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    Incidencia del contenido inicial de residuos en frutas sobre los aceites esenciales cítricos

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    Las exportaciones de productos cítricos tienen un alto impacto en la economía regional. A fin de adecuarse a la calidad exigida por los mercados internacionales debe efectuarse un adecuado manejo de la producción en todos sus aspectos. Los niveles aceptados de residuos de plaguicidas tienden a ser cada vez menores. La aplicación de plaguicidas tales como: O-fenilfenol, clorpirifos, imazalil, procloraz, bromopropilato, cipermetrina,y thiabendazole en los cultivos y/o empaques hace factible la presencia de residuos en las frutas, pudiendo consecuentemente persistir en los jugos y aceites esenciales. Se plantearon como objetivos evaluar los residuos presentes en las frutas y su evolución en el proceso de industrialización de aceites esenciales. Se aplicaron técnicas extractivas tales como, microextracción en fase sólida y método QuEChERS modificado. Las determinaciones e identificación de los analitos se efectuaron por cromatografía gaseosa con detectores de microcaptura de electrones, de nitrógeno-fósforo, espectrometría de masa y cromatografía líquida con arreglo de diodos y fluorescencia. Los datos estadísticos indicaron que las metodologías analíticas son lineales en el rango de concentraciones previsto, de adecuada precisión, alta sensibilidad y recuperación. Dado que existe efecto matriz, en todos los casos se adoptó el método de calibración con muestras adicionadas. Los resultados de tres temporadas de producción indicaron que los tipos de plaguicidas y los niveles detectados son muy variables, aún para un mismo analito, debido posiblemente a la diferencia y variabilidad de los lotes de frutas ingresadas. La carga inicial de residuos en la fruta disminuye aproximadamente un 40 a 50%, debido al proceso de lavado y cepillado en la línea. En aceite pulido los valores medios de residuos expresados en mg/kg presentaron diferencias significativas para los diferentes plaguicidas. Los valores de persistencia relativa en el aceite, respecto a los residuos en frutas post lavado, no superaron en su mayoría el 10%. Los niveles residuales en los aceites descerados variaron ligeramente respecto al pulido, posiblemente debido a las características fisicoquímicas de los analito, las cuales inciden en la partición de los mismos en las diferentes fases, y los valores de persistencia relativa no superaron el 15%. Siendo el O-fenilfenol el de mayor persistencia, tanto en aceite pulido como descerado. Podemos concluir que la mayor eliminación de los residuos se produce en el proceso de lavado y en menor porcentaje en el pulido y descerado debido a la partición de los analitos en las fases acuosa, oleosa y cerosa.Centro de Investigaciones del Medioambient

    Calidad de agua en el Río Uruguay en el tramo Tortuga Alegre-Puerto Yeruá utilizando bioindicadores (Diatomeas)

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    Se consideró relevante monitorear y caracterizar la calidad del agua en un tramo del río Uruguay,utilizando diatomeas, como bioindicadoras, su relación con factores fisicoquímicos y plaguicidas, en un ciclo anual. Los máximos valores de los parámetros fisicoquímicos y DBO se registraron en su mayoría en La Verde, Benito Lejerén y Yuquerí Chico. Por otro lado, las diatomeas determinadas en estos sitios, fueron tolerantes a altos niveles de contaminación, demostrando así, que son excelentes bioindicado-ras de la calidad del agua. Se identificaron 285 taxones distribuidos en los géneros Nitzschia, Navicula, Gomphonema, entre otros. El índice de Diatomeas Pampeano, resultó apropiado para la evaluación de la calidad de agua en este tramo del río. Sin embargo, en algunos sitios se encontró dominancia de es-pecies que no cuentan con un valor asignado de IDP, por lo tanto, se plantea la necesidad de elaborar un nuevo índice local. Se determinó la presencia de plaguicidas organoclorados a lo largo de todo el año, alcanzando niveles muy elevados en el cuarto muestreo. Resulta importante, que los programas de monitoreo de calidad de agua se complementen además, con la incorporación de bioindicadores, lo cual, sería de gran utilidad para el asesoramiento del estado trófico de ríos.Fil: Novoa, Martin David. Universidad Nacional de Entre Rios. Facultad de Ciencias de la Alimentacion. Laboratorio de Investigacion de Residuos En Alimentos.; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Raviol, Fabricio H.. Universidad Nacional de Entre Rios. Facultad de Ciencias de la Alimentacion. Laboratorio de Investigacion de Residuos En Alimentos.; ArgentinaFil: Munitz, Martín Sebastián. Universidad Nacional de Entre Rios. Facultad de Ciencias de la Alimentacion. Laboratorio de Investigacion de Residuos En Alimentos.; ArgentinaFil: Medina, María Belén. Universidad Nacional de Entre Rios. Facultad de Ciencias de la Alimentacion. Laboratorio de Investigacion de Residuos En Alimentos.; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Subovich, Gladys Ester. Universidad Nacional de Entre Rios. Facultad de Ciencias de la Alimentacion. Laboratorio de Investigacion de Residuos En Alimentos.; ArgentinaFil: Parma, Fernando Andrés. Universidad Nacional de Entre Rios. Facultad de Ciencias de la Alimentacion. Laboratorio de Investigacion de Residuos En Alimentos.; ArgentinaFil: Williman, Celia. Universidad Nacional de Entre Rios. Facultad de Ciencias de la Alimentacion. Laboratorio de Investigacion de Residuos En Alimentos.; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Page, Lucas Matías. Universidad Nacional de Entre Rios. Facultad de Ciencias de la Alimentacion. Laboratorio de Investigacion de Residuos En Alimentos.; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Diaz Velez, Marcela. Universidad Nacional de Entre Rios. Facultad de Ciencias de la Alimentacion. Laboratorio de Investigacion de Residuos En Alimentos.; Argentin

