Tok-herpeszvírus vizsgálata és összehasonlítása más, állategészségügyi problémákat okozó herpeszvírusokkal = Study of sturgeon herpesvirus and its comparison with other herpesviruses causing veterinary problems

A fehér tok-herpeszvírus (AciHV-2) genomjának középső szakaszát sikerült molekuláris klónozással és PCR-rel felerősíteni és DNS szekvenciáját megállapítani 68.700 bp hosszban (a feltételezett genomnak több mint az 50%-a). Ez 44 gén/ORF teljes és 3 gén részleges szekvenciája. Az ORF-ek nagy többsége méretében, irányultságában és lokalizációjába megegyezik vagy hasonló a foltos csatornaharcsa-herpeszvírus (IcHV-1) megfelelő ORF-jeivel. A különbségek: az IcHV-1 szerinti ORF 24 és 25 között egy plusz gént találtunk, amely feltehetően egy szerin-proteáz; az ORF 65-nek megfelelő gén hossza jelentősen nagyobb, mint az IcHV-1-ben. Olasz fekete törpeharcsából (Ameiurus melas) izolált herpeszvírusból mintegy 10.000 bázispár hosszú szakaszt erősítettünk fel PCR-rel és szekvenáltunk. A genom-szerveződés nagyfokú hasonlóságot mutat az IcHV-1-gyel. Szibériai tok-herpeszvírus genomból 11.000 bázispárt szekvenáltunk. E vírus nagyon közeli rokonságban áll az észak-amerikai izolátumunkkal. A talált filogenetikai rokonságok alapján tett vírustaxonómiai javaslatainkat részben elfogadta a Nemzetközi Vírustaxonómiai Bizottság. Ezüstkárászból elsőként mutattunk ki eddig csak aranyhalakból leírt Cyprinid herpesvirus 2-t. Hazánkban először mutattunk ki PCR-rel a pontyhimlő vírusát (CyHV-1). Összehasonlító célból eddig ismeretlen herpeszvírusokat mutattunk ki és jellemeztünk denevérekből, ázsiai kiskarmú vidrából, majmokból, egerészölyvből, melyek a Herpesviridae mindhárom alcsaládját képviselték. | The central part of the genome of white sturgeon herpesvirus (AciHV-2) was molecularly cloned or PCR amplified, DNA sequenced in 68,700 bp-length (more than 50% of the supposed genome length). This covers 44 full and 3 partial genes/ORFs. Most of the ORFs are identical with or similar to the corresponding ORFs of channel catfish herpesvirus (IcHV-1) in their size, orientation and localization. The differences: a plus gene between ORF 24 és 25 (IcHV-1 numbering) which is supposedly a serine protease; and the size of the ORF 65 homologue is considerably larger than in IcHV-1. An about 10,000 bp long genome fragment was amplified and sequenced from a herpesvirus isolated from black bullhead (Ameiurus melas). The genome organization showed high level similarity with that of IcHV-1. 11.000 bp was sequenced from the genome of a Siberian sturgeon herpesvirus. This virus is a close relative of our North American isolate. Our taxonomical proposal made on the basis of the identified phylogenetic relatedness has been partially accepted by the International Committee on Taxonomy of Viruses. We were first to detect cyprinid herpesvirus 2 in Silver Prussian carp which had been described earlier exclusively from goldfish. We detected carp pox virus (CyHV-1) by PCR first in Hungary. For comparative studies, we detected and characterized novel herpesviruses from bats, oriental small-clawed otter, monkeys, and buzzard, which represented all three subfamilies of Herpesvirida

Másodlagos hírvivő mechanizmusok kórokozó-növény kapcsolatban = Secondary messenger system in plant-pathogen interactions

