Associação de fitoplasma ao superbrotamento de begônia

Begonia is a very appreciated genus of ornamental plants, of economic relevancy, having species of flowers and foliage. In commercial croppings, plants exhibiting characteristic symptoms of phytoplasma infection have been observed, such as shoot proliferation, reduced plant, size small leaves and flowers, and phyllody. Leaves were sampled and total DNA was extracted to be used in nested Polymerase Chain Reaction (PCR), in order to detect and identify an expected phytoplasma. The results confirmed consistently the presence of a phytoplasma associated with symptomatic plants through the amplification of a typical genomic fragment of 1.2 kb by using the universal primers R16mF2/mR1 and R16F2n/R2. The use of specific primers R16(III)F2/R1 allowed to identify the phytoplasma detected as a representative of the group 16SrIII. This information is very expressive, because different diseases caused by fungus, bacteria, virus and nematodes have been reported for begonia, however, reports have not been found for begonia diseases associated with phytoplasmas.Begônia é um gênero muito apreciado de plantas ornamentais, de relevância econômica, compreendendo espécies de flores e de folhagem. Em cultivo comercial foram observadas plantas apresentando sintomas característicos de infecção por fitoplasma, entre eles superbrotamento de ramos, redução no porte da planta, folhas e flores pequenas e filodia. A partir de amostras foliares foi feita extração de DNA para ser usado em duplo Polymerase Chain Reaction (PCR), visando 'a detecção de fitoplasma em tecido doente e a sua identificação ao nível de grupo de classificação. Os testes revelaram consistemente a associação de fitoplasma com os sintomas da doença, através da amplificação de um fragmento genômico típico de 1,2kb para os iniciadores universais R16mF2/mR1 e R16F2n/R2, usados na reação de PCR. O emprego de iniciadores específicos R16(III)F2/R1 permitiu identificar o fitoplasma detectado como um representante do grupo 16SrIII. Este é um resultado expressivo, pois diversas doenças causadas por fungos, bactérias, vírus e nematóides têm sido relatadas para begônia, no entanto, não têm sido encontrados relatos para doenças de begônia associadas a fitoplasmas

Produção de variedades de Cucurbita pepo premunizadas com estirpes fracas do Papaya ringspot virus - type W e do Zucchini yellow mosaic virus

Papaya ringspot virus - type W (PRSV-W) and Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV) are the most prevalent viruses in cucurbit crops in Brazil and responsible for frequent yield losses. Diseases caused by these viruses are difficult to control. The objective of this work was to evaluate the effects of mild strains PRSV-W-1 and ZYMV-M on the yield of Cucurbita pepo L. cvs. Samira, Novita Plus, AF 2847, and Yasmin, under plastic greenhouse and field conditions. Plants infected with ZYMV-M and grown in a plastic greenhouse did not exhibit typical leaf symptoms or significant alterations in quantitative and qualitative fruit yield. However, when infected with PRSV-W-1, or PRSV-W-1 + ZYMV-M, the plants exhibited severe leaf mosaic symptoms and reduced fruit quality, although there were no changes in the number and mean fruit weight harvested from these plants. When these plants were infected with PRSV-W-1 and studied simultaneously in the field and plastic greenhouse, intensification of symptoms in the fruits and leaves was more pronounced under the greenhouse conditions. Quantitative yield did not change. Environmental factors seem to influence symptoms induced by PRSV-W-1.O Papaya ringspot virus - type W (PRSV-W) e o Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV) são os vírus predominantes em culturas de cucurbitáceas no Brasil, onde geralmente causam danos significativos na produção. As doenças causadas por ambos os vírus são de difícil controle. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito das estirpes fracas PRSV-W-1 e ZYMV-M na produção de abobrinha de moita (Cucurbita pepo L. cvs. Samira, Novita Plus, AF 2847, and Yasmin) em condições de estufa plástica e de campo. Plantas infectadas com a estirpe ZYMV-M sob condições de estufa plástica não exibiram sintomas foliares típicos da doença e alterações na quantidade e qualidade dos frutos produzidos. No entanto, quando infectadas com a estirpe PRSV-W-1, ou PRSV-W-1 + ZYMV-M, as plantas mostraram sintomas severos de mosaico foliar e redução na qualidade dos frutos. Não houve alteração no número e no peso médio dos frutos colhidos dessas plantas. Quando as plantas dessas variedades foram infectadas com a estirpe PRSV-W-1 e avaliadas simultaneamente em campo e em estufa plástica, constatou-se que a intensificação de sintomas foi mais pronunciada sob condições de estufa plástica. A produção quantitativa não foi alterada. Fatores ambientais parecem ter influenciado a intensificação dos sintomas induzidos pela estirpe PRSV-W-1.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP

Produção de variedades de Cucurbita pepo premunizadas com estirpes fracas do Papaya ringspot virus - type W e do Zucchini yellow mosaic virus

O Papaya ringspot virus - type W (PRSV-W) e o Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV) são os vírus predominantes em culturas de cucurbitáceas no Brasil, onde geralmente causam danos significativos na produção. As doenças causadas por ambos os vírus são de difícil controle. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito das estirpes fracas PRSV-W-1 e ZYMV-M na produção de abobrinha de moita (Cucurbita pepo L. cvs. Samira, Novita Plus, AF 2847, and Yasmin) em condições de estufa plástica e de campo. Plantas infectadas com a estirpe ZYMV-M sob condições de estufa plástica não exibiram sintomas foliares típicos da doença e alterações na quantidade e qualidade dos frutos produzidos. No entanto, quando infectadas com a estirpe PRSV-W-1, ou PRSV-W-1 + ZYMV-M, as plantas mostraram sintomas severos de mosaico foliar e redução na qualidade dos frutos. Não houve alteração no número e no peso médio dos frutos colhidos dessas plantas. Quando as plantas dessas variedades foram infectadas com a estirpe PRSV-W-1 e avaliadas simultaneamente em campo e em estufa plástica, constatou-se que a intensificação de sintomas foi mais pronunciada sob condições de estufa plástica. A produção quantitativa não foi alterada. Fatores ambientais parecem ter influenciado a intensificação dos sintomas induzidos pela estirpe PRSV-W-1.Papaya ringspot virus - type W (PRSV-W) and Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV) are the most prevalent viruses in cucurbit crops in Brazil and responsible for frequent yield losses. Diseases caused by these viruses are difficult to control. The objective of this work was to evaluate the effects of mild strains PRSV-W-1 and ZYMV-M on the yield of Cucurbita pepo L. cvs. Samira, Novita Plus, AF 2847, and Yasmin, under plastic greenhouse and field conditions. Plants infected with ZYMV-M and grown in a plastic greenhouse did not exhibit typical leaf symptoms or significant alterations in quantitative and qualitative fruit yield. However, when infected with PRSV-W-1, or PRSV-W-1 + ZYMV-M, the plants exhibited severe leaf mosaic symptoms and reduced fruit quality, although there were no changes in the number and mean fruit weight harvested from these plants. When these plants were infected with PRSV-W-1 and studied simultaneously in the field and plastic greenhouse, intensification of symptoms in the fruits and leaves was more pronounced under the greenhouse conditions. Quantitative yield did not change. Environmental factors seem to influence symptoms induced by PRSV-W-1

Quebra da resistência em pimentão contra o Pepper yellow mosaic virus

Plants of Capsicum annuum cv. Magali R, resistant to Pepper yellow mosaic virus (PepYMV), which showed severe yellow mosaic, leaf malformation and stunting were observed during the 2003/04 growing season in Lins, São Paulo State, Brazil. Potyvirus-like particles observed in leaf sap from infected plants under the electron microscope reacted with an antiserum against PepYMV in PTA-ELISA. In addition to C. annuum cv. Magali R, this potyvirus also infected systemically the resistant C. annuum cv. Rubia R. The nucleotide sequence of part of the CP gene of this potyvirus shared 96-98% identity with that of other PepYMV isolates. The partial nucleotide sequence of the 3' NTR showed 94-96% identity with that of PepYMV. These data indicate that this potyvirus is a resistance-breaking isolate of PepYMV.Plantas de Capsicum annuum cv. Magali R, resistentes ao Pepper yellow mosaic virus (PepYMV), exibindo sintomas severos de mosaico amarelo, malformação foliar e subdesenvolvimento foram encontradas em plantios na região de Lins, SP, Brasil, em 2003/04. Partículas semelhantes àquelas do gênero Potyvirus foram observadas em extrato foliar de planta infectada examinado em microscópio eletrônico de transmissão. O extrato foliar também reagiu com anti-soro contra o PepYMV em PTA-ELISA. Além de C. annuum cv. Magali R, esse potyvirus também infectou sistemicamente C. annuum cv. Rubia R, que é resistente ao PepYMV. A seqüência de nucleotídeos de parte do gene da proteína capsidial (CP) desse potyvirus apresentou 96-98% de identidade com a de outros isolados do PepYMV. A seqüência parcial de nucleotídeos da região 3' não traduzida (3' NTR) apresentou 94-96% de identidade com a do PepYMV. Esses resultados são indicativos de que o potyvirus que quebrou a resistência em pimentão é um isolado do PepYMV

Biological, serological and molecular characterization of an isolate of passion fruit woodiness virus (pwv) that infect some cucurbit plants systemically.

