Blood cell mitochondrial DNA content and premature ovarian aging

Primary ovarian insufficiency (POI) is a critical fertility defect characterized by an anticipated and silent impairment of the follicular reserve, but its pathogenesis is largely unexplained. The frequent maternal inheritance of POI together with a remarkable dependence of ovarian folliculogenesis upon mitochondrial biogenesis and bioenergetics suggested the possible involvement of a generalized mitochondrial defect. Here, we verified the existence of a significant correlation between blood and ovarian mitochondrial DNA (mtDNA) content in a group of women undergoing ovarian hyperstimulation (OH), and then aimed to verify whether mtDNA content was significantly altered in the blood cells of POI women. We recruited 101 women with an impaired ovarian reserve: 59 women with premature ovarian failure (POF) and 42 poor responders (PR) to OH. A Taqman copy number assay revealed a significant mtDNA depletion (P<0.001) in both POF and PR women in comparison with 43 women of similar age and intact ovarian reserve, or 53 very old women with a previous physiological menopause. No pathogenic variations in the mitochondrial DNA polymerase \u3b3 (POLG) gene were detected in 57 POF or PR women with low blood mtDNA content. In conclusion, blood cell mtDNA depletion is a frequent finding among women with premature ovarian aging, suggesting that a still undetermined but generalized mitochondrial defect may frequently predispose to POI which could then be considered a form of anticipated aging in which the ovarian defect may represent the first manifestation. The determination of mtDNA content in blood may become an useful tool for the POI risk prediction

Evidence for a Common Genetic Origin of Classic and Milder Adult-Onset Forms of Isolated Hypogonadotropic Hypogonadism

Multiple metabolic and inflammatory mechanisms are considered the determinants of acquired functional isolated hypogonadotropic hypogonadism (IHH) in males, whereas classic IHH is a rare congenital condition with a strong genetic background. Since we recently uncovered a frequent familiarity for classic IHH among patients with mild adult-onset hypogonadism (AO-IHH), here we performed a genetic characterization by next generation sequencing of 160 males with classic or "functional" forms. The prevalence of rare variants in 28 candidate genes was significantly higher than in controls in all IHH patients, independently of the age of IHH onset, degree of hypogonadism or presence of obesity. In fact, it did not differ among patients with classic or milder forms of IHH, however particular genes appear to be more specifically associated with one or the other category of IHH. ROC curves showed that Total Testosterone <6.05 nmol/L and an age of onset <41 years are sensitive cutoffs to identify patients with significantly higher chances of harboring rare IHH gene variants. In conclusion, rare IHH genes variants can frequently predispose to AO-IHH with acquired mild hormonal deficiencies. The identification of a genetic predisposition can improve the familial and individual management of AO-IHH and explain the heritability of congenital IHH

Blood Cell Mitochondrial DNA Content and Premature Ovarian Aging.

Primary ovarian insufficiency (POI) is a critical fertility defect characterized by an anticipated and silent impairment of the follicular reserve, but its pathogenesis is largely unexplained. The frequent maternal inheritance of POI together with a remarkable dependence of ovarian folliculogenesis upon mitochondrial biogenesis and bioenergetics suggested the possible involvement of a generalized mitochondrial defect. Here, we verified the existence of a significant correlation between blood and ovarian mitochondrial DNA (mtDNA) content in a group of women undergoing ovarian hyperstimulation (OH), and then aimed to verify whether mtDNA content was significantly altered in the blood cells of POI women. We recruited 101 women with an impaired ovarian reserve: 59 women with premature ovarian failure (POF) and 42 poor responders (PR) to OH. A Taqman copy number assay revealed a significant mtDNA depletion (P<0.001) in both POF and PR women in comparison with 43 women of similar age and intact ovarian reserve, or 53 very old women with a previous physiological menopause. No pathogenic variations in the mitochondrial DNA polymerase γ (POLG) gene were detected in 57 POF or PR women with low blood mtDNA content. In conclusion, blood cell mtDNA depletion is a frequent finding among women with premature ovarian aging, suggesting that a still undetermined but generalized mitochondrial defect may frequently predispose to POI which could then be considered a form of anticipated aging in which the ovarian defect may represent the first manifestation. The determination of mtDNA content in blood may become an useful tool for the POI risk prediction

Identification and characterization of neurofibromatosis type 1 (NF1) gene mutations

