Cell-cell communication between Mouse mammary epithelial cells and 3T3-L1 preadipocytes: effect on triglyceride accumulation and cell proliferation

Interaction between parenchyma and stroma is essential for organogenesis, morphogenesis, and differentiation. Mammary gland has being the chosen model for developmental biologist because the most striking changes in morphology and function take place after birth. We have demonstrated a regulation of triglyceride accumulation by protein factors synthesized by normal mouse mammary gland epithelial cells (NMMG), acting on a cell line, 3T3-L1, long used as a model for adipogenesis. In this paper, we demonstrate that this inhibitory effect seems to be shared by other cells of epithelial origin but not by other cell types. We found a regulation of cell proliferation when NMMG cells are cultured in the presence of conditioned media from Swiss 3T3 or 3T3-L1 cells. We found a possible point of regulation for the mammary factor on a key enzyme of the lipid metabolic pathway, the glycerol-3-phosphate dehydrogenase. The inhibitory factor seems to have an effect on this enzyme´s activity and reduces it. The results presented herein contribute to the understanding of cell-cell communication in a model of a normal mammary gland.Fil: Julianelli, Vanina Laura. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Guerra, Liliana Noemi. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Calvo, Juan Carlos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentin

Microenvironmental influence on microtumour infiltration patterns: 3D-mathematical modelling supported by: In vitro studies

Mathematical modelling approaches have become increasingly abundant in cancer research. Tumour infiltration extent and its spatial organization depend both on the tumour type and stage and on the bio-physicochemical characteristics of the microenvironment. This sets a complex scenario that often requires a multidisciplinary and individually adjusted approach. The ultimate goal of this work is to present an experimental/numerical combined method for the development of a three-dimensional mathematical model with the ability to reproduce the growth and infiltration patterns of a given avascular microtumour in response to different microenvironmental conditions. The model is based on a diffusion-convection reaction equation that considers logistic proliferation, volumetric growth, a rim of proliferative cells at the tumour surface, and invasion with diffusive and convective components. The parameter values of the model were fitted to experimental results while radial velocity and diffusion coefficients were made spatially variable in a case-specific way through the introduction of a shape function and a diffusion-limited-aggregation (DLA)-derived fractal matrix, respectively, according to the infiltration pattern observed. The in vitro model consists of multicellular tumour spheroids (MTSs) of an epithelial mammary tumour cell line (LM3) immersed in a collagen I gel matrix with a standard culture medium ("naive" matrix) or a conditioned medium from adipocytes or preadipocytes ("conditioned" matrix). It was experimentally determined that both adipocyte and preadipocyte conditioned media had the ability to change the MTS infiltration pattern from collective and laminar to an individual and atomized one. Numerical simulations were able to adequately reproduce qualitatively and quantitatively both kinds of infiltration patterns, which were determined by area quantification, analysis of fractal dimensions and lacunarity, and Bland-Altman analysis. These results suggest that the combined approach presented here could be established as a new framework with interesting potential applications at both the basic and clinical levels in the oncology area.Fil: Luján, Emmanuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Centro de Simulación Computacional para Aplicaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Soto, Daniela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Rosito, María Sol. Consejo Nacional de Investigaciónes Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Astronomía y Física del Espacio. - Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Astronomía y Física del Espacio; ArgentinaFil: Soba, Alejandro. Comisión Nacional de Energía Atómica; ArgentinaFil: Guerra, Liliana Noemi. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Calvo, Juan Carlos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Marshall, Guillermo Ricardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Física del Plasma. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Física del Plasma; ArgentinaFil: Suárez, Cecilia Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Física del Plasma. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Física del Plasma; Argentin

