Влияние температуры эритроцитарной взвеси на морфологию и наноструктуру мембран клеток

The problem of unintentional hypothermia in the postoperative period is still an urgent one.The purpose of the work: to assess the effect of the in vitro temperature on the morphology and nanostructure of erythrocyte membranes.Material and methods. 4 containers with erythrocyte suspensions with different blood groups were used; the suspension was packed in sealed containers (400 mL) with CPD blood preservative. The erythrocyte suspension was kept at 4°С. Samples (15 ml) were placed in a thermostat at 20°C and 37°C; then they were placed on the BioRS-24 Mini-Rotator Bioscan (EU) rotator (6—8 rpm). The analysis of the acid-base balance was carried out using the I-510 ionometric converter (Russian Federation). The morphology and nanostructure of erythrocyte membranes were analyzed using an atomic force microscope (AFM) «NTEGRA Prima» (NT-MDT, Russian Federation), in a contact mode, on monolayers prepared using a method of sedimentation in liquid and air.Results. Discocytes were present in monolayers of blood after 1-hour and 12-hour rotation (12±3%) on Day 19 of ES storage at temperature 20°С. The number of echinocytes was 14±2% after a 1-hour rotation and 40±7% after a 12%hour rotation. The number of spheroechinocytes was 74±2% after a 1-hour rotation and 42± 8% after a 12-hour rotation. At a temperature of 37°С, after a 1-hour rotation, four forms of erythrocytes were present in a monolayer: discocytes, echinocytes, spheroechinocytes, and ovalocytes. The distribution of cell forms changed after a 12-hour rotation, and the cells recovered their shapes to discocytes (97±2%).Conclusion. The obtained findings confirm the effect of cooling during erythrocyte preservation. The shape of erythrocytes was changed. The morphological structure of frozen erythrocytes recovers slowly, within 12 hours. It means that the transfusion of red blood cells whose temperature is below 37°C may not be effective for at least 12 hours and the transfusion medium should be warmed to reduce the risk of transfusion of blood products. Проблема непреднамеренной гипотермии в периоперационном периоде остается актуальной.Цель работы: оценить влияние температуры in vitro на морфологию и наноструктуру мембран эритроцитов.Материал и методы. Использовали 4 контейнера эритроцитарной взвеси (ЭВ) с разными группами крови, запакованную в герметичные контейнеры (400 мл) с гемоконсервантом CPD. ЭВ хранили при 4°С. Пробы (15мл) помещали в термостат на 20°C и 37°C и устанавливали на ротатор (6—8 об/мин) BioR-24 Mini-Rotator Bioscan (EU). Анализ кислотно-основного состояния проводили с помощью ионометрического преобразователя «И-510» (РФ). Анализ морфологии и наноструктуры мембран эритроцитов клеток проводили с помощью атомного силового микроскопа (АСМ) «NTEGRA Prima», (NT-MDT, РФ) в контактном режиме на монослоях приготовленных с помощью метода оседания в жидкости и на воздухе.Результаты. На 19-е сутки хранения ЭВ при исследовании крови, сохранявшейся при температуре 20°С, через 1 час и 12 часов ротации в монослоях крови присутствовали дискоциты (12±3%). Количество эхиноцитов после 1 часа ротации составляло 14±2%, после 12 часов ротации — 40±7%. Количество сфероэхиноцитов после 1 часа ротации составляло 74±2%, после 12 часов ротации — 42±8%. При 37°С после 1 часа ротации в монослое присутствовало четыре вида форм эритроцитов, такие как дискоциты, эхиноциты, сфероэхиноциты, овалоциты. После 12 часов ротации распределение форм клеток изменилось, клетки восстановили свою форму до дискоцитов (97±2%).Заключение. Полученные результаты доказывают влияние охлаждения при консервировании эритроцитов. Изменяется форма эритроцитов. Восстановление морфологической структуры замороженных эритроцитов происходит медленно — в течение 12 часов. Это означает, что трансфузия эритроцитов, температура которых ниже 37°С, не может быть эффективной в течение, по крайней мере, 12 часов и требуется согревание трансфузионной среды, чтобы уменьшить риск трансфузии препаратов крови

