Virus transmis par les graines de legumineuses: methode d'evaluation rapide du taux de transmission d'un lot de graines

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Localisation de deux epitopes sur la capside du virus Y de la pomme de terre

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Biophysical and biochemical properties of baculovirus-expressed CaMV P1 protein.

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Analyse de lots de graines de Pois par la technique ELISA: Taux de transmission du pea seed-borne mosaic virus

International audienceThe present work on group testing describes the reliable detection by ELISA of pea seed-borne mosaic virus (PSbMV) in pea seed lots. In the cultivars studied, the percentage of embryos that were ELISA-positive was correlated with the percentage of seed transmission. But unlike the seed-borne lettuce mosaic virus/lettuce and soybean mosaic virus/soybean systems, when whole pea seed was blended, the assays for PSbMV-infected seed in the experimental lot greatly overestimated the known percentage of seed transmission, due to the extraction of non-seed-transmissible virus from the seed coats. The removal of seed coats thus becomes imperative and a promising mechanical procedure is proposed for routine application. Before grouping embryos, the maximum size of a group can be determined on the basis of the variation in PSbMV titer among about 20 infected embryos oP a given cultivar. In case of pea cv. Amino, the embryo with the lowest virus titer could be detected when mixed with a maximum of 100 healthy embryos. In case of pea cv. Arpad the group size limit proposed is 60 embryos. This limit may thus vary among cultivars and antisera ; a workable limit should therefore be determined for routine use.L’objectif de ce travail est de définir les modalités de traitement de l’échantillon de graines qui permettent d’utiliser la technique ELISA pour la détermination du taux de transmission du pea seed-borne mosaic virus (PSbMV) sur différents lots de graines de Pois. Pour les cultivars étudiés, une bonne corrélation existe entre le pourcentage de transmission et le pourcentage d’embryons qui réagissent positivement au test ELISA. Mais à la différence des observations faites sur graines de Laitue lorsqu’on dose le virus de la Mosaïque de la Laitue ou sur graines de Soja lorsqu’on évalue la transmission du virus de la Mosaïque du Soja, si l’on pratique le test ELISA sur des suspensions résultant du broyage de l’ensemble de la graine avec un homogénéiseur, le pourcentage de graines infectées dépasse très largement le pourcentage de transmission du lot, car, dans ces conditions de broyage, l’antigène présent dans les téguments est lui aussi extrait. Il est donc nécessaire d’éliminer ces téguments avant le test et un procédé mécanique est proposé pour le traitement d’un nombre important de graines dans les conditions de routine. Avant de procéder au test sur les embryons ainsi obtenus, il faut déterminer le nombre maximum d’embryons sains qui, ajoutés à un embryon infecté, forment un groupe positif en ELISA. Cette taille limite a été évaluée à 60 embryons pour le cv. « Arpad », et à 100 embryons pour le cv. « Amino » sur la base d’une étude de variabilité de la concentration en virus sur une vingtaine d’embryons infectés. Avec un antiserum donné, cette limite peut être déterminée de façon simple pour un cultivar considéré. Les problèmes de l’élimination des téguments et de la détermination de la taille du groupe d’embryons étant résolus, la technique ELISA se prête avec précision et reproductibilité à l’analyse de routine des lots de graines de Pois pour le taux de transmission du PSbMV

Factors influencing ELISA evaluation of transmission of pea seed-borne mosaic virus in infected pea seed: seed-group size and seed decortication

The present work on group testing describes the reliable detection by ELISA of pea seed-borne mosaic virus (PSbMV) in pea seed lots. In the cultivars studied, the percentage of embryos that were ELISA-positive was correlated with the percentage of seed transmission. But unlike the seed-borne lettuce mosaic virus/lettuce and soybean mosaic virus/soybean systems, when whole pea seed was blended, the assays for PSbMV-infected seed in the experimental lot greatly overestimated the known percentage of seed transmission, due to the extraction of non-seed-transmissible virus from the seed coats. The removal of seed coats thus becomes imperative and a promising mechanical procedure is proposed for routine application. Before grouping embryos, the maximum size of a group can be determined on the basis of the variation in PSbMV titer among about 20 infected embryos oP a given cultivar. In case of pea cv. Amino, the embryo with the lowest virus titer could be detected when mixed with a maximum of 100 healthy embryos. In case of pea cv. Arpad the group size limit proposed is 60 embryos. This limit may thus vary among cultivars and antisera ; a workable limit should therefore be determined for routine use.L’objectif de ce travail est de définir les modalités de traitement de l’échantillon de graines qui permettent d’utiliser la technique ELISA pour la détermination du taux de transmission du pea seed-borne mosaic virus (PSbMV) sur différents lots de graines de Pois. Pour les cultivars étudiés, une bonne corrélation existe entre le pourcentage de transmission et le pourcentage d’embryons qui réagissent positivement au test ELISA. Mais à la différence des observations faites sur graines de Laitue lorsqu’on dose le virus de la Mosaïque de la Laitue ou sur graines de Soja lorsqu’on évalue la transmission du virus de la Mosaïque du Soja, si l’on pratique le test ELISA sur des suspensions résultant du broyage de l’ensemble de la graine avec un homogénéiseur, le pourcentage de graines infectées dépasse très largement le pourcentage de transmission du lot, car, dans ces conditions de broyage, l’antigène présent dans les téguments est lui aussi extrait. Il est donc nécessaire d’éliminer ces téguments avant le test et un procédé mécanique est proposé pour le traitement d’un nombre important de graines dans les conditions de routine. Avant de procéder au test sur les embryons ainsi obtenus, il faut déterminer le nombre maximum d’embryons sains qui, ajoutés à un embryon infecté, forment un groupe positif en ELISA. Cette taille limite a été évaluée à 60 embryons pour le cv. « Arpad », et à 100 embryons pour le cv. « Amino » sur la base d’une étude de variabilité de la concentration en virus sur une vingtaine d’embryons infectés. Avec un antiserum donné, cette limite peut être déterminée de façon simple pour un cultivar considéré. Les problèmes de l’élimination des téguments et de la détermination de la taille du groupe d’embryons étant résolus, la technique ELISA se prête avec précision et reproductibilité à l’analyse de routine des lots de graines de Pois pour le taux de transmission du PSbMV

Design of division specific primers of Ralstonia solanacearum and application to the identification of european isolates

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Nucleotide sequence of potato virus Y (N strain) genomic RNA

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Etablissement de la sequence nucleotidique du virus Y de la pomme de terre

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