In silico generation of tumor invasion patterns

There is much bibliography about mathematical models of tumor growth based on reaction-diffusion equations that describe during the time the proliferation and invasion of tumor cells into peripheric host tissue. In a previous work we have developed a model of this kind that describe a glioma growth inside the human brain (Suárez et al 2012). Here we present a derived of this model applied to the growth and invasion of multicellular spheroids of the LM3 cell line immersed in a collagen I matrix, an in vitro model of a microtumor in avascular stage (preangiogenic). It is known that invasion patterns in this model depend on the cell line used as well as on the physical characteristics and chemical components of the surrounding matrix. The mathematical model initiates from a unique tumor cell that proliferates (monoclonal tumor origin) and then considers two stages: an initial benign stage with only proliferation and a later malign stage where invasion starts. The reaction term of the equation considers a logistic cell proliferation and the diffusion term, based on the Fick's law, simulates the volumetric growth of the spheroid as well as the invasion of tumor cells in host tissue. There is also a third term of radial invasion derived from a source of cells located in the spheroid surface. Parameter ranges related to invasion patterns and morphology were obtained from the analysis of experimental images of spheroid invasion. When the model were breed with these ranges, it was able of generate aleatory invasion patterns similar to the experimentally observed. This kind of experimental-numerical interaction has a wide application potential at the moment of predicting the clinical behaviour of a tumor in a patient-specific way in base on biopsy tissue obtained from a given patient.Fil: Luján, Emmanuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Física del Plasma. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Física del Plasma; ArgentinaFil: Soba, Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Centro de Simulación Computacional para Aplicaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Visacovsky, Nicolás. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Computación; ArgentinaFil: Guerra, Liliana Noemi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Marshall, Guillermo Ricardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Física del Plasma. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Física del Plasma; ArgentinaFil: Suárez, Cecilia Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Física del Plasma. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Física del Plasma; ArgentinaVI Argentinian Conference of Bioinformatics and Computational BiologyArgentinaUniversidad Nacional del Su

Modelado matemático de un patrón de invasión tumoral a través de ecuaciones de reacción-difusión y fractales DLA (diffusion limited aggregation)

Siendo el cáncer una enfermedad altamente compleja, es necesario que su estudio se encuadre dentro de la biología de sistemas. En el caso del tumor mamario, ha sido ampliamente establecida la importancia del estroma, y específicamente del adipocito, como uno de los principales reguladores de la progresión tumoral. Recientemente hemos presentado un modelo matemático basado en una ecuaciónde reacción-difusión-convección que logra describir y predecir el crecimiento e infiltración de esferoides multicelulares de una línea tumoral epitelial mamaria inmersos en un gel tridimensional de colágeno I (modelo in vitro de un microtumor de estadio avascular infiltrando una matriz hospedadora). En el presente trabajo se presenta una derivación de ese modelo que logra describir en este caso un patrón de diferente al anterior resultante de la incorporación de medio condicionado proveniente de adipocitos al microambiente tumoral de los esferoides. El modelo describe la zona de infiltración tumoral a través de un término de proliferación celular, una fuente de células en la superficie delesferoide y un componente difusivo de la invasión. La descripción del tipo de invasión en este caso se logra incorporando una difusión espacialmente variable dependiente de una matriz fractal generada por una variante del método de DLA (diffusion limited aggregation). Los valores de los principales parámetrosdel modelo se estiman a partir de datos experimentales. Las simulaciones obtenidas se ajustan cualitativa y semicuantitativamente a los resultados in vitro, según muestran los análisis de fractalidad realizados por los métodos de boxcounting y lagunaridad. La potencialidad de esta interacción teórico-experimental es muy amplia para estudiar las relaciones entre un tumor y su microambitente circundante.Fil: Luján, Emmanuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Física del Plasma. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Física del Plasma; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Centro de Simulación Computacional para Aplicaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Soto, Daniela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Rosito, María S.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Soba, Alejandro. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Guerra, Liliana Noemi. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Luján; ArgentinaFil: Marshall, Guillermo Ricardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Física del Plasma. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Física del Plasma; ArgentinaFil: Suárez, Cecilia Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Física del Plasma. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Física del Plasma; Argentin

N-Acetylcysteine Inhibits Lipids Production in Mature Adipocytes through the Inhibition of Peroxisome Proliferator-Activated Receptor