A Tri-Oceanic Perspective: DNA Barcoding Reveals Geographic Structure and Cryptic Diversity in Canadian Polychaetes

Although polychaetes are one of the dominant taxa in marine communities, their distributions and taxonomic diversity are poorly understood. Recent studies have shown that many species thought to have broad distributions are actually a complex of allied species. In Canada, 12% of polychaete species are thought to occur in Atlantic, Arctic, and Pacific Oceans, but the extent of gene flow among their populations has not been tested.Sequence variation in a segment of the mitochondrial cytochrome c oxidase I (COI) gene was employed to compare morphological versus molecular diversity estimates, to examine gene flow among populations of widespread species, and to explore connectivity patterns among Canada's three oceans. Analysis of 1876 specimens, representing 333 provisional species, revealed 40 times more sequence divergence between than within species (16.5% versus 0.38%). Genetic data suggest that one quarter of previously recognized species actually include two or more divergent lineages, indicating that richness in this region is currently underestimated. Few species with a tri-oceanic distribution showed genetic cohesion. Instead, large genetic breaks occur between Pacific and Atlantic-Arctic lineages, suggesting their long-term separation. High connectivity among Arctic and Atlantic regions and low connectivity with the Pacific further supports the conclusion that Canadian polychaetes are partitioned into two distinct faunas.Results of this study confirm that COI sequences are an effective tool for species identification in polychaetes, and suggest that DNA barcoding will aid the recognition of species overlooked by the current taxonomic system. The consistent geographic structuring within presumed widespread species suggests that historical range fragmentation during the Pleistocene ultimately increased Canadian polychaete diversity and that the coastal British Columbia fauna played a minor role in Arctic recolonization following deglaciation. This study highlights the value of DNA barcoding for providing rapid insights into species distributions and biogeographic patterns in understudied groups

Сравнительный анализ применения тоцилизумаба при тяжелых COVID-19-ассоциированных пневмониях у пациентов разных возрастных групп

