiónico y posterior análisis por LC ESI MS/MS. La metodología analítica propuesta fue validada cumpliéndose los criterios de aceptación establecidos por los organismos de referencia en la temática, demostrando ser adecuada para el análisis de residuos de tulatromicina en tejidos bovinos con fines reglamentarios.Tulathromycin is an approved antimicrobial used in cattle to treat respiratory diseases. An analytical method based on high performance liquid chromatography in tandem with electrospray ionization and detection by mass / mass spectrometry (LC ESI MS / MS) was validated to quantify tulathromycin in different bovine tissues according to standards of National and International Regulatory Agencies. The optimized procedure involved homogenizing the sample with ethyl acetate and hydrochloric acid, hydrolysis of the resulting aqueous layer to convert tulathromycin and its metabolites into the marker residue (2R, 3S, 4R, 5R, 8R, 10R, 11R, 12S, 13S, 14R) -2-etil-3,4,10,13-tetrahidroxi-3, 5,8,10,12,14-hexametil-11 – [[3,4,6-tridesoxi-3- (dimetilamino) -β-D-xilohexopiranosil] oxi] -1-oxa-6-azaciclopentadecan-15-ona, also known as CP-60,300, cleaning by using a cation exchange cartridge and subsequent analysis by LC ESI MS/MS. The proposed analytical methodology was validated meeting the acceptance criteria established by the reference organisms, proving to be adequate for the analysis of tulathromycin residues in bovine tissues for regulatory purposes.Fil: Barcarolo, Daiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Addona, Silvina Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ingeniería Química; ArgentinaFil: Angeli, Emmanuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Peralta, María Belén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Ortega, Hugo Hector. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Hein, Gustavo Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina. Centro Universitario Gálvez; Argentin

Development and validation of analytical techniques for the determination of blood biomarkers in preclinical trials: Why and what for?

El descubrimiento de un nuevo principio activo farmacéutico implica estudios preclínicos, que tienen como objetivo demostrar que es eficaz y seguro para un posterior ensayo en seres humanos. Esto conduce a la necesidad de desarrollar tecnologías que aprovechen las nuevas herramientas analíticas disponibles dentro de un contexto donde los resultados de las pruebas realizadas, estén plenamente documentados, bajo sistemas de buenas prácticas de laboratorio auditables. En esta revisión se actualizan y describen algunos de los ensayos realizados en la etapa preclínica del desarrollo de un nuevo fármaco y el estado actual de la tecnología analítica empleada para el dosaje de diferentes biomarcadores sanguíneos de interés. Se analizaron los biomarcadores más relevantes, las normativas de validación de las técnicas analíticas empleadas para su determinación y los problemas que se presentan al tratar de aplicarlas.New drug discovery involves preclinical studies to demonstrate its effectivity and safety for further tests in humans. This leads to the need to develop technologies that take advantage of the new analytical tools available within a context where the results of the tests carried out are fully documented, under auditable systems of good laboratory practice. This review updates and describes some of the tests carried out in the preclinical stage of the development of a new drug and the current state of the analytical technology used to measure different blood biomarkers of interest. Biomarker parameters were analyzed at the physiological level, considering both the validation regulations of the analytical techniques used for their determination as the problems that arise when trying to apply them, since many of these biomarkers are endogenous compounds in the used matrices.Fil: Santiago, Gonzalo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Salinas, Facundo José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Cabaña, Enzo Rubén. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Stassi, Antonela Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Ortega, Hugo Hector. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Hein, Gustavo Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentin

GLP-1 and GLP-2 as Ying and Yang of Intestinal Lipoprotein Production: Evidence for predominance of GLP-2-stimulated postprandial lipemia in normal and insulin Resistant States

The glucagon-like peptides (GLP-1 and GLP-2) are processed from the proglucagon polypeptide and secreted in equimolar amounts but have opposite effects on chylomicron (CM) production, with GLP-1 significantly reducing and GLP-2 increasing postprandial chylomicronemia. In the current study, we evaluated the apparent paradoxical roles of GLP-1 and GLP-2 under physiological conditions in the Syrian golden hamster, a model with close similarity to humans in terms of lipoprotein metabolism. A short (30-min) intravenous infusion of GLP-2 resulted in a marked increase in postprandial apolipoprotein B48 (apoB48) and triglyceride (TG) levels in the TG-rich lipoprotein (TRL) fraction, whereas GLP-1 infusion decreased lipid absorption and levels of TRL-TG and apoB48. GLP-1 and GLP-2 coinfusion resulted in net increased lipid absorption and an increase in TRL-TG and apoB48. However, prolonged (120-min) coinfusion of GLP-1 and GLP-2 decreased postprandial lipemia. Blocking dipeptidyl peptidase-4 activity resulted in decreased postprandial lipemia. Interestingly, fructose-fed, insulin-resistant hamsters showed a more pronounced response, including possible hypersensitivity to GLP-2 or reduced sensitivity to GLP-1. In conclusion, under normal physiological conditions, the actions of GLP-2 predominate; however, when GLP-1 activity is sustained, the hypolipidemic action of GLP-1 predominates. Pharmacological inhibition of GLP-1 degradation tips the balance toward an inhibitory effect on intestinal production of atherogenic CM particles.Fil: Hein, Gustavo Juan. University Of Toronto. Hospital For Sick Children; Canadá. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Cs.veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Baker, Chris. University Of Toronto. Hospital For Sick Children; CanadáFil: Hsieh, Joanne. University Of Toronto. Hospital For Sick Children; CanadáFil: Farr, Sara. University Of Toronto. Hospital For Sick Children; CanadáFil: Khosrow, Adeli. University Of Toronto. Hospital For Sick Children; Canad

Modulation of insulin response in ovarian cattle and its relationship with cystic ovarian disease

La enfermedad quística ovárica bovina es una importante enfermedad que afecta la fertilidad del ganado bovino lechero. Diversos procesos ováricos tales como la proliferación celular y la esteroidogénesis se encuentran regulados por numerosas hormonas entre las que se encuentra la insulina. La respuesta a esta hormona se desencadena luego de la unión a su receptor específico. El objetivo de la presente revisión es analizar la función de intermediarios claves en la vía de señalización intracelular, que actúan en los primeros estadios involucrados en la respuesta a insulina. Se analizan el receptor de insulina (IR), el sustrato -1 del IR (IRS1) y la enzima fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3K) denotando modificaciones ocurridas en folículos quísticos que podrían influenciar negativamente en la funcionalidad de ovarios y contribuir a la persistencia folicular.Cystic ovarian disease (COD) is an important disease affecting fertility in dairy cattle. Several ovarian processes such as cell proliferation and follicular cell steroidogenesis are regulated by numerous hormones including insulin. The hormone response is triggered after the binding to its receptor. The aim of this review is to analyze the role of key intermediates in the intracellular signaling pathway that act in the early stages of the insulin response. Therefore, insulin receptor (IR), IR substrate-1 (IRS1) and phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K) are analyzed showing changes that occur in cystic follicles and which could negatively influence the functionality of ovaries and contribute to follicle persistence.Sociedad de Ciencias Morfológicas de La Plat