WORKSHOP TO REVIEW AND UPDATE OSPAR STATUS ASSESSMENTS FOR STOCKS OF LISTED SHARK, SKATES AND RAYS IN SUPPORT OF OSPAR (WKSTATUS)

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Overexpression of the Mitochondrial T3 Receptor p43 Induces a Shift in Skeletal Muscle Fiber Types

In previous studies, we have characterized a new hormonal pathway involving a mitochondrial T3 receptor (p43) acting as a mitochondrial transcription factor and consequently stimulating mitochondrial activity and mitochondrial biogenesis. We have established the involvement of this T3 pathway in the regulation of in vitro myoblast differentiation.We have generated mice overexpressing p43 under control of the human α-skeletal actin promoter. In agreement with the previous characterization of this promoter, northern-blot and western-blot experiments confirmed that after birth p43 was specifically overexpressed in skeletal muscle. As expected from in vitro studies, in 2-month old mice, p43 overexpression increased mitochondrial genes expression and mitochondrial biogenesis as attested by the increase of mitochondrial mass and mt-DNA copy number. In addition, transgenic mice had a body temperature 0.8°C higher than control ones and displayed lower plasma triiodothyronine levels. Skeletal muscles of transgenic mice were redder than wild-type animals suggesting an increased oxidative metabolism. In line with this observation, in gastrocnemius, we recorded a strong increase in cytochrome oxidase activity and in mitochondrial respiration. Moreover, we observed that p43 drives the formation of oxidative fibers: in soleus muscle, where MyHC IIa fibers were partly replaced by type I fibers; in gastrocnemius muscle, we found an increase in MyHC IIa and IIx expression associated with a reduction in the number of glycolytic fibers type IIb. In addition, we found that PGC-1α and PPARδ, two major regulators of muscle phenotype were up regulated in p43 transgenic mice suggesting that these proteins could be downstream targets of mitochondrial activity. These data indicate that the direct mitochondrial T3 pathway is deeply involved in the acquisition of contractile and metabolic features of muscle fibers in particular by regulating PGC-1α and PPARδ

Caractérisation de l'influence de myostatine sur la régulation de la prolifération et de la différenciation des myoblastes

MONTPELLIER-BU Sciences (341722106) / SudocSudocFranceF

Etude de l'implication de c-jun dans la régulation de la différenciation des myoblastes aviaires par la T3

MONTPELLIER-SupAgro La Gaillarde (341722306) / SudocSudocFranceF

Bases moléculaires de l'induction de la transformation des fibroblastes du derme humain après surexpression du récepteur mitonchondrial de la triiodothyronine

MONTPELLIER-BU Sciences (341722106) / SudocSudocFranceF

Les récepteurs mitochondriaux de la triiodothyronine : import et mécanismes d'action

Les hormones thyroïdiennes exercent un très grand nombre d'actions physiologiques recouvrant les processus du développement et du métabolisme. La recherche des récepteurs à l'origine de ce large spectre d'influences a conduit à la caractérisation des récepteurs nucléaires de la triiodothyronine (T3) codés par deux gènes c-erbA$\alpha$ (TR$\alpha)$ et c-erbA$\beta$ (TR$\beta )$. Plus récemment, deux formes tronquées de la partie N-terminale du récepteur nucléaire de la T3 TR$\alpha$1, de masse moléculaire 43 et 28 kDa, ont été identifiées dans la mitochondrie. Elles sont synthétisées à partir de l'utilisation de sites d'initiation internes de la traduction présents sur le messager c-erbA$\alpha$1, puis importées dans la mitochondrie selon un processus atypique par rapport aux connaissances actuelles. Deux séquences d'import mitochondrial ont été identifiées dans la partie C-terminale de ces récepteurs ; de plus, leur extrémité N-terminale, dépourvue de charges négatives, joue un rôle permissif dans l'adressage mitochondrial. Alors que la fonction de la p28 reste inconnue, la p43 est un facteur de transcription T3-dépendant du génome mitochondrial qui agit notamment en hétérodimère avec deux autres formes tronquées de récepteurs nucléaires : mtPPAR et mtRXR. L'activation de la p43 par la T3 induit une stimulation de la synthèse protéique mitochondriale, de l'activité de la chaîne respiratoire et de la mitochondriogenèse. Via la signalisation mitochondrie/noyau, cette voie d'action contrôle l'expression de gènes nucléaires impliqués dans la régulation de la prolifération et de la différenciation. En particulier, la surexpression de p43 stimule la différenciation des myoblastes et l'expression de myosine lente en inhibant l'expression de cMyc et en augmentant celles de calcineurine et myogénine. La comparaison des influences respectives des voies d'action nucléaire et mitochondriale de la T3 fait apparaître, selon les effets considérés, une complémentarité (différenciation des myoblastes, mitochondriogenèse), une additivité (différenciation des myoblastes) ou des actions opposées (expression des myosines), induisant ainsi une finesse particulière de la régulation des effets physiologiques de l'hormone

Influence de la lipophilisation de l'acide rosmarinique sur ses propriétés antioxydantes

De nos jours, l'apport de polyphénols s'avère être bénéfique dans la lutte contre les dommages oxydatifs liés au stress oxydant. Cependant, leur biodisponibilité est limitée par leur polarité. Pour contourner ce problème, une des stratégies consiste à ajuster la lipophilie de l'antioxydant par des réactions de lipophilisation mettant en jeu un vecteur lipidique. Ainsi, des précédentes études ont montré que l'activité antioxydante était directement liée à la longueur de la chaîne alkyle greffée et ont également révélé un effet non linéaire dit effet cut-off . L'objectif de notre étude a donc été de comprendre l'effet non linéaire de la lipophilisation sur l'activité antioxydante de l'acide rosmarinique. Ainsi, des rosmarinates d'alkyle et de diacylglycérol ont été synthétisés, et leurs propriétés antioxydantes évaluées sur des fibroblastes surexprimant une quantité d'EROs. L'effet cut-off a été à nouveau observé avec ces phénolipides. En effet, le rosmarinate de décyle et le 1-rosmarinoyl-2,3-dilauroyl glycérol sont les antioxydants les plus actifs. Cependant, la série des rosmarinates d'alkyle étant la plus efficace, l'influence du vecteur lipidique a été étudié uniquement sur cette dernière. Il a été ainsi constaté que la lipophilisation de l'acide rosmarinique avec une chaîne alkyle de 4 à 10 atomes de carbone améliore son transport au sein de la cellule, alors que les esters à 16 et 18 atomes de carbone s'organisent sous forme d'agrégats extracellulaires limitant ainsi leur internalisation. De plus, alors qu'une partie de ces esters est localisée dans le cytoplasme, tout comme l'acide rosmarinique et le rosmarinate de butyle, le rosmarinate de décyle est en revanche situé dans la mitochondrie. Cette propriété en fait donc une molécule très prometteuse pour la conception de nouveaux antioxydants à activité mitochondriale ciblée. Néanmoins, sa cytotoxicité joue un rôle majeur dans son mécanisme d'action. A fortes concentrations, il affecte la viabilité cellulaire, tandis qu'à faibles concentrations, aucun effet cytotoxique notable n'est mis en évidence.Nowadays, polyphenols supply has proved to be beneficial against oxidative damages linked to oxidative stress. However, their bioavaibility is limited by their polarity. To solve the issue, one strategy consists in adjusting the antioxidant hydrophobicity by lipophilization reactions with lipidic carriers. Indeed, previous studies showed that antioxidant activity was directly linked to the alkyl chain length grafted and also revealed a cut-off effect. The objective of this study is to understand this nonlinear effect of the lipophilization of rosmarinic acid on antioxidant activity. Thus, alkyl rosmarinate and diacylglycerol rosmarinate were synthesized and their antioxidant activity was evaluated into fibroblasts cells overexpressing radical oxygen species. The cut-off effect was again observed with these phenolipids. In fact, decyl rosmarinate and dilauroyl rosmarinate were shown to the best antioxydants. The lipophilization of rosmarinic acid with an alkyl chain from 4 to 10 carbon atoms improve its cell uptake whereas esters of 16 and 18 carbon atoms assemble in extracellular aggregate limiting their cell uptake. Furthermore, one part of these esters is located into cytoplasm like rosmarinic acid and butyl rosmarinate. On the contrary, the decyl rosmarinate (R10) is located into mitochondria. This property allows targeting mitochondria. Nevertheless, its cytotoxicity is involved in mechanism. At high concentration, R10 affects cell viability, while at low concentration, no cytotoxic effect is observed.MONTPELLIER-BU Sciences (341722106) / SudocSudocFranceF

The v-erbA oncogene

chap. 4International audienc

New molecular aspects of regulation of mitochondrial activity by fenofibrate and fasting

International audienc

P43-dependent mitochondrial activity regulates myoblast differentiation and slow myosin isoform expression by control of Calcineurin expression.

Contact: [email protected] audienceWe have previously shown that mitochondrial protein synthesis regulates myoblast differentiation, partly through the control of c-Myc expression, a cellular oncogene regulating myogenin expression and myoblast withdrawal from the cell cycle. In this study we provide evidence of the involvement of Calcineurin in this regulation. In C2C12 myoblasts, inhibition of mitochondrial protein synthesis by chloramphenicol decreases Calcineurin expression. Conversely, stimulation of this process by overexpressing the T3 mitochondrial receptor (p43) increases Calcineurin expression. Moreover, expression of a constitutively active Calcineurin (ΔCN) stimulates myoblast differentiation, whereas a Calcineurin antisense has the opposite effect. Lastly, ΔCN expression or stimulation of mitochondrial protein synthesis specifically increases slow myosin heavy chain expression. In conclusion, these data clearly suggest that, partly via Calcineurin expression, mitochondrial protein synthesis is involved in muscle development through the control of myoblast differentiation and probably the acquisition of the contractile and metabolic phenotype of muscle fibres