    The Mammalian Disaggregase Machinery: Hsp110 Synergizes with Hsp70 and Hsp40 to Catalyze Protein Disaggregation and Reactivation in a Cell-Free System

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    Bacteria, fungi, protozoa, chromista and plants all harbor homologues of Hsp104, a AAA+ ATPase that collaborates with Hsp70 and Hsp40 to promote protein disaggregation and reactivation. Curiously, however, metazoa do not possess an Hsp104 homologue. Thus, whether animal cells renature large protein aggregates has long remained unclear. Here, it is established that mammalian cytosol prepared from different sources possesses a potent, ATP-dependent protein disaggregase and reactivation activity, which can be accelerated and stimulated by Hsp104. This activity did not require the AAA+ ATPase, p97. Rather, mammalian Hsp110 (Apg-2), Hsp70 (Hsc70 or Hsp70) and Hsp40 (Hdj1) were necessary and sufficient to slowly dissolve large disordered aggregates and recover natively folded protein. This slow disaggregase activity was conserved to yeast Hsp110 (Sse1), Hsp70 (Ssa1) and Hsp40 (Sis1 or Ydj1). Hsp110 must engage substrate, engage Hsp70, promote nucleotide exchange on Hsp70, and hydrolyze ATP to promote disaggregation of disordered aggregates. Similarly, Hsp70 must engage substrate and Hsp110, and hydrolyze ATP for protein disaggregation. Hsp40 must harbor a functional J domain to promote protein disaggregation, but the J domain alone is insufficient. Optimal disaggregase activity is achieved when the Hsp40 can stimulate the ATPase activity of Hsp110 and Hsp70. Finally, Hsp110, Hsp70 and Hsp40 fail to rapidly remodel amyloid forms of the yeast prion protein, Sup35, or the Parkinson's disease protein, alpha-synuclein. However, Hsp110, Hsp70 and Hsp40 enhanced the activity of Hsp104 against these amyloid substrates. Taken together, these findings suggest that Hsp110 fulfils a subset of Hsp104 activities in mammals. Moreover, they suggest that Hsp104 can collaborate with the mammalian disaggregase machinery to rapidly remodel amyloid conformers

    Small Heat Shock Proteins Potentiate Amyloid Dissolution by Protein Disaggregases from Yeast and Humans

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    The authors define how small heat-shock proteins synergize to regulate the assembly and disassembly of a beneficial prion, and then they exploit this knowledge to identify the human amyloid depolymerase

    Analysis of Chaperone mRNA Expression in the Adult Mouse Brain by Meta Analysis of the Allen Brain Atlas

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    The pathology of many neurodegenerative diseases is characterized by the accumulation of misfolded and aggregated proteins in various cell types and regional substructures throughout the central and peripheral nervous systems. The accumulation of these aggregated proteins signals dysfunction of cellular protein homeostatic mechanisms such as the ubiquitin/proteasome system, autophagy, and the chaperone network. Although there are several published studies in which transcriptional profiling has been used to examine gene expression in various tissues, including tissues of neurodegenerative disease models, there has not been a report that focuses exclusively on expression of the chaperone network. In the present study, we used the Allen Brain Atlas online database to analyze chaperone expression levels. This database utilizes a quantitative in situ hybridization approach and provides data on 270 chaperone genes within many substructures of the adult mouse brain. We determined that 256 of these chaperone genes are expressed at some level. Surprisingly, relatively few genes, only 30, showed significant variations in levels of mRNA across different substructures of the brain. The greatest degree of variability was exhibited by genes of the DnaJ co-chaperone, Tetratricopeptide repeat, and the HSPH families. Our analysis provides a valuable resource towards determining how variations in chaperone gene expression may modulate the vulnerability of specific neuronal populations of mammalian brain

    Disaggregases, molecular chaperones that resolubilize protein aggregates

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    De la contrainte à l'accompagnement : 30 ans d'UTN en Rhône-Alpes

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    National audienceAprès une intense période d'aménagement de la montagne après-guerre, la procédure des unités touristiques nouvelles (UTN) marque une rupture pour l'implantation des stations nouvelles; entérinée par la loi Montagne en 1985 et toilettée à l'occasion de l'acte II, elle a subi de nombreuses évolutions que l'article se propose d'explorer et de mettre en perspective avec l'évolution des stations

    Incidencia de la carga inicial de pesticidas en fruta sobre los niveles residuales en aceites esenciales cítricos

