Tratamento com vitamina B6 e B9 na prevenção de dano oxidativo e cognitivo em meningite pneumocócica experimental

Tese de Doutorado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde para obtenção do título de Doutora em Ciências da Saúde.A meningite pneumocócica é umas das mais complexas e graves infecções do sistema nervoso central (SNC) associada com distúrbios neurológicos e neuropsicológicos. Os compostos bacterianos são mediadores pró-inflamatórios que induzem a resposta imune e a degradação do triptofano através da via da quinurenina e podem contribuir para lesão do SNC associada com meningite bacteriana. A falta de uniformidade nos danos gera dificuldade para avaliar a severidade e o grau dos prejuízos neuronais, criando obstáculos para novas terapias no tratamento. A vitamina B6 atua como co-fator de enzimas que catalisam um grande número de reações envolvidas no metabolismo do triptofano, impedindo o acúmulo de intermediários neurotóxicos, podendo prevenir danos ao hospedeiro. A vitamina B9 desempenha um papel importante na neuroplasticidade e preservação da integridade neuronal e tem sido postulada como anti-depressiva, anti-maníaca e neuroprotetora. No presente estudo, foram avaliados os efeitos da vitamina B6 e B9 sobre a memória, parâmetros de estresse oxidativo, níveis do fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF) e integridade da barreira hematoencefálica (BHE) no hipocampo e córtex de ratos Wistar adultos submetidos à meningite pneumocócica. Os animais receberam injeção na cisterna magna de 10 μL de suspensão de Streptococcus pneumoniae ou líquido cefalorraquidiano (LCR) artificial para o grupo controle. Grupos experimentais vitamina B6: controle/salina; controle/B6; meningite/salina e meningite/B6 e receberam 360 μL de vitamina B6 (600 mg/kg) ou salina estéril por via subcutânea em 0 e 18 horas após a indução da meningite. Grupos experimentais vitamina B9: controle/salina; controle/B9 10 mg/Kg; controle/B9 50 mg/Kg; meningite/salina, meningite/B9 10 mg/Kg e meningite/B9 50 mg/Kg. A vitamina B9 foi dissolvida em água e administrada via oral por gavagem iniciando o tratamento 18 horas após a indução e seguindo por 7 dias, 1 vez ao dia. Os parâmetros de estresse oxidativo foram avaliados em 24 horas e 10 dias após a indução da meningite. A integridade da BHE foi avaliada em 12, 18 e 24 horas após a indução. Os parâmetros comportamentais foram avaliados em 10 dias após a indução da meningite pelos testes de habituação ao campo aberto, esquiva inibitória e reconhecimento de objetos. Após, os animais foram mortos por decapitação para avaliação dos níveis de BDNF. Em 24 horas após a indução da meningite houve um aumento dos níveis de TBARS, carbonilação de proteínas, nitrito/nitrato e atividade da MPO no hipocampo e córtex pré-frontal; a atividade da SOD foi diminuída no hipocampo e aumentada no córtex pré-frontal e não houve diferença na atividade da CAT no hipocampo, enquanto que no córtex pré-frontal foi diminuída no grupo meningite/salina. Dez dias após a indução, os parâmetros de estresse oxidativo se mantiveram aumentados. Houve quebra da BHE em todos os tempos avaliados e o tratamento com ambas as vitaminas preveniu essa disfunção. Nos animais submetidos à meningite o tratamento com vitamina B6 e B9 preveniu o comprometimento cognitivo e aumentou os níveis de BDNF no hipocampo. O tratamento com vitamina B6 e B9 foi capaz de prevenir estresse oxidativo, quebra da BHE, aumentar os níveis de BDNF e prevenir danos cognitivos em ratos Wistar submetidos à meningite por S. pneumoniae

Microbiological evaluation of bristles of frequently used toothbrushes Avaliação microbiológica das cerdas de escovas dentárias de uso frequente