A projekt célja másodlagos hírvivő mechanizmusok szerepének pontosabb megismerése a növény-kórokozó kapcsolat kialakulásában. Eredményeink szerint fogékony árpában a lisztharmatfertőzés egy késői fázisban stressznek tekinthető (etilén termelés, membránkárosodás), ugyanakkor a biotróf kórokozó az antioxidánsok indukálása révén megvédi magát és a növényi szövetet a reaktív oxigének káros hatásától. Igazoltuk, hogy a rezisztencia géneken kívül hő sokk fehérjék, a sejthalál gátló fehérjék vagy transzkripciós faktorok génjei fontos szerepet játszhatnak árpában a rezisztencia vagy fogékonyság kialakulásában. Megállapítottuk, hogy a megnőtt antioxidáns kapacitás fontos része lehet a Pirifomospora indica által indukált sótűrő képesség megemelkedésének árpában. Dohány-dohánymozaik vírus kapcsolatban az eredményeink szerint nemcsak a szalicilsav, hanem a lipid összetétel és a lipid peroxidáció is fontos tényező lehet a szisztemikus szerzett rezisztencia kialakulása során. Megerősítettük, hogy a brasszinoszteroidoknak fontos szerepük lehet a biotikus és abiotikus stresszek kivédésében. Kimutattuk, hogy a reaktív oxigén fajták és a RBOHD NADPH oxidáz kettős szerepet játszik az Arabidopsis-Alternaria növény - kórokozó kapcsolatban. Összefoglalva megállapítottuk, hogy a másodlagos hírvivő anyagok külön-külön és egymással szoros kölcsönhatásban is jelentősen befolyásolják mind a rezisztens, mind a fogékony növény-kórokozó kapcsolat kialakulását. | Our aim was to investigate the role of secondary messenger systems in plant-pathogen interactions. The results indicate that in susceptible barley powdery mildew infection at late stage causes stress (ethylene release, membrane damage), but at the same time the biotrophic pathogen defends themselves and plant tissue from reactive oxygens by inducing high antioxidant activity. We proved that in addition to resistance genes, heat shock proteins, cell death inhibitor proteins or transcription factors can play an important role in barley mildew interaction. In addition, the elevated antioxidant activity in barley induced by Pirifomospora indica resulted in higher salt stress tolerance. In tobacco-tobacco mosaic virus interaction, not only salicylic acid, but lipid peroxidation and lipid composition can be important during formation of systemic acquired resistance. The significant role of brassinosteroids in biotic and abiotic stress tolerance of plants was confirmed. We suppose dual roles of reactive oxygen species and NADPH oxidase RBOHD in an Arabidopsis-Alternaria pathosystem. In conclusion, we suggest, that secondary messenger systems separately and in interaction with each other can significantly affect plant susceptibility and disease resistance

Changes of antioxidants following powdery mildew infection of near-isogenic barley lines carrying different resistance genes

Activities of several antioxidative enzymes (SOD, APX, GST and POX) were enhanced in barley leaves following powdery mildew infection, most significantly in case of the susceptible cultivar. In three different powdery mildew resistant lines (carrying Mla, Mlg or mlo resistance genes) we detected similar changes, but less pronounced as compared to the susceptible variety. CAT activity did not change significantly. DHAR activity decreased in all powdery mildew infected barley lines. Ascorbate and glutathione levels increased in the susceptible variety

Állati eredetű adenovírusok genetikai jellemzése az evolúciót hűen tükröző rendszertan kialakítása céljából = Genetic characterization of adenoviruses of different animal hosts to achieve an improved taxonomy, which reflects the viral evolution

A pályázat által támogatott kutatások során rendszertani szempontból különösen jelentősnek ítélt adenovírusokat vizsgáltunk. Két óvilági majom-adenovírus teljes DNS-ének bázissorrendjét meghatároztuk és analizáltuk, mert ilyen vírusokból még nem volt ismert teljes genom. Befejezés előtt áll egy liba- és egy pulyka-adenovírus teljes szekvenciájának meghatározása is. Ezzel célunk az Aviadenovirus genusba tartozó ismert vírusok számának növelése volt. Filogenetikai számításokkal igazoljuk a madár adenovírusok gazdáikkal való koevolúciójára utaló jeleket. Egy kígyó- és egy hal-adenovírus genom elemzése az evolúciós viszonyok nagy vonalainak tisztázásához szolgáltat majd hasznos adatokat. Egy újnak bizonyult siadenovírus teljes genomanalízise folyik. A vírus, mely elhullást okozott Angliában ragadozómadár tenyészetekben a Siadenovirus nemzetség harmadik tagja lehet. Valamennyi vizsgált vírus új vírusfajt is képvisel, így elemzésük eredménye várhatóan tovább erősíti vagy cáfolja az általunk kialakított kategóriák helyességét. Az adenovírusok természetben megfigyelhető diverzitásának vizsgálatára érzékeny PCR módszert dolgoztunk ki. A PCR szűrés során pozitív, új típusnak látszó adenovírusok további vizsgálatát tervezzük. | In the framework of the project, we have studied adenoviruses that seemed to have great importance from the viewpoint of taxonomy. We determined and analyzed the nucleotide sequence of the full genome of two adenovirus isolates originating from Old World monkeys, because such viruses have not been examined before. The full genome sequencing of a goose and a turkey adenovirus, both isolated in Hungary, is almost finished. The purpose of the analysis of these avian adenoviruses was to increase the number of well-characterized members of the genus Aviadenoviruses. With phylogenetic calculations, we have confirmed that aviadenoviruses have a long co-evolutionary history with their avian hosts. Full genome analysis of a snake and a fish adenovirus will help to understand the large-scale evolutionary relations within the family Adenoviridae. Full genome sequencing of a novel siadenovirus is also in progress. The virus, that has caused mortality among captive birds of prey in England, will be only the third member in the genus Siadenovirus. Every adenovirus being studied represents a novel adenovirus species, thus criteria set for the demarcation of this taxon can also be evaluated. For the detection of biodiversity of adenoviruses circulating in the nature, a very sensitive PCR method was elaborated. We plan to further characterize those novel adenovirus candidates that are being detected during screening with PCR

