Plasmídios em Bacillus thuringiensis: tamanho, mecanismo de replicação e papel na atividade entomopatogênica.

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Purificação de DNA plasmidial de Bacillus thuringiensis por ultracentrifugação em gradiente de cloreto de césio.

DNA plasmid. Bacillus thuringiensis e seus plasmídeos. Purificação de DNA plasmidial por ultracentrifugação em gradiente de cloreto de césio (CsCl). Estirpes utilizadas neste trabalho. Condições de crescimento e extração de DNA plasmidial. Preparo do DNA plasmidial e ultracentrifugação gradiente de CsCl. Identificação e coleta das bandas de interesse. Análise eletroforética. Bacillus thuringiensis é uma bacteria que sintetiza delta-endotoxinas letais para diferentes grupos de insetos, sendo a maior responsável pelo mercado ,mundial de bioinseticidas. As proteínas tóxicas são codificadas por genes denomonados cry, presentes em plasmídeos conjugativos com mais de 30 Mda, e que geralmente, são difíceis de serem purificados pelos métodos rotineiros de extração e purificação. O objetivo deste trabalho foi ajustar um metodologia para obtenção dos plasmídeos presentes nas estirpes de B. thuringiensis, a partir da técnica de ultracentrifugação em gradiente de cloreto de césio. Neste caso, foram usados como modelo as estirpes HD-1 e S76 da subespécies kurstaki. O método de lise alcalina e purificação em gradiente de cloreto de césio empregado, permitiu a obtenção de grandes quantidades de DNA plasmidial com alto grau de pureza. Foram realizadas adaptações no protocolo original que tornaram o protocolo utilizado para as estirpes HD-1 e S76 uma técnica menos laboriosa e mais rápida. Ainda houve redução significativa na quantidade de brometo de etídeo empregada e na quantidade de resíduos químicos sólidos contaminados com essa substância, extremamente tóxica, que foram usados no processo. O procedimento de purificação descrito fio um método adaptado para purificação dos pequenos e grandes plasmídeos de B. thuringiensis e foi usado com sucesso para as estirpes HD-2 e S76. Bacillus thuringiensis is a Gram positive bacterium that synthesizes delta-endotoxinas lethal to different groups of insects therefore has been the largest responsible for the worlf market of bioinseticidas. The toxic proteins are coded by genes denominated cry, persents in conjugatives plasmids with more than 30 Mda and that generally are difficult to be purified by the routine methods of extraction and purification. The objective of this work was to adjust the ultracentrifugation methodology in gradient of cesium chloride to obtain purified plasmids in HD-1 and S76 strains of B. thuringiensis subsp. Kurstaki. The procedure allwed to obtain great amounts of plasmids DNA from HD-1 and S76 strains with high degree of purity. In addition, it was less laborious and much faster. Besides, there was significant reduction in the amounts of ethidium bromide and of solid chemical residues contaminated with the toxic substance. The described protocol is a modification of a purification method for small and big plasmids of B. huringiensis strains and could be applied with sucess for strains the HD-1 and S76.bitstream/CNPAB-2010/32963/1/bot008.pdfPlasmid DNA purification of Bacillus thuringiensis by ultracentrifugation in cesium chloride gradient