Este trabalho apresenta resultados da caracterização biológica, serológica e molecular de um potyvirus que causa mosqueado foliar em maracujazeiro e infecta, experimentalmente, plantas de abobrinha-de-moita (Cucurbita pepo cv. Caserta). Esse potyvirus foi inicialmente observado em extratos de folhas de maracujazeiro e em cortes ultra finos de tecidos infectados de abobrinha-de-moita, em microscopia eletrônica. Além de partículas alongadas, observaram-se inclusões lamelares do tipo catavento, características de espécies de vírus do gênero Potyvirus. Após purificação a partir de folhas de maracujazeiro com mosqueado, as partículas desse potyvirus foram dissociadas para a caracterização dos seus principais componentes. O RNA viral apresentou peso molecular de aproximadamente 10000 pb. O peso molecular da proteína da capa protéica foi de aproximadamente 32 kDa. Antissoro policlonal produzido em coelho reagiu com o antígeno homólogo, bem como com o Passion fruit woodiness virus (PWV), em teste de PTA-ELISA, mas não reagiu com dois potyvirus que infectam cucurbitáceas, Papaya ringspot virus - type W e Zucchini yellow mosaic virus. O antissoro contra o PWV reagiu com o potyvirus do mosqueado do maracujazeiro. Quando três isolados do potyvirus do mosqueado do maracujazeiro (M1, M2 e M3) foram inoculados em 37 espécies vegetais, juntamente com dois isolados do PWV (PWV-1 e PWV-2), constatou-se que todas as espécies infectadas pelos isolados do PWV também o foram com os isolados do potyvirus do mosqueado. Estes últimos, entretanto, também foram capazes de infectar sistemicamente plantas de abobrinha-de-moita cv. Caserta e de abóbora híbrida do tipo Tetsukabuto, o que não ocorreu com os isolados do PWV. Testes de transmissão do isolado M1 do potyvirus do mosqueado, por meio mecânico e com os afídeos Myzus persicae e Aphis gossypii, de plantas de maracujazeiro, abobrinha-de-moita, feijoeiro BT 2 e crotalária, para plantas das mesmas espécies foram positivos. No entanto, observou-se que a eficiência de transmissão foi influenciada pela planta fonte de inóculo. Quando a abobrinha-de-moita foi utilizada como fonte de inóculo, a transmissão só ocorreu para plantas-teste dessa espécie, independente do processo de inoculação. Testes de proteção entre os isolados do potyvirus do mosqueado e do PWV, em plantas de Crotalaria juncea, juntamente com a análise da seqüência de nucleotídeos do gene da capa protéica e da região terminal 3' não traduzida dos isolados M2 e M3, indicaram que o potyvirus do mosqueado é uma estirpe do PWV que ocorre em São Paulo. Análises moleculares comparativas com outras espécies de Potyvirus indicaram que tanto os isolados do potyvirus do mosqueado como os isolados do PWV têm alta identidade com o Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV). Esse resultado corrobora relato anterior feito no país e aponta para a necessidade de uma alteração na nomenclatura da espécie do vírus que está freqüentemente associada ao endurecimento dos frutos do maracujazeiro no Brasil.This work presents results of the biological, serological and molecular characterization of a potyvirus that causes leaf mottling on passion fruit and infects some cucurbit plants experimentally. This potyvirus was initially observed in extracts of passion fruit leaves and in ultra thin sections of infected tissue of Cucurbita pepo L. cv. Caserta, examined in the electronic microscope. Besides flexuous filamentous particles, lamellar inclusions, characteristic of species of potyvirus, were observed in infected tissue. After purification from infected passion fruit leaves, virus particles were dissociated for the molecular characterization of their main components. The viral RNA showed a molecular weight of approximately 10000 bp. The molecular weight of the coat protein was nearly 32 kDa. Policlonal antibody, produced in rabbit, reacted with the homologous antigen, as well as with Passion fruit woodiness virus (PWV), in PTA-ELISA. No reaction was observed with Papaya ringspot virus - type W and Zucchini yellow mosaic virus, two potyviruses usually found infecting plants in the Cucurbitaceae family. The antibody against PWV reacted with the passion fruit mottling potyvirus. When three isolates of the passion fruit leaf mottling potyvirus (M1, M2 and M3) and two isolates of PWV were separately inoculated in 37 vegetable species, it was verified that all the species infected with the PWV isolates were also infected with the isolates of the passion fruit leaf mottling potyvirus. Isolates M1, M2 and M3, however, were also capable to infect systemically plants of zucchini squash cv. Caserta and hybrid squash Tetsukabuto, which were not infected with the PWV isolates. Transmission tests showed that the M1 isolate of passion fruit leaf mottling potyvirus was efficiently transmitted from infected plants of passion fruit, zucchini squash, Phaseolus vulgaris cv. BT 2 and Crotalaria juncea to plants of the same species by means of mechanical inoculation. Efficient transmission was also obtained when the aphids Myzus persicae and Aphis gossypii were used as vectors. However, the transmission efficiency was influenced by the plant source of inoculum. When zucchini squash was used as a source of inoculum, the transmission only occurred for plants of the same specie, independent of the method of inoculation. Cross protection tests with isolates of the passion fruit leaf mottling potyvirus and PWV, in plants of C. juncea, together with the analysis of the nucleotide sequences of the coat protein (CP) gene and the 3' non translated region (NTR) of the isolates M2 and M3, indicated that the leaf mottling potyvirus has high identity with the PWV present in São Paulo State. As compared with other species of the genus Potyvirus, isolates of both potyviruses showed high identity with the CP gene and 3' NTR of Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV). This result corroborates previous report regarding to the identity between Brazilian PWV isolates and CABMV and it points for the need of an alteration in the nomenclature of the virus species frequently associated to passion fruit woodiness in Brazil

Passionflower viruses: incidence in the Northwest region of São Paulo State; damage caused by the <i>Passion fruit woodines virus</i> (PWV) and sintomatology caused by <i>Cucumber mosaic virus</i> (CMV)

Esse trabalho apresenta resultados referentes a incidência de viroses na região da Alta Paulista, SP, e danos causados pelo ?<i>Passion fruit woodiness vírus</i>? (PWV) em maracujazeiros, avaliando-se plantas em casa-de-vegetação e em telado em Lucianopolis (SP). Em adição, foram realizados estudos sobre a distribuição do ?<i>Cucumber mosaic vírus</i>? (CMV) em áreas sintomáticas e assintomáticas de ramos de plantas infectadas em campo. Foram visitadas 45 pomares, constituídos por aproximadamente 75.000 plantas, abrangendo 9 municípios. Foram avaliadas visualmente 991 plantas, coletando-se 310 amostras para análise laboratorial. Com base nas avaliações visuais, observaram-se plantas exibindo sintomas semelhantes aos descritos para o Rhabdovirus causador do clareamento de nervuras, o CMV e o PWV. As amostras coletadas, com sintomas característicos daqueles induzidos pelo CMV e PWV, reagiram com os respectivos antissoros contra esses vírus em PTA-ELISA, sendo suas incidências estimadas em 40,7% e 71,8%, respectivamente. No caso do clareamento de nervuras, foram analisados cortes ultra finos de tecidos de apenas 10 amostras, entre as 57 sintomáticas observadas em campo. Em todas elas foram encontradas partículas do tipo Rhabdovirus. Com base nestes dados estimou-se que a incidência desta virose foi da ordem de 5,8%. O CMV, segundo vírus em incidência nos plantios da região, apesar de ser um vírus cosmopolita, infectar mais de 80 espécies vegetais, ser transmitido por diversas espécies de afídeos de forma não persistente e já ter sido relatado em maracujazeiro em diversas partes do mundo, parece possuir importância reduzida pois tem distribuição aparentemente limitada nos ramos. Testes biológicos e serológicos de PTA-ELISA e ?Westem-blot? demonstraram que esse vírus encontra-se aparentemente restrito apenas a trechos sintomáticos dos ramos de plantas de maracujazeiro. Estudos adicionais para melhor compreensão desse fenômeno estão em andamento. As avaliações de danos causados por 4 isolados do PWV de diferentes origens (Minas Gerais, Pernambuco, Ceará e São Paulo) em plantas em casa-de-vegetação apontaram reduções de até 50% em área foliar, pesos fresco e seco da parte aérea e do sistema radicular. Em telado, compararam-se o desenvolvimento e a produção de plantas inoculadas mecanicamente aos 2, 4 e 6 meses e infectadas naturalmente entre 7 e 8 meses após o transplante. Estas últimas representavam os controles sadios que foram casualmente infectadas devido a possível entrada de afídeos dentro do telado. Avaliações de desenvolvimento das plantas dos diferentes tratamentos indicaram que o índice de área foliar (IAF) estabilizou, próximo aos 12 meses após o transplante, ao redor de 4,4, 3,8, 5,6 e 10,0 respectivamente. Os resultados de produção, avaliada com base no peso e número de frutos por planta, realizada durante 5 meses, indicaram que as plantas infectadas aos 2, 4, 6 e entre 7 - 8 meses produziram, em média, 16, 20, 44 e 77 frutos e 2,4, 3,4, 6,9 e 12,9 kg, respectivamente. Quanto mais tarde ocorreu a infecção, maior a quantidade de frutos para a mesa e menor a daqueles endurecidos ou destinados à indústria. Esses resultados são sugestivos de que a retirada sistemática de plantas doentes nos 6 a 8 primeiros meses após o transplante, pode ser uma alternativa para minimizar os danos causados pelo PWV nos maracujazais, enquanto medidas duradouras de controle não são desenvolvidas.A survey was carried out for evaluating the relative incidence of <i>Passion fruit woodiness virus</i> (PVW), Cucumber mosaic virus (CMV) and a Rhabdovirus like-particles causing vein clearing symptoms in passionflower plantings in the Northwest region of the State of São Paulo, Brazil. Forty-five orchards, totaling approximately 75,000 plants, were visited and 991 randomly chosen plants were visually inspected for characteristic symptoms induced by these viruses. Samples from 310 plants were collected and analyzed by PTA-ELISA using antisera against <i>Passion fruit woodiness virus</i>(PWV) and <i>Cucumber mosaic virus</i> (CMV). Ten samples with vein clearing symptoms were examined on thin section in the electron microscope, to confirm the association with Rhabdovirus like particles. PWV and CMV were the most frequently found viruses, with incidences of 71,8% and 40,7%, respectively. lncidence of vein clearing apparently associated with a possible Rhabdovirus was 5,8%. Although CMV was the second virus in incidence, its importance is apparently small, because the virus has limited distribution in the passionflower stems. Biological and serological (PTA-ELISA and Westem-blot) assays showed that CMV was apparently restricted to symptomatic parts of the stems from infected plants in the field. Further studies for better understanding of this phenomenon are underway. Studies were also done to evaluate the effect of PWV infection on plant development in the greenhouse and yield losses under screenhouse in the field. In the greenhouse, plants mechanically inoculated with four isolates of PWV showed 50% reduction in leaf area and fresh and dry weight of upper part and root system, independently of the virus isolate. Passionflower plants grown under screenhouse were mechanically inoculated with PWV at 2, 4 and 6 months after transplanting. Healthy control plants were naturally infected by PWV 7 to 8 months after transplanting, due to accidental entrance of aphids into the greenhouse. Leaf area indexes (LAI) for plants inoculated at different age were stabilized at 4,4, 3,8, 5,6 and 10,0, respectively, 12 months after transplanting. Fruits harvested during 5 months indicated that plants infected at 2, 4, 6 and between 7 and 8 months after transplanting showed average yields of 2,4, 3,4, 6,9 and 12,9 kg, respectively. The number of woody fruits was drastically reduced on later infected plants. These results are indicative that systematic elimination of diseased plants during the first 6 to 8 months after transplanting can be an option to minimize the damage caused by PWV in passionflower orchards, while more permanent control measures are not developed

Assessment of a Euro VI Step E Heavy-Duty Vehicle’s Aftertreatment System

The latest generation of heavy-duty vehicles (Euro VI step E) have to respect low emission limits both in the laboratory and on the road. The most challenging pollutants for diesel vehicles are NOx and particles; nevertheless, NH3 and N2O need attention. In this study, we measured regulated and unregulated pollutants of a Euro VI step E Diesel vehicle. Samples were taken downstream of (i) the engine, (ii) the Diesel oxidation catalyst (DOC) and catalyzed Diesel particulate filter (cDPF), and (iii) the selective catalytic reduction (SCR) unit for NOx with an ammonia slip catalyst (ASC). In addition to typical laboratory and real-world cycles, various challenging tests were conducted (urban driving with low payload, high-speed full-load driving, and idling) at 23 °C and 5 °C. The results showed high efficiencies of the DOC, DPF, and SCR under most testing conditions. Cold start cycles resulted in high NOx emissions, while high-temperature cycles resulted in high particle emissions. The main message of this study is that further improvements are necessary, also considering possible reductions in the emission limits in future EU regulations