La neurofibromatose 1 (NF 1) affecte un individu sur 3000 et se caractérise par l'extrême variabilité des symptôme cliniques. Le gène de NF/, situé sur le chromosome l 7q 11.2, contient 350 kb et 60 exons. Le taux de mutation est de 1 x 104/gamète/génération. Environ 50% des mutations sont d'origine familiale et 50% sporadique. Nous avons identifié et caractérisé une mutation qui cause l'exclusion des exons 11 et l 2a, six délétions et un polymorphisme HinclI et aussi déterminé le déséquilibre de liaison dans la population québécoise. Une mutation originale a été identifiée grâce au test de tronquation des protéines; elle serait la cause de l'exclusion d'exons. Le séquençage de la région génomique entre les introns 1 Oc et 12a a permis d'identifier le changement d'un G en A en position 2056+ l dans le site d' épissage 5' de l 'exon 12a. Ceci engendre l'excision des deux exons l l et 12a sans changement du cadre de lecture et sans que la quantité des ARN messagers en soit affectée. Des essais d'épissage in vivo et in vitro nous ont permis de démontrer pour la première fois que le mutation naturelle supprime la définition des exons. Nos résultats montrent aussi que la séquence encodée par les exons 11 et l 2a est essentielle pour l'activité de la neurofibromine. L 'haplotypage de 19 familles a permis de détecter la perte d'hétérozygosité (LOH) grâce aux 4 microsatellites et aux RFLPs RsaI et EcoRI. Six délétions (2 familles:76 l 0 et 74 73, et 4 patients: 178, 184, 236 et 23 7) ont été identifiées et caractérisées par la LOH et des buvardages de type Southern. La délétion dans la famille 7610 est d'origine maternelle et seul restent les exons l-4b. La délétion dans la famille 7473 est aussi d'origine maternelle et les exons de là 5 sont délétés, la délétion s'arrêtant quelque part avant l' intron 26. Avec le patient 1 78 la délétion commence entre les exons 23-2 et 27b pour se terminer après la région 3' de NFJ. La délétion dans le patient 184 commence au 5' du gène et se termine entre les exons 27b-29. La délétion dans le patient 236 commence entre les exons 14-18 et se termine après l'extrémité 3' de NFJ. Avec le patient 237, la délétion commence entre les exons 38-45 et se termine après la région 3' du gène. Ces délétions sont distribuées au hasard dans le gène NF 1.Abstract: Neurofibromatosis type 1 (NF1) afflicts 1 in 3,000 individuals and is characterized with variable clinical presentations. The NF1 gene spans 350 kb on chromosome 17q11.2 with 60 exons. The gene exhibits high mutation rate of 1 × 104/gamete/generation and approximately 50% are sporadic new mutations. In this study, a splice site mutation and 6 gross deletions have been identified and characterized. Also, a HincII polymorphism was detected and the linkage disequilibrium was investigated. Using a protein truncation assay, we have identified a exon skipping mutation. The mutation, which consists of a G to A transition at position +1 (2056+1) of the 5' splice site of exon 12a, is associated with the loss of both exons 11 and 12a in the NF1 mRNA. The mutation inactivates the 5' splice site of exon 12a, prevents exon definition and leads to the skipping of both exons 11 and 12a. These results document the first example of a natural mutation that inactivates exon definition, and suggest that the 11-12a region of NF1 plays an important role in the activity of neurofibromin. Six gross deletions (families 7610 and 7473, patients 178, 184, 236 and 236) have been identified. The breakpoint of the deletion is located between exons 5 and 26. The deletions are unique and different from those reported previously. The deletions are not associated with unusual clinical features. The HincII polymorphism is located between exons 1 and 4a as defined by probe GE2-400 bp. Three alleles are detected: A1 (3.1 and 3.3 kb), A2 (2.4 and 4.0 kb), A3 (1.3 and 5.1 kb). The detected heterozygote forms are A1-A2, or A1-A3 and the homozygote forms A1-A1 or A2-A2. Analysis haplotypes of the 19 NF1 families indicates that the four intragenic polymorphic microsatellites are strongly linked with the NF1 disease. However, no linkage disequilibrium and founder effect was observed in this Québec population collection. In conclusion, the study shows that the analysis of NF1 gene mutation is complex. No particular founder mutation has been observed in the Québec population."--Résumé abrégé par UM

L’obbligo di denuncia a carico dell’imprenditore estorto fra vecchi e nuovi paradigmi sanzionatori