INTRODUCTION: Brushing teeth is probably the practice of oral hygiene most common in the world; however, inadequate use can become a risk to the population health, once they may be contaminated with various microorganisms. OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate the bacterial contamination on toothbrush bristles using different methodologies. METHOD: We used 40 toothbrushes from healthy individuals aged 3 to 58 years. The samples were grown in test tubes containing trypticase soy broth sterile, and with the help of a tracking 0.1 μl samples were placed on plates containing sheep blood agar 5% and MacConkey agar then the samples were stored in a bacteriological incubator at 37°C for 24 hours for later analysis. It was counted the colony forming units and bacteria identification present in the brush. RESULTS: On the microbiological analysis, there was a growth of Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Streptococcus pyogenes and Staphylococcus coagulase negative. CONCLUSION: According to the results presented in this study, we observed a high incidence of bacterial contamination in the brushes analyzed. The most frequent microorganisms were members of the Enterobacteriaceae. The usage time of toothbrushes may be related to contamination found and, therefore, not only good hygiene ensures the reduction of microbial load, but replacing the toothbrush can also ensure individuals better oral health.INTRODUÇÃO: a escovação de dentes é, provavelmente, a prática de higiene bucal mais comumente realizada no mundo; entretanto, o acondicionamento inadequado pode se transformar em um risco para a saúde da população, uma vez que podem estar contaminadas com vários tipos de microrganismos. OBJETIVO: o objetivo desse estudo foi avaliar a contaminação bacteriana de cerdas de escovas dentais através de diferentes métodos. MÉTODOS: foram utilizadas 40 escovas de dentes provenientes de indivíduos sadios, com idade entre 3 a 58 anos. As amostras foram semeadas em tubo de ensaio contendo caldo tripticaseína de soja (TSB) estéril e, com o auxílio de uma alça de 0,1μl, as amostras foram semeadas em placas contendo ágar sangue de carneiro a 5% e ágar MacConkey. Em seguida foram armazenadas em estufa bacteriológica a 37°C por 24hs para posterior análise. Foi realizada a contagem das unidades formadora de colônias (UFC) e a identificação das bactérias presentes nas escovas. RESULTADOS: nas análises microbiológicas, houve crescimento de Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Streptococcus pyogenes e Staphylococcus coagulase negativas. Conclusões: de acordo com os resultados apresentados nesse trabalho, verificamos que houve alta incidência de contaminação bacteriana nas escovas analisadas. Os microrganismos com maior frequência foram membros da família Enterobacteriaceae. O tempo de uso das escovas dentárias pode estar relacionado à contaminação encontrada e, por isso, não só uma boa higienização garantirá a redução da carga microbiana, mas a troca da escova dentária também pode garantir melhor saúde bucal aos indivíduos

A função do anti-RAGE na barreira hematoencefálica e função cognitiva na investigação da meningite bacteriana como fator de risco para doença do Alzheimer

Artigo apresentado como requisito parcial para obtenção do grau de Bacharel, no Curso de Medicina, da Universidade do Extremo Sul Catarinense- UNESCA meningite bacteriana é uma infecção do sistema nervoso central associada a distúrbios neurológicos. Estudos sugerem uma via fisiopatológica em comum entre meningite bacteriana e neurodegeneração que, pela neuroinflamação, pode levar ao desenvolvimento da doença de Alzheimer pelo início da cascata de sinalização do RAGE, aumentando a deposição de β amilóide. Assim, a inibição de RAGE pode ser uma ferramenta terapêutica na prevenção da neurodegeneração causada por infecções. Esse estudo investigou a função do anti-RAGE na integridade da barreira hematoencefálica (BHE) e cognição em modelo animal de meningite pneumocócica. Ratos Wistar machos adultos receberam líquido cefalorraquidiano artificial ou suspensão de Streptococcus pneumoniae. Os animais foram divididos em grupo controle/salina, controle/anti-RAGE, meningite/salina e meningite/anti-RAGE. Para avaliação da integridade da BHE receberam tratamento com salina ou anti-RAGE (1.5 mg/kg) imediatamente após a inoculação, foram mortos em 12, 18 e 24 horas após a indução. Para os testes comportamentais, 18 horas após a indução receberam ceftriaxona a cada 12h/7 dias. O tratamento com anti-RAGE iniciou em 18 horas até o 5o dia após a indução, 1 vez ao dia. Dez dias após a inoculação bacteriana foram submetidos aos testes de habituação ao campo aberto e reconhecimento de objetos novos. Os animais tratados com anti-RAGE tiveram prevenção da quebra da BHE. Em ambos testes comportamentais houve prevenção de prejuizo de memória no grupo meningite/anti-RAGE comparado aos que receberam salina. Nossos resultados sugerem que o anti-RAGE pode atuar na prevenção de danos causados pela neuroinflamação, apoiando a meningite bacteriana como fator de risco para neurodegeneração

Maternal immune activation by LPS triggers fetal immune response and cognitive impairment in adult life

Artigo apresentado como requisito parcial para obtenção do grau de Bacharel, no Curso de Medicina, da Universidade do Extremo Sul Catarinense- UNESCThere is growing evidence that maternal infection during pregnancy results in acute and chronic changes in developmental context structure and function of the central nervous system (CNS) in the fetus. These changes increase the risk of premature birth, mental retardation and neuropsychiatric disorders such as autism, attention deficit disorder, major depressive disorder, bipolar disorder and schizophrenia. In this study we evaluated BBB integrity in the hippocampus and cortex at 6, 12 and 24 hours of the Wistar female pregnant after injection of LPS and the integrity of placental barrier in the structures placenta and fetus brain. Pregnant Wistar rat received an intraperitoneal injection of LPS (0.25 mg/Kg) or PBS on gestational day 15. At 6, 12, and 24h following MIA or PBS injections, pregnant dams were anesthetized. Brain fetus, placenta, and amniotic fluid were collected. Blood-brain barrier (BBB) and placental- barrier (PB) integrity were evaluated. On postnatal 55 offspring from MIA and PBS were subjected to the habituation to the open field and object recognition tasks. For the behavioural test, evaluated the influence of MIA on habituation memory, recognition memory and covered distance in the adulthood of prole of pregnant rats after the injection of LPS. Our study demonstrates that maternal LPS was able to break through the BBB of pregnant rats and offspring, generating cognitive deficits in offspring including locomotor disorders and reduced habituation capacity and recognition memory

Resumos concluídos - Ciências Biomédicas

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