According to accumulated clinical data, one of the causes of severe damage to lung epithelial cells associated with SARS-CoV-2 (2019-nCoV) is an acute, timely underestimated "cytokine storm" (cytokine cascade, hypercytokinaemia) with characteristic signs of an expressed hyper-inflammatory syndrome with subsequent polyorganic failure. The study presents the results of the analysis of the effectiveness of tocilizumab therapy (TCZ) in patients (n = 181) of different age groups with developed pneumonia caused by SARS-CoV-2. The aim of the study was to evaluate the effectiveness of TCZ therapy in patients of different age groups with developed pneumonia in the frame of COVID-19. Methods. Patients (n = 181) with community-acquired pneumonia caused by coronavirus SARS-CoV-2 are included in a one-center, non-randomized, prospective study to evaluate the effectiveness of TCZ therapy conducted at the State Public Health Institution "City Clinical Hospital No.52" of the Moscow City Health Department. Patients were divided into 3 age subgroups – up to 50 years, 50–70 years and over 70 years. Patients with community-acquired SARS-CoV-2-induced pneumonia receiving non-invasive oxygen support and patients who had artificial lung ventilation (ALV) were given a single dose of 400 mg of TCZ in addition to basic therapy. Results. There are no significant differences between age groups in the severity of pneumonia according to the data of the computed tomography (CT), however, a more severe condition and a higher mortality rate (p < 0.001) were reliably observed in patients over 70 age compared to the other age groups. After TCZ treatment in patients of each age group, the severity of the condition assessed on the National Early Warning Score (NEWS2) has been significantly reduced compared to the baseline. Conclusion. According to the data of the pilot study the efficacy and safety of TCZ in patients of all presented age groups with COVID-associated pulmonary tissue lesion and signs of "cytokine storm" was demonstrated. At the same time, patients up to 50 years after the therapy of TCZ managed to achieve greater clinical efficiency compared to patients in other groups. According to the severity of the state and laboratory criteria, the lowest clinical efficacy of TCZ therapy was observed in patients over 70 years of age; as a consequence, the highest mortality rate was observed in the same group. At the same time, the TCZ therapy has not had a positive impact on the change of laboratory values and the severity of the disease in case of unfavorable outcome. Согласно накопленным клиническим данным, одной из причин тяжелых повреждений клеток эпителия легких, ассоциированных с SARS-CoV-2 (2019-nCoV), является острый, вовремя недооцененный синдром «цитокинового шторма» (цитокиновый каскад, гиперцитокинемия) с характерными признаками выраженного гипервоспалительного синдрома с последующей полиорганной недоста - точностью. В работе представлены результаты анализа эффективности терапии тоцилизумабом (ТЦЗ) у пациентов (n = 181) разных возрастных групп с развившейся пневмонией в рамках COVID-19. Целью исследования явилась оценка эффективности терапии ТЦЗ у пациентов разных возрастных групп с развившейся пневмонией, вызванной SARS-CoV-2. Материалы и методы. В одноцентровом нерандомизированном проспективном исследовании оценки эффективности терапии ТЦЗ, проведенном на базе Государственного бюд жетного учреждения здравоохранения «Городская клиническая больница № 52» Департамента здравоохранения города Мос - квы, приняли участие пациенты (n = 181) с внебольничной пневмонией, вызванной коронавирусом SARS-CoV-2. Больные были распределены в 3 возрастные подгруппы: до 50 лет, 50–70 лет, старше 70 лет. Пациентам с внебольничной пневмонией, вызванной SARS-CoV-2, получающим неинвазивную кислородную поддержку, и больным, у которых проводилась искусственная вентиляция легких (ИВЛ), в до полнение к основной терапии назначен ТЦЗ однократно в дозе 400 мг. Результаты. Достоверных различий между возрастными группами по тяжести пневмонии по данным компьютерной томографии (КТ) не выявлено, однако отмечено достоверно более тяжелое состояние и более высокий уровень смертности (p < 0,001) у больных старше 70 лет по сравнению с остальными возрастными группами. После терапии ТЦЗ у больных каждой из возрастных групп тяжесть состояния, оцененная по шкале National Early Warning Score (NEWS2), достоверно снизилась по сравнению с исходными показателями. Заключение. По данным пилотного исследования продемонстрирована эффективность и безопасность применения ТЦЗ у пациентов всех представленных возрастных групп с COVID-ассоциированным повреждением легочной ткани и признаками «цитокинового шторма». При этом у пациентов до 50 лет после терапии ТЦЗ удалось добиться бόльшей клинической эффективности по сравнению с больными остальных групп. По степени тяжести состояния и лабораторным критериям самая низкая клиническая эффективность терапии ТЦЗ отмечена у пациентов старше 70 лет; как следствие, в этой же группе отмечен самый высокий уровень смертности. При этом в случае неблагоприятного исхода терапия ТЦЗ не оказывала положительного влияния на изменение лабораторных показателей и степень тяжести заболевания.

THE DYNAMICS OF FUNCTIONAL STATE OF THE CARDIO-VASCULAR SYSTEM DURING 2 YEARS AFTER AORTO-CORONARY SHUNTING

The investigation included 45 patients with coronary heart disease operated for aorto-(mammaro)-coronary artery bypass grafting. It was found that surgical treatment resulted in the improvement of subjective symptoms of angina and increased contractile reserve of the myocardium during the first days after surgery. Significantly increased subjective and objective exercise tolerance, improvement of local myocardial contractility, diastolic function and symptoms of myocardial remodeling were registered only within 6 months after surgery. Assessment of the dynamics of the myocardial contractile reserve can be used as an objective criterion of the earliest positive result of surgical treatment of coronary artery disease