Il «pacchetto sicurezza» del 2009 ha introdotto una causa di esclusione dalla partecipazione a gare di appalto a carico degli imprenditori che non abbiano denunciato i reati di estorsione e di concussione aggravata commessi a loro danno da terzi. Si tratta di una sanzione di natura amministrativa che tuttavia presenta elementi qualificanti afflittivi di tipo penalistico, tali da giustificarne un inquadramento teorico nella prospettiva della funzione special-preventiva e general-preventiva propria della sanzione penale. Osservata dal punto di vista del fondamento e degli scopi della pena, la misura in commento mostra profili di criticità vuoi a causa del suo ambito di intervento frammentario - circoscritto agli imprenditori che partecipano alle gare per commesse pubbliche e non esteso a tutti gli operatori economici che subiscono il giogo dell’estorsione mafiosa -, vuoi a causa della sovraesposizione sanzionatoria che essa crea a carico degli imprenditori onesti ed a vantaggio degli imprenditori che non denunciano per ragioni di collusione con l’organizzazione criminale. Alla luce della presumibile scarsa efficacia della sanzione in termini di prevenzione generale positiva o allargata, il contributo prospetta l’idea che per conseguire gli obiettivi prefissati sia preferibile ribaltare l’approccio legislativo al problema e sostituire alla logica «punitiva» tipica dell’illecito una logica «premiale». Questa in particolare è volta a prospettare misure premiali di vario tipo (incentivi economici, riduzione dei tempi della burocrazia etc.) a vantaggio degli imprenditori che si siano ribellati al peso dell’intimidazione, denunciando i loro estorsor

LE TECNICHE DI REDAZIONE DELLA LEGGE PENALE NEL QUADRO DEI PRINCIPI COSTITUZIONALI

This research study inscribes itself within that particular area of the juridical knowledge named Legislation Science, and it aims at expanding on the drafting techniques of criminal law. The analysis is first conducted in the frame of the constitutional principles, especially in the light of the principle of legality in those of its declinations which more directly affect the definition of the relations between the Parliament and the juridical order: precision, steadfastness and imperativeness. On the other hand, a truly complete reconstruction of the constitutional dimension of the principle of penal legality claims \u2013 in our opinion \u2013 a conceptual broadening regarding the criminal trial, mainly in the attempt to endow that principle with more meaningful contents and to enforce its value as a parameter of constitutionality of the ordinary penal legislation. Penal legality, thus, is put in strict correlation with the different principle (rectius: with the rule) of cross-examination for the evidence (art. 111 Constitution). The clear and precise formulation of the penal case in point, actually, proves to be a necessity imposed not only by the principle of legality, but also by the principles of the so called \u201cfair trial\u201d, from whose accurate implementation depends the functioning of an accusatorial judgment, which relies on the cross-examination method and on the effective exercise of the right of defending oneself by evidence. As much fundamental appears to be a reconstruction of the international dimension of the principle of legality/steadfastness. What is here mainly pointed out is the regulatory and jurisprudential system of the European Convention on Human Rights, without leaving aside the Institutive Statute of the International Criminal Court, inside which the principle of clarity certainly has a key role. After having outlined the overall frame of the Gr\ufcndnormen able to act as points of reference during the drafting of the penal rules, the research is directed toward an analysis of the current \u201cspiritual situation\u201d of criminal law, in order to highlight the noticeable creativity which characterizes the present interpretative and applicative activity of our jurisprudence. A creativity which has to be ascribed to an almost deliberate and already fairly settled activity of judicial supply. After verifying the very low level of the applicative hold of the criminal law\u2019s principle of steadfastness, the work largely focuses on the main technical procedures of lawmaking on the matter. The practical needs of criminal law are thus considered in the light of the different writing alternatives provided by legislation science: synthetic or general clauses technique and case-studies technique; descriptive or regulatory concepts (both judicial and extrajudicial); legal definitions and legal denominations. The treatment of the above-mentioned techniques of penal rules formulation takes always place with the look constantly directed to some of the most impressive hypothesis of drafting deficit shown by current criminal law. That aims at offering a picture of those jurisprudential enforcements which mostly show a \u201cbad use\u201d of the aforesaid techniques criminal law formulation. De iure condito e condendo, this research ends with the offer of some interpretational proposals directed towards a recovery of the steadfastness, having taken into account especially the solutions provided until now within various reform projects of the penal code since 1992

La tipicita debole del delitto di bancarotta fraudolenta per distrazione. La dialettica tra statica del tipo criminoso e dinamica del processo.

