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Protection efficacy of Argentinian isolates of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis with different genotypes and virulence in a murine model
Paratuberculosis is a chronic disease caused by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map). The disease causes economic losses and, therefore, it is imperative to follow proper control strategies, which should include an effective vaccine. Several strategies have assessed the virulence and immune response of Map strains that could be used as a vaccine. This study evaluates the degree of virulence, immune response, and protection of Argentinian strains of Map with different genotype in a murine model. Four local isolates (Cattle type) with different genotypes (analyzed by MIRU-VNTR and SSRs) were selected and evaluated in a virulence assay in BALB/c mice. This assay allowed us to differentiate virulent and low-virulence Map strains. The less virulent strains (1543/481 and A162) failed to induce a significant production of the proinflammatory cytokine IFNg, whereas the virulent strain 6611 established infection along with a proinflammatory immune response. On the other hand, the virulent strain 1347/498 was efficient in establishing a persistent infection, but failed to promote an important Th1 response compared with 6611 at the evaluated time. We selected the low-virulence strain 1543/498 as a live vaccine and the virulent strain 6611 as a live and inactivated vaccine in a protection assay in mice. Strain 1543/481 failed to protect the animals from challenge, whereas strain 6611, in its live and inactivated form, significantly reduced the CFUs count in the infected mice, although they had different immunological response profiles. The inactivated virulent strain 6611 is a potential vaccine candidate against paratuberculosis to be tested in cattle.Fil: Colombatti Olivieri, María Alejandra. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Moyano, Roberto Damian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Travería, Gabriel Eduardo. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Clínica. Centro de Diagnóstico e Investigaciones Veterinarias; ArgentinaFil: Alvarado Pinedo, María Fiorella. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Clínica. Centro de Diagnóstico e Investigaciones Veterinarias; ArgentinaFil: Mon, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Gravisaco, Maria Jose Federica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Delgado, Fernando Oscar. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Santangelo, María de la Paz. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Romano, Maria Isabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin
Effect of different routes of inoculation on plant-derived VP2 immunogenicity and ability to confer protection against infectious bursal disease
Infectious Bursal Disease Virus (IBDV) is the etiological agent of an immunosuppressive and highly contagious disease that affects young birds causing important economic losses in the poultry industry. The structural protein VP2 has been used for the development of subunit vaccines in a variety of heterologous platforms. We have previously demonstrated that plant-derived VP2 (pVP2) is able to elicit a neutralizing antibody response in chickens when administered intramuscularly (i.m.) in a prime/boost scheme. However, administration via injection is impractical and carries the risk of needle stick injury or pain. Mucosal vaccination is noninvasive and has several advantages over traditional systemic vaccines. Taking this into account and the fact that natural infections with IBDV occur by the oral route, we decided to investigate whether pVP2 was also immunogenic when given intranasally (i.n.) or orally to chickens. In addition, we evaluated if intramuscular vaccination with VP2 plant extract in a more welfarefriendly scheme with less injections and without adjuvant was able to elicit a protective immune response against IBDV as previously seen. We determined that animals inoculated i.m., but not i.n., with the experimental vaccine developed high titres of specific antibodies, with virus neutralizing activity. Also, bursae of animals vaccinated i.m. with pVP2 presented few infiltrating T cells, low viral charge and normal morphology. However, chickens that received the immunogen via nasal or oral route were not protected after challenge. Considering the disadvantages of conventional live-attenuated and inactivated vaccines, a plant-based subunit vaccine represents a viable alternative in the veterinary field. Once again pVP2 has proven to be immunogenic when parentally inoculated. However, further investigations need to be done in order to find an alternative route of administration which is more practical than the intramuscular injection and capable of eliciting a mucosal immune response.Fil: Lucero, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Gómez, Evangelina Raquel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Richetta, Matías Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Chimeno Zoth, Silvina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Carballeda, Juan Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Gravisaco, Maria Jose Federica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Delgado, Fernando Oscar. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Berinstein, Analia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentin
Evaluation of Mycobacterium bovis double knockout mce2-phoP as candidate vaccine against bovine tuberculosis
In this study, a Mycobacterium bovis knockout strain in phoP-phoR and mce2 operons was tested as an antituberculosis experimental vaccine in animal models. The double mutant strain was significantly more attenuated than the wild type strain in inmunocompetent and inmunodeficient mice. Vaccination with the double mutant protected mice against challenge with a virulent M. bovis strain.Fil: Garcia, Elizabeth Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Bianco, María Verónica. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Gravisaco, Maria Jose Federica. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rocha, Rosana V.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Blanco, Federico Carlos. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Bigi, Fabiana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin
An Oral Salmonella-Based Vaccine Inhibits Liver Metastases by Promoting Tumor-Specific T-Cell-Mediated Immunity in Celiac and Portal Lymph Nodes: A Preclinical Study
Primary tumor excision is one of the most widely used therapies of cancer. However, the risk of metastases development still exists following tumor resection. The liver is a common site of metastatic disease for numerous cancers. Breast cancer is one of the most frequent sources of metastases to the liver. The aim of this work was to evaluate the efficacy of the orally administered Salmonella Typhi vaccine strain CVD 915 on the development of liver metastases in a mouse model of breast cancer. To this end, one group of BALB/c mice was orogastrically immunized with CVD 915, while another received PBS as a control. After 24 h, mice were injected with LM3 mammary adenocarcinoma cells into the spleen and subjected to splenectomy. This oral Salmonella-based vaccine produced an antitumor effect, leading to a decrease in the number and volume of liver metastases. Immunization with Salmonella induced an early cellular immune response in mice. This innate stimulation rendered a large production of IFN-γ by intrahepatic immune cells (IHIC) detected within 24 h. An antitumor adaptive immunity was found in the liver and celiac and portal lymph nodes (LDLN) 21 days after oral bacterial inoculation. The antitumor immune response inside the liver was associated with increased CD4(+) and dendritic cell populations as well as with an inflammatory infiltrate located around liver metastatic nodules. Enlarged levels of inflammatory cytokines (IFN-γ and TNF) were also detected in IHIC. Furthermore, a tumor-specific production of IFN-γ and TNF as well as tumor-specific IFN-γ-producing CD8 T cells (CD8(+)IFN-γ(+)) were found in the celiac and portal lymph nodes of Salmonella-treated mice. This study provides first evidence for the involvement of LDLN in the development of an efficient cellular immune response against hepatic tumors, which resulted in the elimination of liver metastases after oral Salmonella-based vaccination.Fil: Vendrell, Alejandrina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Mongini, Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Gravisaco, Maria Jose Federica. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Canellada, Andrea Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Tesone, Agustina Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Goin, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Waldner, Claudia Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentin