Isolamento e identificação do vírus da Artrite encefalite caprina, a partir do co-cultivo de células mononucleares do sangue com células de membrana sinovial de cabra

Caprine arthritis encephalitis virus is responsive of a progressive, debilitating disease in goats having in vivo tropism for monocyte/macrophage cell lineage. These cells are present in colostrum, milk or blood. Studies demonstrate that the viral replication is activated only following differentiation of monocyte to macrophage, which increase the sensibility of viral detection. In our study it was performed the doublenested PCR technique and co-cultivation of monocyte/macrophage with membrane goat sinovial cells to detect the virus in blood, source of viral transmission. Through these methods, it was detected DNA proviral in seronegative goats, confirming that the time among infection and appearance of antibodies is variable facilitating the permanence of false-negative goats. It was observed divergences in the results between serology and PCR techniques, disagreement that is argued above in the work. The co-cultivation of monocyte/macrophage with membrane goat sinovial cells was successful; it was obtained four viral isolament, one of them from seronegative goats. In conclusion, our studies, for the first time isolate the virus circulating in our flocks, implementing an high specificity double-nested PCR technique to identify early viral infection in goats.O vírus da Artrite encefalite caprina é o agente causal de uma doença progressiva e debilitante em caprinos, em que as células da linhagem monócito/macrófago são as principais hospedeiras do vírus in vivo. Essas células estão presentes no colostro, no leite ou no sangue. Estudos demonstram que a replicação viral é dependente do nível de maturação ou diferenciação da célula monocítica, influenciando na sensibilidade de detecção do vírus. Neste estudo, utilizamos o cocultivo de monócitos/macrófagos com células de membrana sinovial de cabras, para o isolamento do vírus circulante no campo; a técnica de double nested PCR (dn PCR) dos co-cultivos e sangue, viabilizou a confirmação do isolamento viral, e a detecção direta do vírus no sangue. Através dessa técnica, detectou-se a presença do DNA proviral em animais soronegativos por Imunodifusão em Gel de Agarose (IDGA); esses achados confirmam que o tempo entre o inicio da infecção e o aparecimento de anticorpos no sangue é variável, facilitando a permanência de animais falsos-negativos no rebanho. Nas amostras processadas, tivemos uma divergência de resultados entre amostras sorologicamente positivas, entretanto, negativas por dn PCR, quando se utilizou a amplificação direta do sangue. Quanto ao cultivo de monócitos/ macrófagos in vitro e posterior co-cultivo com células de MSC obteve-se êxito pelo isolamento do vírus em quatro animais, havendo sido um deles soronegativo. O presente estudo demonstra o primeiro isolamento do vírus nos rebanhos do estado da Bahia, além da implementação da técnica de dn PCR, em co-cultivo de células

Autistic spectrum disorder in children exposed to the zika virus in pregnancy: a possibility? / Transtorno do espectro autista em crianças expostas ao vírus zika na gestação: uma possibilidade?

This study aimed to describe the neurodevelopmental of children born to mothers exposed to Zika virus (ZIKV) without birth defects. Nine children aged 20 to 46 months were assessed by the Bayley III Scales. Of these, one child had tested positive ZIKV-IgG, whilst the others had negative results. All children underwent neuropediatric evaluation and some had magnetic resonance imaging. Six children had developmental changes (language delay was observed in all of them); four with Autism Spectrum Disorder and two motor and language delay. Three children obtained satisfactory results in Bayley-III. The results shed light on the hypothesis that cognitive changes observed in five children maybe related to exposure to the effects of ZIKV infection on the maternal environment

Cognition of infants exposed to Zika virus in pregnancy: a systematic review / Cognição de bebês expostos ao vírus zika na gestação: revisão sistemática

This article aimed to systematically review the literature on the cognition of children exposed to Zika virus infection (ZIKV) during pregnancy. After searching the main electronic databases, PubMed, Capes, Web of Science, Scopus, Cochrane and BVS, the keywords “Zika virus”, “ZIKV infection”, “pregnancy”, “congenital”, “congenital syndrome”, “development”, “Cognition”, “neurodevelopment”, “child”, “infants”, “neuropsychology”, “developmental disorders”, “Bayley”, “Denver” were used for systematic data search. After applying the eligibility criteria for inclusion, 20 articles related to the cognitive assessment of children exposed to intrauterine ZIKV published until 2019 November, were selected. The systematic review identified the following as the main results: delayed cognition, motor skills, language and personal social domain, with worse performance in children with microcephaly or other severe brain injuries. Most normocephalic children exposed to ZIKV showed performance compatible with age. However, a smaller number of normocephalic children had a low score in at least one evaluated cognitive domain, characterizing specific developmental deficits. This review highlights the high risk of intrauterine ZIKV exposure to neurodevelopment and suggests investigating the cognitive development of all children exposed to ZIKV for long-term cognitive profiling, allowing early access to multidisciplinary rehabilitation programs

Detecção do rotavírus humano em crianças hospitalizadas com quadros diarréicos em Salvador, Bahia, Brasil

Acute infantile diarrhea is an important problem in public healthcare and Rotaviruses are responsible for about 20-40% of the cases of severe dehydrating diarrhea in children at 0-5 years old. In this work, we have analyzed diarrheic feces from children at 0-4 years old hospitalized between October 1998 and December 1999, in Salvador, Bahia, Brazil. In order to detect rotavirus, the samples were analyzed by ELISA (Test-Pack Abbot) and SDS-PAGE tests. The results demonstrated that from the 217 samples tested, 76 (35%) were positive, 127 (58,5 %) were negative and 14 (6,5%) diverged in both tests. The positive samples analyzed by SDS-PAGE test revealed the group A rotavirus and they were classified as short eletropherotypes (Subgroup I) and long eletropherotypes (Subgroup II).A diarréia aguda infantil é um importante problema na saúde pública e os rotavírus são responsáveis por cerca de 20 a 40% dos casos de diarréia severa e desidratação em crianças de 0 a 5 anos de idade. Foram analisadas fezes de crianças de 0 a 4 anos que estiveram hospitalizadas com diarréia no período de outubro de 1998 a dezembro de 1999, em Salvador. As amostras foram analisadas por técnicas de ELISA e SDS-PAGE. Das 217 amostras testadas, 76 (35%) foram positivas para rotavírus, 127 (58,5%) foram negativas e 14 (6,5%) divergiram quanto ao resultado. Através da análise das amostras positivas por SDS-PAGE, pôde-se identificar os rotavírus pertencentes ao grupo A, classificando-os em eletroferotipos curtos, comuns ao subgrupo I, e longos, comuns ao subgrupo II

Detecção de anticorpos contra o vírus da parainfluenza bovina tipo 3 (pi-3) e o vírus da leucose bovina (vlb) em bovinos de diferentes municípios do Estado da Bahia, Brasil.

This work aimed at evaluating antibodies against bovine parainfluenza type 3 (PI-3) and bovine leukemia (BLV) viruses in six counties from the state of Bahia. The samples were bovines, at 1-4 years old, without any previous clinical records, vaccination or laboratory diagnose backgrounds of the illness. From the 187 sera sample analyzed by the haemaglutination test for PI-3, 128 were seropositive (68,5%) and 59 sera (31,5%) negative. The 128 seropositive results showed that 42 sera had 80 IUHA, 67 sera 160-320 IUHA and 11 sera equal or greater than 640 IUHA. The results for BLV using an ELISA commercial test showed 14 seropositive ones (7,5 %) from the 187 sera samples analyzed. The results obtained are discussed in this paper.Neste trabalho, foi avaliada a pesquisa de anticorpos contra o vírus da parainfluenza bovina tipo 3 (PI-3) e o vírus da leucose bovina (VLB), em seis municípios do Estado da Bahia, através de uma amostragem sorológica de 187 bovinos de 1 a 4 anos, sem antecedentes clínicos, vacinação ou diagnóstico laboratorial das doenças em estudo. Do total dos 187 soros analisados para a detecção de anticorpos contra o vírus de PI-3, utilizando a técnica de inibição da hemoaglutinação, 59 soros foram negativos (31,5%) e 128 soros foram positivos (68,5%). Dos 128 soros positivos, 42 soros mostraram ter 80 UIHA, 67 soros, 160-320 UIHA e 11 soros um valor maior do que ou igual a 640 UIHA. Os resultados para VLB, detectados pela técnica de ELISA de uso comercial, mostraram que, dos 187 soros, somente 14 foram positivos (7,5%). Os resultados obtidos são discutidos no trabalho

Produção de antígeno viral para o sorodiagnóstico da artrite-encefalite caprina utilizando um teste imunoenzimático (ELISA)

Caprine-arthritis encephalitis virus (CAEV) is a small ruminant lentivírus, which causes chronicle and progressive illness characterized by encephalomyelitis, mastitis, pneumonia and arthritis. The diagnosis is based on the detection of antibodies against virus through Agar Gel immunodifussion test (AGIDT), a reference technique for CAEV. The objective of this work was to produce CAEV antigen from infected cell culture of goat sinovial membrane to use in a enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test. The pellet from infected cells was submitted to a treatment with SDS 0.1% for possible use as viral antigen in ELISA test. A total of 343 goat serum samples have been tested by indirect ELISA test and compared to AGIDT. The number of positives to ELISA test and AGIDT was 72 (21%) and 30 (8%), respectively. Moreover, the ELISA test detected an early seroconversion in 5 animals from a group of 13 goats during two years of continuous sampling. Relative to those tests, ELISA had a point estimate of 73, 3% sensitivity and 84 % specificity. ELISA test using a viral antigen above mentioned is shown to be effective, low-cost and sensitive for serological detection of antibodies to CAEV.O vírus da Artrite-encefalite caprina (CAEV) é um Lentivírus de pequenos ruminantes, que causa uma doença crônica e progressiva, caracterizada por encefalomielite, mastite, pneumonia e artrite. O diagnóstico é baseado na detecção de anticorpos contra o vírus através da Imunodifusão em Gel de Agarose (IDGA), técnica sorológica de referência para CAEV, porém de baixa sensibilidade. O objetivo deste trabalho foi produzir um antígeno a partir da cultura de células de membrana sinovial caprina (MSC) infectadas com a CAEV, para ser utilizado em um teste diagnóstico (ELISA indireto). O antígeno foi obtido de culturas de células de MSC infectadas e posterior tratamento com SDS 0,1%. Amostras de soros caprinos (n=343) foram utilizadas para detectar a presença de anticorpos para CAEV pelo teste ELISA indireto e a técnica IDGA. Nessas amostras, o teste ELISA detectou 72 ( 21%) amostras positivas. Entretanto, o teste IDGA detectou 30 (8%) amostras positivas. O ELISA indireto também detectou precocemente uma soroconversão em 5 animais de um total de 13 controlados periodicamente durante 2 anos. A sensibilidade e a especificidade do teste ELISA com relação a IDGA foi de 73,3% e 84% respectivamente. Esse ELISA com o antígeno viral assim produzido mostrou-se efetivo, de baixo custo e sensível para o diagnóstico sorológico de anticorpos para CAEV

Predominance of Rotavirus Genotype G9 during the 1999, 2000, and 2002 Seasons among Hospitalized Children in the City of Salvador, Bahia, Brazil: Implications for Future Vaccine Strategies

Two hundred eight of 648 (32%) diarrheal stool samples collected from hospitalized children under 5 years of age during a 3-year period (1999, 2000, and 2002) in the city of Salvador, in the state of Bahia, Brazil, were rotavirus positive. One hundred sixty-four of 208 (78.8%) rotavirus-positive samples had genotype G9 specificity, predominantly in association with P[8]. Other specificities detected were G1 (12.0%) and G4 (1.4%). Viruses with G2, G3, or P[4] specificity were not detected. Rotavirus genotype G9 predominated during each of the three seasons studied; it represented 89.2% of rotavirus strains detected in 1999, 85.3% in 2000, and 74.5% in 2002. G1 viruses (the globally most common G type) have a unique epidemiological characteristic of maintaining predominance during multiple consecutive rotavirus seasons. We have shown in this study for the first time that the G9 viruses also have a similar epidemiological characteristic, albeit for a shorter period of surveillance. The next generation of rotavirus vaccines will need to provide adequate protection against disease caused by G9 viruses

ACUTE GASTROENTERITIS ASSOCIATED WITH NOROVIRUS GII.4 VARIANTS

ABSTRACT BACKGROUND: Norovirus (NoV) is an important etiologic agent of acute gastroenteritis and infects individuals of all ages, especially children in Brazil and worldwide. NoV GII.4 was the most prevalent genotype worldwide because of your extensive genetic diversity. In Brazil, especially in the Northeast, few studies have been developed for identify and molecularly characterize NoV. OBJECTIVE: The present study aimed to detect and describe the molecular epidemiology of NoV associated with acute gastroenteritis. METHODS: The viral RNA extracted from stool samples were subjected to Nested RT-PCR and the genotypes were determined by nucleotide sequences analysis. In total, 278 stool samples assisted at Aliança Hospital in the city of Salvador, with acute gastroenteritis were examined, between March 2009 and July 2012. RESULTS: A high NoV rate (54.2%) was identified in children under 5 years of age. We detected the circulation of different NoV GII.4 variants in Salvador, during the study period as Den Haag 2006b, New Orleans 2009 and Sydney 2012. CONCLUSION: These findings reinforce the need to study the molecular epidemiology of NoV infections in acute gastroenteritis

Alterações na função hepática de pacientes pediátricos infectados pelo vírus da dengue em Salvador

A infecção pelo vírus da dengue possui um amplo espectro de manifestações clínicas: desde sintomas semelhantes aos do resfriado comum até uma apresentação grave, podendo evoluir para óbito. Alguns dos quadros mais graves podem associar-se à síndrome do choque da dengue, frequentemente, fatal em crianças. Essa infecção pode também determinar comprometimento da função hepática, com um quadro difuso de hepatite. Apesar de o acometimento hepático ser, geralmente autolimitado, alguns casos podem evoluir com maior gravidade. Foram avaliadas informações clínicas e laboratoriais relacionadas à função hepática em 55 pacientes pediátricos atendidos em um serviço de pronto atendimento em Salvador, que tiveram diagnóstico de dengue confirmado por quadro clínico e laboratorial (ELISA, imunocromatografia). Foram observados: 61,80% (34/55) de alteração na ALT e 50,90% (28/55) na AST. A variação dos valores de ALT foi de 7-432U/l e de AST foi de 25-537U/l. Náuseas e (ou) vômitos foram referidos por 40,0% (22/55) dos pacientes, assim como dor abdominal, e 3(5,4%) apresentaram hepatomegalia. A elevação de enzimas hepáticas ocorreu em todos os pacientes diagnosticados com síndrome do choque da dengue, enquanto que a alteração de função hepática foi documentada em 51,0% dos pacientes diagnosticados com febre clássica da dengue. Esses dados revelam a importância da avaliação hepática sistemática nos pacientes com dengue clássico e dengue hemorrágica e a necessidade do treinamento dos profissionais de saúde para a atenção a esse aspecto na assistência de pacientes com essa infecção

Alterações na função hepática de pacientes pediátricos infectados pelo vírus da dengue em Salvador

A infecção pelo vírus da dengue possui um amplo espectro de manifestações clínicas: desde sintomas semelhantes aos do resfriado comum até uma apresentação grave, podendo evoluir para óbito. Alguns dos quadros mais graves podem associar-se à síndrome do choque da dengue, frequentemente, fatal em crianças. Essa infecção pode também determinar comprometimento da função hepática, com um quadro difuso de hepatite. Apesar de o acometimento hepático ser, geralmente autolimitado, alguns casos podem evoluir com maior gravidade. Foram avaliadas informações clínicas e laboratoriais relacionadas à função hepática em 55 pacientes pediátricos atendidos em um serviço de pronto atendimento em Salvador, que tiveram diagnóstico de dengue confirmado por quadro clínico e laboratorial (ELISA, imunocromatografia). Foram observados: 61,80% (34/55) de alteração na ALT e 50,90% (28/55) na AST. A variação dos valores de ALT foi de 7-432U/l e de AST foi de 25-537U/l. Náuseas e (ou) vômitos foram referidos por 40,0% (22/55) dos pacientes, assim como dor abdominal, e 3(5,4%) apresentaram hepatomegalia. A elevação de enzimas hepáticas ocorreu em todos os pacientes diagnosticados com síndrome do choque da dengue, enquanto que a alteração de função hepática foi documentada em 51,0% dos pacientes diagnosticados com febre clássica da dengue. Esses dados revelam a importância da avaliação hepática sistemática nos pacientes com dengue clássico e dengue hemorrágica e a necessidade do treinamento dos profissionais de saúde para a atenção a esse aspecto na assistência de pacientes com essa infecção