Trajetória Institucional E Políticas De Ct&i: O Caso Do Cnaval/ipt Nos Anos 2000

This article discusses the relationship between the institutional trajectory of the Institute for Technological Research (IPT) and the changes in ST&I policies, trying to identify the inflection points which impacted their organizational routines. The objective is to understand the strategies that the Institute, their leaders and researchers assume face to the changing context in which they live. The concepts of trajectory, evolution, organizational learning, routines and techno-economics network are guiding this article. After a brief history of the most important transformations experienced by the institution, between 1970 and 1998, this work focuses in this recent decade and in a experience analysis of Center for Naval and Ocean Engineering (CNAVAL/IPT). The methodological approach is exploratory, combining interviews with key actor, documentary research and literature about transformations of the Public Research Institutes (IPPs) from Brazil.2716377Callon, M., The Dynamics of Techno-Economic Networks Technological Change And Company Strategy: Economic and Social Perspectives, pp. 72-102. , in Coombs, R.Saviotti, P.Walsh, V. (eds.). London, San Diego: Harcourt Brace Jovanovitch, (s/d)Calmon, K.M., A avaliação de programas e a dinâmica da aprendizagem organizacional (1999) Revista Planejamento e Políticas Públicas, (19). , Jun(1993) Documentos CNAVAL, , CENTRO DE ENGENHARIA NAVAL E OCEÂNICA. Instituto de Pesquisas TecnológicasCoriat, B., Dosi, G., Learning How to govern and learning how to solve problems: On the co-evolution of competences, conflicts and organizational routines (1998) The Dynamic Firm: The Role of Technology, Strategy, Organization, and Regims, pp. 103-133. , in Chandler, A.Hagström, P.Sölvell, Ö. (eds) Oxford University PressDosi, G., Marengo, L., Some elements of an evolutionary theory of organizational competences (1994) Evolutionary concepts in contemporary economics, , in England, R. The University of MichiganDosi, G., Nelson, R., Winter, S., Introduction: The Nature and dynamics of organizational capabilities (2000) The Nature and Dynamics of Organizational Capabilities, , in Giovanni Dosi, Richard Nelson, Sidney Winter (eds.). Oxford University Press, New YorkFuck, M.P., (2009) A co-evolução tecnológica e institucional na organização da pesquisa agrícola no Brasil e na Argentina, , Tese (doutorado), Instituto de Geociências (IG), Universidade Estadual de Campinas-Campinas, SPJesus, C., Gitahy, L.M., Transformações na Indústria de Construção Naval Brasileira e seus Impactos no Mercado de Trabalho (1997-2007) (2011) 1 o Congresso de Desenvolvimento Regional de Cabo Verde, , http://www.apdr.pt/congresso/2009/actas/39.html, 6 a 11 de Julho de 2009, Cabo Verde. Anais eletrônicos. Disponível em:. Acesso em: 24 de julho deGarcia, A.E., Salles-Filho, S., Trajetória institucional de um instituto público de pesquisa (2009) Revista de Administração Pública, 43 (3). , Rio de Janeiro, Maio/JunGusmão, R., (1991) Modelo Institucional, estrutura de financiamento e demanda tecnológica: A experiência do IPT nos anos 80, pp. 304f. , Dissertação (Mestrado em Política Científica e Tecnológica), Departamento de Política Científica e Tecnológica, Instituto de Geociências, Universidade Estadual de Campinas, Campinas(1999) IPT, 100 anos de tecnologia, , INSTITUTO DE PESQUISAS TECNOLÓGICAS. Ed. Publicação Instituto de Pesquisas Tecnológicas, São PauloDiretoria de Política Industrial e Tecnológica (2007) Agenda de Competitividade para a Economia Paulista, , INSTITUTO DE PESQUISAS TECNOLÓGICAS. São PauloMello, D.L., Análise de processos de reorganização de institutos públicos de pesquisa do estado de São Paulo (2000) Tese (Doutorado em Política Científica e Tecnológica), pp. 305f. , Departamento de Política Científica e Tecnológica, Instituto de Geociências, Universidade Estadual de Campinas, CampinasPadovezi, C., Atividades do Centro de Excelência em Engenharia Naval e Oceânica-CEENO (2007) Apresentação FENASHORE, , Niterói, 26 de Setembro deSalles-Filho, S., A dinâmica tecnológica da agricultura: Perspectivas da biotecnologia (1993) Tese (Doutorado), , Instituto de Economia (IE), Universidade Estadual de Campinas (Unicamp), CampinasSalles Filho, S., Et Al., (2000) Ciência, Tecnologia e Inovação: A reorganização da pesquisa pública no Brasil, , Campinas, Editora KomediSalles Filho, S., Metodologia para o estudo da reorganização institucional da pesquisa pública (2000) Revista Parcerias Estratégicas, 9. , Outubr