A Method for Measuring Normal and Shear Stiffness of Laminate Stacks of Electric Motors

Structural simulations of electric motors require precise material models. Laminate stacks that are made of several identical steel sheets are particularly challenging to simulate using FEA. The structural stiffness of laminate stacks usually follows transversal isotropic behavior. Measuring a complete laminate stack used in passenger cars is challenging due to its size and the high testing load needed to reach real loads experienced while in operation. A new method capable of performing such measurements is presented in this article, with the help of equipment normally used for testing structures used in civil engineering. Two sets of exemplary results are presented utilizing this measurement procedure, that were performed on a real automotive rotor laminate stack: axial compression stiffness from a cyclic test, and shear stiffness at various axial preload levels. In the axial compression load case, the loading and unloading curves form a hysteresis, that changes in every test cycle. Shear stiffness shows high dependance on the axial compression preload. After loading and unloading the stack with shear loads, significant plastic deformations remain

Detection and partial genetic characterisation of novel avi- and siadenoviruses in racing and fancy pigeons (Columba livia domestica)

Up to now, only a single adenovirus (AdV) isolate seemingly specific for pigeons, hence named pigeon AdV-1 (PiAdV-1), has been characterised at DNA sequence level. In the present work, the prevalence and diversity of AdVs occurring in domestic pigeon were examined by a survey performed on randomly collected samples using a very efficient, consensus nested PCR targeting the viral DNA polymerase gene. The newly detected viruses were characterised by sequencing and phylogeny analysis. Amplification of additional genome fragments was attempted by the use of several other PCR methods aiming at the hexon gene. During a 4-year survey, samples from dead or live, healthy pigeons originating from 27 lofts were examined in Hungary. Almost 50% of the samples (48 out of 97) proved to be positive for AdV. Sequence analysis revealed the presence of four hitherto unknown pigeon AdV types. PiAdV-1 was also identified in one sample. Two novel viruses named PiAdV-2 and -3 were found to belong to the genus Aviadenovirus, and two other novel types (PiAdV-4 and -5) to the genus Siadenovirus. This is the first report on the occurrence of siadenoviruses in birds belonging to the order Columbiformes. Approximately two-thirds of the PiAdV-2 genome was sequenced and analysed

The mutualistic fungus Piriformospora indica protects barley roots from a loss of antioxidant capacity caused by the necrotrophic pathogen Fusarium culmorum

Fusarium culmorum causes root rot in barley (Hordeum vulgare), resulting in severely reduced plant growth and yield. Pretreatment of roots with chlamydospores of the mutualistic root-colonizing basidiomycete Piriformospora indica (Agaricomycotina) prevented necrotization of root tissues and plant growth retardation commonly associated with Fusarium root rot. Quantification of Fusarium infections with a real-time PCR assay revealed a correlation between root rot symptoms and the relative amount of fungal DNA. Fusarium-infected roots showed reduced levels of ascorbate and glutathione (GSH), along with reduced activities of antioxidant enzymes such as superoxide dismutase (SOD), ascorbate peroxidase (APX), glutathione reductase (GR), dehydroascorbate reductase (DHAR), and monodehydroascorbate reductase (MDHAR). Consistent with this, Fusarium-infected roots showed elevated levels of lipid hydroperoxides and decreased ratios of reduced to oxidized forms of ascorbate and glutathione. In clear contrast, roots treated with P. indica prior to inoculation with F. culmorum showed levels of ascorbate and GSH that were similar to controls. Likewise, lipid peroxidation and the overall reduction in antioxidant enzyme activities were largely attenuated by P. indica in roots challenged by F. culmorum. These results suggest that P. indica protects roots from necrotrophic pathogens at least partly, through activating the plant’s antioxidant capacity