Aims: Reports regarding the effects of antioxidants in obesity have been contradictory. AntioxidantN-acetylcysteine is usually considered a nutritional supplement. Our aim is to evaluate bioactivity ofN-acetylcysteine (NAC) on mature adipocytes, which is a close model to in vivo condition.Study Design: In vitro study.Place and Duration of Study: Department of Basic Science (Universidad Nacional de Lujan),Department of Chemical Biology (Universidad de Buenos Aires), CONICET ? INEDES andCONICET ? IQUIBICEN, between March 2017 and June 2019.Methodology: We evaluated the bioactivity of different concentrations of NAC for 5 days (0.01 mMto 5 mM) on fully differentiated 3T3-L1 cells (mature adipocytes).Results: We demonstrated that NAC treatment was not toxic to mature adipocytes. Only 5mM NACinhibited reactive oxygen species production. 5 mM NAC treatment resulted in a 60% decrease incellular triglycerides content and inhibited 70% cholesterol accumulation. We also determined themRNA and protein expression levels of Peroxisome Proliferator-Activated Receptor as well as,mRNA levels of lipid protein Perilipin in NAC treated adipocytes; we observed that 5mM NACtreatment caused nearly 30% decrease in the expression of these parameters.Conclusion: These results suggest that NAC could avoid lipid accumulation in mature adipocytes;the antioxidant NAC could be beneficial in obesity treatment.Fil: Soto, Daniela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Martini, Claudia Noemí. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Frontera, Evelyn Micaela. Universidad Nacional de Luján. Departamento de Ciencias Básicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Montaldo, Laura Andrea. Universidad Nacional de Luján. Departamento de Ciencias Básicas; ArgentinaFil: Vila, Maria del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Calvo, Juan Carlos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Guerra, Liliana Noemi. Universidad Nacional de Luján. Instituto de Ecología y Desarrollo Sustentable. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ecología y Desarrollo Sustentable; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentin

Detection and characterisation of zinc transporter 8 autoantibody in Argentinian patients with type 1 diabetes mellitus