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    Citrus represent an important crop in Argentina. Pesticides are usually applied for disease control in orchard and packinghouses. The present study aimed to optimize different methods for pesticide residues analysis in citrus fruits and essential oils, and to determine the effect of the initial pesticide charge in fruits upon the essential oils obtained during the industrial process. The calibration was performed on spiked samples because of the occurrence of matrix effect. The suggested methods were found to be selective, precise, highly accurate and sensitive. The amount of residues observed in fresh fruit varied depending on the different lots and pesticides. The persistence in post washed fruit, polished and dewaxed oils were different for each pesticide. The partitioning in the wax phase may be the reason for the slight residue reduction observed in the dewaxed oils. Results showed that the initial pesticide charge in fruits is significant.Na Argentina, a produção de citros é muito importante. Para o controle de doenças e pragas nos pomares e embalagens são utilizados diferentes pesticidas. Os objetivos deste estudo foram otimizar diferentes metodologias analíticas para a determinação de resíduos de pesticidas em fruta e óleo essencial, e determinar o efeito da carga inicial nos óleos essenciais obtidos no processo industrial. A calibração foi realizada com matriz adicionada devido ao efeito de matriz. Os métodos propostos foram seletivos, precisos, exatos e sensíveis. A concentração de resíduos encontrados na fruta fresca variou dependendo do lote e pesticidas. A persistência em fruta após lavada, óleo polido e desparafinado foi diferente para cada analito. Foi observada uma ligeira redução dos resíduos no óleo desparafinado devido provavelmente à partição deles na fase de cera. Os resultados mostram que a carga inicial na fruta é significante.En Argentina, la producción cítrica es muy importante. Para el control de enfermedades y plagas en las quintas y empaques son utilizados diferentes pesticidas. Los objetivos de este estudio fueron: optimizar diferentes metodologías analíticas para la determinación de residuos de pesticidas en fruta y aceite esencial, y determinar el efecto de la carga inicial sobre los aceites esenciales obtenidos durante el proceso industrial. La calibración se llevó a cabo con matriz adicionada debido al efecto matriz. Los métodos propuestos fueron selectivos, precisos, exactos y sensibles. La concentración de residuos encontrados en fruta fresca varió dependiendo del lote y pesticida. La persistencia en fruta postlavada, aceite pulido y descerado fue distinta para cada analito. Se observó una ligera reducción de los residuos en el aceite descerado debido probablemente a la partición de los mismos en la fase cerosa. Los resultados muestran que la carga inicial en la fruta es significante

    Insights into the structural dynamics of the Hsp110–Hsp70 interaction reveal the mechanism for nucleotide exchange activity

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    Hsp110 proteins are relatives of canonical Hsp70 chaperones and are expressed abundantly in the eukaryotic cytosol. Recently, it has become clear that Hsp110 proteins are essential nucleotide exchange factors (NEFs) for Hsp70 chaperones. Here, we report the architecture of the complex between the yeast Hsp110, Sse1, and its cognate Hsp70 partner, Ssa1, as revealed by hydrogen–deuterium exchange analysis and site-specific cross-linking. The two nucleotide-binding domains (NBDs) of Sse1 and Ssa1 are positioned to face each other and form extensive contacts between opposite lobes of their NBDs. A second contact with the periphery of the Ssa1 NBD lobe II is likely mediated via the protruding C-terminal α-helical subdomain of Sse1. To address the mechanism of catalyzed nucleotide exchange, we have compared the hydrogen exchange characteristics of the Ssa1 NBD in complex with either Sse1 or the yeast homologs of the NEFs HspBP1 and Bag-1. We find that Sse1 exploits a Bag-1-like mechanism to catalyze nucleotide release, which involves opening of the Ssa1 NBD by tilting lobe II. Thus, Hsp110 proteins use a unique binding mode to catalyze nucleotide release from Hsp70s by a functionally convergent mechanism

    Chaperone network in the yeast cytosol: Hsp110 is revealed as an Hsp70 nucleotide exchange factor

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    The Hsp110 proteins, exclusively found in the eukaryotic cytosol, have significant sequence homology to the Hsp70 molecular chaperone superfamily. Despite this homology and the cellular abundance of these proteins, the precise functional role has remained undefined. Here, we present the intriguing finding that the yeast homologue, Sse1p, acts as an efficient nucleotide exchange factor (NEF) for both yeast cytosolic Hsp70s, Ssa1p and Ssb1p. The mechanism involves formation of a stable nucleotide-sensitive complex, but does not require ATP hydrolysis by Sse1p. The NEF activity of Sse1p stimulates in vitro Ssa1p-mediated refolding of thermally denatured luciferase, and appears to have an essential role in vivo. Overexpression of the only other described cytosolic NEF, Fes1p, can partially compensate for a lethal sse1,2Δ phenotype, however, the cells are sensitive to stress conditions. Furthermore, in the absence of Sse, the in vivo refolding of thermally denatured model proteins is affected. This is the first report of a nucleotide exchange activity for the Hsp110 class of proteins, and provides a key piece in the puzzle of the cellular chaperone network
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