La presente tesi di laurea propone uno studio critico delle fattispecie incriminatrici di «Bancarotta fraudolenta», tra cui, in particolare, quelle previste dagli artt. 216, 1° co., l. fall. e 223, 1° e 2° co. l. fall., anche in considerazione di due importanti pronunce della Corte di Cassazione (Cass. pen., sez. V, 24 settembre 2012, n. 47502, c.d. sentenza «Corvetta»; Cass. pen., sez. V, 7 marzo 2014, n. 32352, c.d. sentenza «Parmalat») che hanno riproposto, in tutta la sua criticità, il dibattuto tema della collocazione nella struttura dei «reati di bancarotta» della sentenza dichiarativa di fallimento. E’ stato così confermato, a seguito del duplice intervento della Cassazione, un «insormontabile» divario tra la dottrina, per lo più orientata a considerare la sentenza dichiarativa dello stato di dissesto come «condizione obiettiva di punibilità» e la giurisprudenza di legittimità, che, rievocando la lontana impostazione espressa nel 1958, continua a qualificare il fallimento come un elemento costitutivo del reato, tuttavia non identificabile come evento della fattispecie di bancarotta (propria ed impropria). La rinnovata attenzione intorno alle fattispecie penali fallimentari – e, più in generale, al sistema penale fallimentare, che presenta spiccati elementi di specialità rispetto all’ordinamento penale codicistico – è l’occasione per tentare una più ampia riflessione sui rapporti tra l’intervento penalistico e la gestione d’impresa, soprattutto nella sua fase terminativa (dissesto irreversibile). La considerazione del contesto economico – aziendale in cui si innestano i comportamenti imprenditoriali suscettibili di assumere rilevanza penale ex art. 216 l. fall. (o ex art. 223 l. fall., 1° co., quando si tratta di un’impresa societaria) è funzionale alla soluzione di essenziali aspetti interpretativi, a cominciare dalla definizione del bene giuridico tutelato dalle norme penali fallimentari. In tal senso, la presente indagine tenta di formulare una soluzione all’alternativa, foriera di importanti implicazioni sul piano della struttura oggettiva delle fattispecie fallimentari, tra la tutela della garanzia creditoria, concepita in termini concretamente patrimoniali oppure intesa come tutela di una funzione di garanzia patrimoniale. L’indagine si concentra inoltre sulla ricostruzione delle modalità della condotta penalmente rilevante descritte dal legislatore all’art. 216, 1° co. (es. dissipazione, distruzione, distrazione, occultamento), tentando di intercettare in senso critico i recenti interventi della giurisprudenza, che, attraverso vari itinerari logico – argomentativi, perviene al sostanziale svuotamento dei connotati modali dell’azione tipica, con gravi esiti sul piano dell’osservanza del principio di determinatezza. L’Autore propone una lettura di questi meccanismi di semplificazione del fatto tipico alla luce di quel fenomeno – sempre attuale e molto discusso – che viene indicato come «processualizzazione» o «flessibilizzazione» delle categorie sostanziali del diritto penale al fine di far fronte alle esigenze proprie dell’accertamento processuale (es. semplificazione dell’onere probatorio). Per tali ragioni, è dedicata alla dimensione processuale delle fattispecie penali fallimentari una particolare attenzione, attraverso un esame attento ed approfondito del formante giurisprudenziale, anche con riferimento a particolari ipotesi, come il concorso di persone nei delitti di bancarotta e la presunta fungibilità tra la condotta di distrazione e l’operazione dolosa nella repressione del fenomeno delle c.d. frodi Carosello. All’analisi delle modalità tipizzate in cui deve estrinsecarsi la condotta penalmente rilevante segue l’approfondimento del profilo dell’offensività del fatto di bancarotta. In tal senso, la tesi affronta il problema di fondo dei delitti di bancarotta fraudolenta patrimoniale: la necessità che si individui un evento, coerente con le esigenze di tipicità ed offensività del fatto tipico, e allo stesso