Introducción y objetivos El transportador de Zn8 (ZnT8), identificado como el cuarto autoantígeno inmunodominante en la diabetes mellitus (DM) tipo 1, presenta un polimorfismo en el residuo 325 (Arg/Trp). Sin embargo, aún no se encuentra suficientemente definido el papel de este residuo en la inmunorreactividad de los autoanticuerpos anti-ZnT8 (ZnT8A). En este contexto, el objetivo del presente trabajo involucró la detección y caracterización inmunoquímica de los ZnT8A en DM tipo 1 empleando diferentes variantes antigénicas de ZnT8 con Arg o Trp en la posición 325, o bien construcciones quiméricas con ambos aminoácidos en dicha posición. Materiales y métodos Se evaluaron 100 sueros de pacientes argentinos con reciente diagnóstico de DM tipo 1. La determinación de ZnT8A se realizó mediante el ensayo de unión de radioligando, utilizando distintas variantes antigénicas: ZnT8-Arg325, ZnT8-Trp325, ZnT8-Arg-Trp325, ZnT8-Arg-Arg325 y ZnT8-Trp-Trp325. Paralelamente se determinó la presencia de los otros marcadores de autoinmunidad para DM por ensayo de unión de radioligando. Resultados De los 100 pacientes estudiados, 65 fueron ZnT8A+ para al menos alguna de las variantes antigénicas empleadas. Ocho reconocieron todas las formas recombinantes de ZnT8. La mayoría (56) resultaron positivos para el heterodímero (ZnT8-Arg-Trp325), 25 de los cuales reconocieron además el homodímero ZnT8-Arg-Arg325 y el monómero ZnT8-Arg325. Nueve pacientes presentaron únicamente ZnT8A como marcador de autoinmunidad. Por otro lado, los niveles de señales obtenidos con el heterodímero fueron significativamente mayores a los niveles alcanzados empleando cualquiera de las otras variantes antigénicas (mediana 17,99 vs. 10,71; 6,32; 5,66 y 4,44 SD scores para ZnT8-Arg325, ZnT8-Trp325, ZnT8-Arg-Arg325 y ZnT8-Trp-Trp325, respectivamente; p < 0,05, test t de Mann-Whitney). Conclusiones Se logró caracterizar inmunoquímicamente los ZnT8A presentes en pacientes argentinos con DM tipo 1 empleando diferentes variantes antigénicas de ZnT8. Se observó que la incorporación de ZnT8A, en combinación con los marcadores clásicos, incrementa la sensibilidad diagnóstica de autoinmunidad. La reactividad exclusiva de ZnT8A por las variantes antigénicas que contienen arginina en el residuo 325 evidencia la existencia de epítopes dependientes del aminoácido presente en dicho residuo. Además, la aplicación de variantes diméricas reveló la existencia de epítopes definidos por la estructura cuaternaria de ZnT8. La construcción heterodimérica fue la que mostró la mejor combinación de sensibilidad y especificidad a los fines del screening rutinario de ZnT8A.Introduction and objectives The aim of this study involved the detection and immunochemical characterisation of ZnT8 autoantibodies (ZnT8A) in new-onset type 1 Argentinian diabetic patients. Material and methods One hundred sera from type 1 diabetic patients were tested for ZnT8A. The antigens employed were obtained using cDNA plasmids encoding the C-terminal domains of ZnT8 carrying 325Arg, 325Trp and 3 dimeric constructs (ZnT8-Arg-Trp325, ZnT8-Arg-Arg325 and ZnT8-Trp-Trp325). ZnT8A were assessed by radioligand binding assay (RBA). Other islet-autoantibodies were also tested by RBA. Results Among the 100 type 1 diabetic patients, the prevalence of ZnT8A was 65.0%, 8 recognized all recombinant forms of ZnT8. Most patients (56) were positive for the heterodimer (ZnT8-Arg-Trp325), being 25 of them also positive for the homodimer ZnT8-Arg-Arg325 and monomer ZnT8-Arg325. Single reactivity against ZnT8A was found in 9.0% of the group. Besides, the highest signal values were obtained with the heterodimeric variant (median 17.99 vs. 10.71, 6.32, 5.66 and 4.44 SD scores for ZnT8-Arg325, ZnT8-Trp325, ZnT8-Arg-Arg325 y ZnT8-Trp-Trp325, respectively; p < 0.05, Mann-Whitney t test). Conclusion Immunochemical characterisation of ZnT8A present in type 1 Argentinian diabetic patients was accomplished, employing different variants of ZnT8. An increased detection of autoimmunity was found when ZnT8A was employed in combination with the other islet-autoantibodies. The presence of autoantibodies that recognized only constructions containing Arg reveals the existence of epitopes dependent of the amino acid present at residue 325. Furthermore, application of dimeric constructions revealed the existence of quaternary structure–defined epitopes which were recognized by type 1 diabetic patients. Finally, the highest combined sensitivity and specificity for routine screening of ZnT8A was accomplished with the heterodimeric construction.Fil: Faccinetti, Natalia Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Rovitto, Bruno David. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Guerra, Luciano Lucas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Sabljic, Adriana Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Iacono, Ruben Francisco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Trifone, Liliana. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: Poskus, Edgardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Trabucchi, Aldana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Valdez, Silvina Noemi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentin

Thyroid hormone effect in human hepatocytes

We have already demonstrated that a combined treatment of methimazole and an antioxidant mixture improved the condition of hyperthyroid patients both biochemically and clinically. Elevated thyroid hormone levels might trigger signs and symptoms of hyperthyroidism through the increase of free radicals. To study the direct effect of thyroid hormone on cellular markers of oxidative stress, we carried out in vitro assays in which 0.1-20.0 nM T3 (6.5-1300.0 ng/dl) doses were added to culture media of the human hepatocyte cell line Hep G2 for 1-24 h. T3 increased malondialdehyde (MDA) and intracellular oxidized glutathione (GSSG) levels; SOD activity was also higher with hormone treatment, whereas catalase and glutathione peroxidase activities showed no variation at different T3 doses and during all experimental times. When ascorbic acid was added to the culture, the MDA level decreased and SOD activity was increased. With higher doses of T3 (e.g. 200 nM), cell death occurred (69% of apoptotic cells). The increase in SOD activity was not enough to overcome the effect of T3 since MDA and GSSG remained high during a 24-h experiment. We showed a beneficial effect of ascorbic acid when cells were exposed to a T3 dose of 20 nM, a higher level of hormone than that achieved in hyperthyroidism.Fil: Miler, Eliana Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Rios, Maria del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Dominguez, Gabriela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Guerra, Liliana Noemi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentin

N-Acetylcysteine delivery with silica nanoparticles into 3T3-L1 adipocytes

Background: The addition of 5 mM N-Acetylcysteine (NAC) to 3T3-L1 adipocytes culture inhibits the accumulation of triglycerides (Tg) by 50%, but after 48 h uptake was only 16% of total NAC available. Based on these results, the aim of this study is to increase the NAC cellular uptake by encapsulating it in silica nanoparticles (NPs). Materials & methods: Silica NPs, 20 ± 4.5 nm in size, were developed, with an inner cavity loaded with 5 mM NAC. At 48 h after treatment, there was a dose-dependent cytotoxic effect. We attempted to reduce the cytotoxicity of silica NPs by coating them with bovine serum albumin. Results: While we obtained nontoxic bovine serum albumin coated NPs, their effect on Tg cellular accumulation was also reduced.Fil: Frontera, Evelyn Micaela. Universidad Nacional de Luján. Departamento de Ciencias Básicas; ArgentinaFil: Desimone, Martín Federico. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: de Marzi, Mauricio Cesar. Universidad Nacional de Luján. Instituto de Ecología y Desarrollo Sustentable. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ecología y Desarrollo Sustentable; Argentina. Universidad Nacional de Luján. Departamento de Ciencias Básicas; ArgentinaFil: Guerra, Liliana Noemi. Universidad Nacional de Luján. Instituto de Ecología y Desarrollo Sustentable. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ecología y Desarrollo Sustentable; Argentina. Universidad Nacional de Luján. Departamento de Ciencias Básicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentin

N-acetylcysteine inhibits kinase phosphorylation during 3T3-L1 adipocyte differentiation

Reports investigating the effects of antioxidants on obesity have provided contradictory results. We have previously demonstrated that treatment with the antioxidant N-acetylcysteine (NAC) inhibits cellular triglyceride (Tg) accumulation as well as total cellular monoamine oxidase A (MAOA) expression in 3T3-L1 mature adipocytes (Calzadilla et al., Redox Rep. 2013;210-218). Here we analyzed the role of NAC on adipogenic differentiation pathway.Fil: Soto, Daniela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Gomez Serrano, Marìa. Universidad Autónoma de Madrid; España. Consejo Superior de Investigaciones Cientificas; EspañaFil: Pieralisi, Azul. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Calvo, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Peral, Belén. Universidad Autónoma de Madrid; España. Consejo Superior de Investigaciones Cientificas; EspañaFil: Guerra, Liliana Noemi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Universidad Nacional de Luján. Instituto de Ecología y Desarrollo Sustentable. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ecología y Desarrollo Sustentable; Argentin

Antioxidants and methimazole in the treatment of Graves' disease: Effect on urinary malondialdehyde levels

We have postulated that metabolic oxidation could be the source of signs and symptoms of hyperthyroidism. The present study was designed to evaluate urinary malondialdehyde levels in Graves' disease and compare this oxidative stress biomarker with the clinical evolution of patients suffering this illness. We evaluated the concentration of urinary and serum malondialdehyde (MDA) in 36 patients with Graves' disease. Patients were treated with the antithyroid drug methimazole (MMI; Group A) or antioxidant mixture (200 mg vitamin E, 3 mg β-carotene, 250 mg vitamin C, 1 mg Cu, 7.5 mg Zn, 1.5 mg Mn, and 15 μg Se; Group B). MDA concentrations were higher in hyperthyroid patients compared to euthyroid controls, and a positive correlation was observed between serum and urinary MDA levels. Group A decreased urinary MDA to control values. There was a positive correlation between the clinical score and the heart rate of patients with urinary MDA before and during the treatment with MMI (Group A). Similar results were observed after treatment with the antioxidant mixture. Urinary MDA might be a good parameter in the follow-up of patients during MMI treatment. We proposed that oxidative stress correlates with signs and symptoms of hyperthyroidism.Fil: Guerra, Liliana Noemi. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Hospital Israelita; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rios, Maria del Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Miler, Eliana Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Moiguer, Silvia. Hospital Israelita; ArgentinaFil: Karner, Mirta. Hospital Israelita; ArgentinaFil: Burdman, Jose Adolfo. Universidad Abierta Interamericana; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Hospital Israelita; Argentin