modo tale da non riproporre le aporie derivanti dall’adesione al modello c.d. eziologico proposto dalla sentenza «Corvetta», in cui lo stato irreversibile di dissesto è concepito quale evento, causalmente connesso alla condotta tipica. L’individuazione dell’evento nei reati di bancarotta fraudolenta patrimoniale (propria ed impropria) è tra gli aspetti più controversi (e, forse, irrisolvibili, salvo un intervento legislativo) del diritto penale dell’economia. Dopo un’accurata disamina delle tesi che si sono avvicendate sul tema, il presente lavoro si sofferma sulla ricostruzione delle fattispecie fallimentari come «reati di pericolo concreto», considerando il peculiare modo di atteggiarsi del giudizio di pericolo nel contesto economico – gestionale dell’impresa. La tesi che l’Autore propone è nel senso del recupero della perdurante attualità della critica, proposta da una parte della dottrina (P. Nuvolone) e consistente nel rilevare che la configurazione dello stato di dissesto irreversibile come condizione obiettiva di punibilità estrinseca sottende il pericolo – ampiamente confermato nella prassi giurisprudenziale - di un sindacato retrospettivo delle condotte penalmente rilevanti, anche cronologicamente molto distanti dal fallimento dell’impresa. In definitiva, e tenendo ferma l’impostazione proposta da C. Pedrazzi, la tesi promuove una discussione sulla necessità di istituire un «nesso» tra il fatto di bancarotta e lo stato di dissesto irreversibile; in tal senso, si rende necessario il confronto sia con l’applicazione della teorica dell’imputazione obiettiva dell’evento alle fattispecie fallimentari, che postula un «nesso di rischio» tra la condotta tipica e il dissesto, sia con la teorica della condizione obiettiva di punibilità intrinseca. Pregiudiziale è tuttavia l’individuazione dell’esatto significato del termine dissesto all’interno del sistema penale fallimentare, dal momento che, a causa di successivi interventi legislativi, esso si connota per una pluralità di differenti referenti terminologici. Le criticità che emergono dall’individuazione di un nesso oggettivo o soggettivo – in tal’ultimo caso, apprezzabile sul piano della rappresentazione dello stato di dissesto da parte del soggetto agente – consentono di volgere l’attenzione al più ampio problema del sindacato del giudice penale nell’ambito della gestione dell’impresa, reso ancor più significativo, nella sua problematicità, dall’introduzione dell’art. 217-bis («Esenzioni dai reati di bancarotta»). Infine, lo studio delle fattispecie penali fallimentari si conclude con la considerazione dell’elemento soggettivo, cogliendo due profili particolarmente problematici, l’uno concernente le modalità di accertamento processuale del dolo, e l’altro inerente alla peculiare forma di intensità che questo «necessariamente» assume nei delitti di bancarotta fraudolenta. In ordine al primo profilo, la ricerca evidenzia come l’elemento soggettivo del dolo subisca una surrettizia «normativizzazione», operata dalla giurisprudenza attraverso il ricorso ad un modello di accertamento a carattere presuntivo (dolus ex re). In relazione al secondo profilo, e alla luce della configurazione dei reati di bancarotta accolta dalla giurisprudenza prevalente, l’analisi pone in luce la difficoltà logica di postulare un dolo intenzionale o diretto rispetto all’evento costituito dal dissesto economico - finanziario, con la conseguenza di derubricare implicitamente l’elemento soggettivo doloso alla sola forma «eventuale», da cui derivano le gravi debolezze in ordine alla differenziazione con la c.d. colpa cosciente. L’interrogativo finale al quale la tesi tenta di formulare una risposta è se, in considerazione dei persistenti vizi di determinatezza e delle molteplici perplessità che emergono sul piano dell’imputazione soggettiva, le fattispecie penali fallimentari siano destinate ad evocare sempre un fumus di incostituzionalità, in attesa di un auspicabile ed organico intervento del legislatore

LE CAUTELE INTERDITTIVE NEL SISTEMA PROCESSUALE PENALE

L'attivit\ue0 di indagine si \ue8 diretta verso la verifica dell'emersione di eventuali punti di contatto tra i mezzi cautelari di natura interdittiva applicabili alle persone fisiche e la disciplina dettata nel procedimento de societate per le cautele interdittive applicabili agli enti. In particolare, muovendo dalle innovazioni introdotte dal D. Lgs. 231/2001, si sono ipotizzate linee di sviluppo per gli strumenti di interdizione applicabili alle persone fisiche che garantiscano gli obiettivi della coercizione cautelare minima individuati dalla Corte Europea dei Diritti dell'Uomo.The research has been directed toward the verification of the existence of any points of contact between the interdictive measures applicable to the individuals and the rules set for the precautionary measures in the Corporate liability proceedings. In particular, building on innovations introduced by D. Lgs. 231/2001, it has been hypothesized a system of interdictive measures for individuals to ensure the objectives of minimal precautionary coercion identified by the European Court of Human Rights

Mitochondrial dysfunction in hereditary optic neuropathies

MITOCHONDRIAL DYSFUNCTION IN HEREDITARY OPTIC NEUROPATHIES Mitochondrial pathologies are a heterogeneous group of clinical manifestations characterized by oxidative phosphorylation impairment. At the beginning of their recognition mitochondrial pathologies were regarded as rare disorders but indeed they are more frequent than originally thought. Due to the unique mitochondria peculiarities mitochondrial pathologies can be caused by mutations in both mitochondrial and nuclear genomes. The poor knowledge of pathologic mechanism of these disorders has not allowed a real development of the “mitochondrial medicine”, that is currently limited to symptoms mitigation. Leber hereditary optic neuropathy (LHON) was the first pathology to be linked to a point mutation in the mtDNA. The mechanism by which point mutations in mitochondrial gene encoding Complex I subunits leads to optic nerve degeneration is still unknown, although is well accepted that other genetic or environmental factors are involved in the modulation of pathology, where a pivotal role is certainly played by oxidative stress. We studied the relationship between the Ala16Val dimorphism in the mitochondrial targeting sequence of nuclear gene SOD2 and the 3460/ND1 LHON mutation. Our results show that, in control population, the heterozygous SOD2 genotype is associated to a higher activity and quantity of MnSOD, particularly with respect to Val homozygotes. Furthermore, we demonstrated that LHON patients harboring at least one Ala allele are characterized by an increased MnSOD activity with respect to relative control population. Since the ATP synthesis rate – severely reduced in LHON patients lymphocytes - is not affected by the SOD2 genotype, we concluded that SOD2 gene could modulate the pathogenicity of LHON mutations through a mechanism associated to an increase of reactive oxygen species production. Autosomal dominant optic atrophy (ADOA) is a pathology linked to mutations in nuclear gene encoding Opa1, a dynamin-related protein localized in the mitochondrial matrix. Although the clinical course is slightly different, the endpoint of ADOA is exactly the same of LHON: optic nerve degeneration with specific involvement of retinal ganglion cells. Opa1 is a relatively new protein, whose major role is the regulation of mitochondrial fusion. Mitochondrial morphology is the results of the equilibrium between two opposite force: fusion and fission, two processes that have to be finely regulated in order to preserve mitochondrial and cellular physiology. We studied fibroblasts deriving from ADOA patients characterized by a new deletion in the GTPase domain of the OPA1 gene. The biochemical characterization of ADOA and control fibroblasts has concerned the evaluation of ATP synthesis rate, mitochondrial membrane potential in different metabolic conditions and the morphological status of mitochondria. Regarding ATP synthesis rate we did not find significant differences between ADOA and control fibroblasts even though a trend toward increased reduction in ADOA samples is observed when fibroblasts are grown in absence of glucose or in the medium containing gramicidin. Furthermore, we found that also in ADOA fibroblasts membrane potential is actively maintained by proton pumping of fully functional respiratory chain complexes. Our results indicate that the mutation found in the pedigree analyzed acts primary impairing the mitochondrial fusion without affecting the energy production, supporting the notion that cell function is tightly linked to mitochondrial morphology. Mitochondrial dysfunctions are acquiring great attention because of their recognized relevance not only in aging but also in age-related pathologies including cancer, cardiovascular disease, type II diabetes, and neurodegenerative disorders. The involvement of mitochondria in such detrimental pathologies that, currently, have become so common enhances the necessity of standardization of therapeutic strategies capable of rescuing the normal mitochondrial function. In order to propose an alternative treatment for energy deficiency-disorders we tested the effect of substrates capable to stimulate the substrate-level phosphorylation on viability and energy availability in different experimental models grown under different metabolic conditions. In fibroblasts, the energy defect was achieved by culturing cells in presence of oligomycin, an inhibitor of ATP synthase complex. NARP cybrids have been used as model of mitochondrial pathology. Cell viability and ATP content have been considered as parameters to assay the capability of exogenous substrate to rescue energy failure. Our results suggest that patients suffering for some forms of ATP synthase deficiency, or characterized by a deficiency in energy production, might benefit from dietary or pharmacological treatment based on supplementation of α-ketoglutarate and aspartate